| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 缩略语表 | 第8-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 猪链球菌 | 第11-14页 |
| ·概述 | 第11页 |
| ·流行病学 | 第11-12页 |
| ·猪链球菌的致病机制 | 第12-13页 |
| ·猪链球菌耐药性的研究 | 第13-14页 |
| 2 噬菌体 | 第14-18页 |
| ·噬菌体概述 | 第14-15页 |
| ·噬菌体疗法 | 第15-16页 |
| ·猪链球菌噬菌体 | 第16-18页 |
| 3 裂解酶 | 第18-22页 |
| ·裂解酶概述 | 第18-19页 |
| ·裂解酶的结构组成 | 第19-20页 |
| ·细菌对裂解酶的耐药性 | 第20-21页 |
| ·裂解酶的应用 | 第21-22页 |
| 4 展望 | 第22-23页 |
| 第二篇 试验部分 | 第23-56页 |
| 第一章 LyACCG的结构域片段表达 | 第23-33页 |
| 1 材料方法 | 第23-29页 |
| ·试验菌株和主要试剂 | 第23-24页 |
| ·LyACCG结构域的预测 | 第24页 |
| ·PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第25-26页 |
| ·重组质粒转化E.coli DH5α 感受态细胞 | 第26-27页 |
| ·重组质粒转化E.coli BL21（DE3）感受态细胞 | 第27页 |
| ·各结构域片段的原核表达 | 第27-28页 |
| ·SDS-PAGE分析原核表达的各结构域片段 | 第28-29页 |
| 2 结果 | 第29-31页 |
| ·LyACCG的结构域组成 | 第29页 |
| ·PCR扩增结果 | 第29-30页 |
| ·PCR鉴定及测序分析 | 第30页 |
| ·各结构域片段的原核表达 | 第30-31页 |
| 3 结论 | 第31-33页 |
| 第二章 裂解酶LyACCG的关键结构域鉴定 | 第33-48页 |
| 1 材料方法 | 第33-38页 |
| ·试验菌株和主要试剂 | 第33-34页 |
| ·各结构域片段的裂菌活性检测 | 第34页 |
| ·LyA、LyAC、LyACC和LyACCG裂菌谱的测定 | 第34页 |
| ·LyA、LyAC、LyACC和LyACCG的镍柱纯化 | 第34-35页 |
| ·LyA、LyAC、LyACC和LyACCG的浓度测定 | 第35页 |
| ·LyA、LyAC、LyACC和LyACCG的酶活单位测定 | 第35-36页 |
| ·LyACC和LyACCG生物被膜清除能力测定 | 第36页 |
| ·LyACC的离子纯化 | 第36页 |
| ·LyACC的酶活单位测定 | 第36-37页 |
| ·LyACC最适反应pH的测定 | 第37页 |
| ·还原剂对LyACC裂菌活性的影响 | 第37页 |
| ·金属离子对LyACC裂菌活性的影响 | 第37-38页 |
| 2 结果 | 第38-45页 |
| ·各结构域片段的裂菌活性 | 第38页 |
| ·LyA、LyAC、LyACC和LyACCG的裂菌谱 | 第38-40页 |
| ·镍柱纯化的LyA、LyAC、LyACC和LyACCG的SDS-PAGE分析 | 第40页 |
| ·LyA、LyAC、LyACC和LyACCG的浓度 | 第40页 |
| ·LyA、LyAC、LyACC和LyACCG的酶活单位 | 第40-41页 |
| ·LyACC和LyACCG清除HA9801生物被膜的效率 | 第41-42页 |
| ·SDS-PAGE分析离子纯化的LyACC | 第42页 |
| ·LyACC的酶活单位 | 第42页 |
| ·LyACC的最适反应pH | 第42-43页 |
| ·还原剂对LyACC裂菌活性的影响 | 第43页 |
| ·金属离子对LyACC裂菌活性的影响 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-48页 |
| 第三章 催化域A5的关键氨基酸位点鉴定 | 第48-56页 |
| 1 材料与方法 | 第48-51页 |
| ·试验菌株和主要试剂 | 第48页 |
| ·催化域A5中各氨基酸位点的保守性分析 | 第48页 |
| ·催化域A5中保守氨基酸位点的选择与突变 | 第48-50页 |
| ·催化域A5中保守性较低的酸性氨基酸位点的筛选与突变 | 第50-51页 |
| ·LyACC及其突变体的原核表达 | 第51页 |
| ·LyACC及其突变体的裂菌活性检测 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-54页 |
| ·催化域A5中保守氨基酸位点的选择及突变结果 | 第51-52页 |
| ·催化域A5中保守性较低的酸性氨基酸位点的选择及突变结果 | 第52-53页 |
| ·LyACC及其突变体的裂菌活性 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 试剂配制 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 导师简介 | 第68-70页 |
| 作者简介 | 第70-71页 |
