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口蹄疫病毒利用未知受体入侵宿主细胞的内吞路径研究

摘要第1-5页
Summary第5-11页
缩略词英汉对照表第11-13页
第一章 绪论第13-23页
   ·口蹄疫第13-14页
     ·概述第13页
     ·口蹄疫病毒基因组与结构第13-14页
   ·口蹄疫病毒受体研究进展第14-17页
     ·口蹄疫病毒整联蛋白受体第14-15页
     ·口蹄疫病毒硫酸乙酰肝素(HS)受体第15页
     ·口蹄疫病毒未知受体第15页
     ·受体在口蹄疫病毒致病性与嗜性中的作用第15-17页
   ·口蹄疫病毒入侵宿主细胞研究进展第17-21页
     ·整联蛋白介导FMDV入侵路径第17-18页
     ·硫酸乙酰肝素介导FMDV入侵路径第18-19页
     ·其他入侵路径第19-20页
     ·口蹄疫病毒与宿主细胞的互作第20-21页
   ·研究背景、目的和意义第21-23页
第二章 口蹄疫病毒入侵宿主细胞的动力学分析第23-37页
   ·材料第23-25页
     ·细胞和病毒第23-24页
     ·主要试剂及配置第24页
     ·实验器材第24-25页
     ·引物设计与合成第25页
   ·试验方法第25-32页
     ·蚀斑试验第25-26页
     ·病毒生长曲线测定第26页
     ·病毒RNA检测第26-29页
     ·间接免疫荧光第29页
     ·蛋白免疫印迹(western blotting)第29-31页
       ·10%聚丙烯酰胺蛋白胶的制备第29-30页
       ·细胞蛋白样品的制备第30页
       ·SDS-PAGE蛋白凝胶电泳及转膜第30-31页
     ·数据分析第31-32页
   ·结果第32-35页
     ·病毒感染不同细胞蚀斑形态第32页
     ·病毒感染不同细胞的生长曲线第32-33页
     ·病毒在不同细胞上的复制曲线第33-34页
     ·间接免疫荧光结果第34-35页
     ·病毒在CHO-677细胞上的蛋白表达结果第35页
   ·讨论第35-37页
第三章 药物处理细胞对口蹄疫病毒入侵的影响第37-48页
   ·材料第39页
     ·主要试剂与配制第39页
     ·试验器材第39页
   ·试验方法第39-41页
     ·MTS法检测化学抑制剂对细胞的毒性第39-40页
     ·化学抑制剂对TF和CTB内化的影响第40-41页
     ·化学抑制剂对FMDV感染的影响第41页
     ·病毒RNA检测第41页
     ·蛋白免疫印迹(western blotting)第41页
   ·结果第41-46页
     ·不同药物对各路径的抑制效果第41-42页
     ·不同药物对FMDV感染的抑制效果第42-44页
     ·FMDV入侵CHO-677细胞依赖酸性pH环境第44-46页
   ·讨论第46-48页
第四章 口蹄疫病毒利用未知受体入侵宿主的路径研究第48-64页
   ·材料第49-51页
     ·质粒第49-50页
     ·主要试剂与配制第50页
     ·引物设计第50-51页
   ·试验方法第51-55页
     ·显性负突变体质粒Eps15Δ95/295的构建第51-54页
       ·PCR扩增目的基因第51-52页
       ·PCR产物纯化回收第52-53页
       ·转化第53页
       ·提取重组质粒第53-54页
     ·细胞转染第54-55页
     ·病毒RNA检测第55页
     ·蛋白免疫印迹(western blotting)第55页
   ·结果第55-62页
     ·FMDV入侵CHO-677细胞依赖网格蛋白和小窝蛋白调节的内吞路径第55-60页
       ·过表达Eps15蛋白的显性负突变体抑制病毒复制第55-57页
       ·过表达Caveolin-1 显性负突变体抑制病毒复制第57-58页
       ·抑制网格蛋白和小窝蛋白表达可抑制病毒的入侵第58-60页
     ·FMDV入侵CHO-677细胞依赖发动蛋白第60-62页
   ·讨论第62-64页
全文结论第64-65页
参考文献第65-70页
致谢第70-71页
作者简介第71-72页
导师简介第72-73页

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