致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
专业词汇中英文对照 | 第10-14页 |
引言 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-27页 |
·红细胞分化和发育的研究 | 第15-22页 |
·红细胞的分化和发育的研究概述 | 第15-17页 |
·转录因子在红细胞分化和发育中的作用 | 第17-20页 |
·红系分化异常的相关疾病 | 第20-21页 |
·高通量测序技术在红系分化研究中的作用 | 第21-22页 |
·TGIF1研究进展 | 第22-27页 |
·同源异形基因和TALE超家族 | 第22-23页 |
·TGIF1的基因结构 | 第23-24页 |
·TGIF1在造血系统发育中的作用 | 第24页 |
·TGIF1发挥功能的分子机制 | 第24-25页 |
·TGIF1的相关其他研究 | 第25-27页 |
第二章 材料和方法 | 第27-41页 |
·实验材料 | 第27-32页 |
·细胞样品 | 第27页 |
·菌株 | 第27页 |
·质粒 | 第27-28页 |
·所用实验试剂和培养基 | 第28-29页 |
·实验仪器 | 第29页 |
·试剂盒 | 第29-30页 |
·引物合成 | 第30-32页 |
·构建载体的测序 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-41页 |
·PCR反应 | 第32-33页 |
·PCR产物的纯化 | 第33-34页 |
·双酶切反应 | 第34页 |
·DNA琼脂糖凝胶的回收 | 第34-35页 |
·产物与载体的连接反应 | 第35页 |
·转化、涂板和挑单克隆 | 第35页 |
·菌落的鉴定 | 第35-36页 |
·质粒的提取 | 第36页 |
·感受态细胞的制备 | 第36页 |
·DNA和RNA浓度的测定 | 第36-37页 |
·细胞的复苏 | 第37页 |
·细胞的培养和传代 | 第37页 |
·细胞的冻存 | 第37页 |
·细胞的电转 | 第37页 |
·细胞的化学转染 | 第37-38页 |
·细胞总RNA的提取 | 第38页 |
·Western Bloting | 第38页 |
·流式分选 | 第38-39页 |
·流式鉴定细胞分化 | 第39页 |
·生物信息软件分析 | 第39页 |
·统计学分析 | 第39页 |
·高通量mRNA测序和分析 | 第39-41页 |
第三章 结果与讨论 | 第41-59页 |
·高通量测序分析筛选出促红系分化因子TGIF1 | 第41-46页 |
·TGIF1的表达水平在红系分化过程中逐渐升高 | 第41-44页 |
·TGIF1能够促进非红系细胞的珠蛋白的表达 | 第44-45页 |
·TGIF1与促进红系分化相关的GATA1和KLF1密切相关 | 第45-46页 |
·在TF-1细胞中敲低TGIF1能够抑制红系的分化 | 第46-51页 |
·敲低TGIF1的TF-1稳定细胞系的构建 | 第46-47页 |
·TGIF1的敲低能下调珠蛋白基因的表达 | 第47-48页 |
·红系分化表面分子标记CD235a在TGIF1敲低的TF1细胞株中降低 | 第48页 |
·TGIF1的敲低影响了红系特异因子和铁代谢相关基因的表达 | 第48-50页 |
·在TF-1细胞中敲除TGIF1能够抑制细胞系的增殖 | 第50-51页 |
·在TF-1细胞中过表达TGIF1能够促进红系的分化 | 第51-53页 |
·TGIF1过表达的TF-1稳定细胞系的构建 | 第51-52页 |
·过表达TGIF1促进了珠蛋白的表达 | 第52页 |
·红系分化表面标记CD235a随着TGIF1的表达量升高而上升 | 第52-53页 |
·在K562细胞中过表达TGIF1促进珠蛋白的表达 | 第53-54页 |
·mRNA转录组测序分析发现TGIF1的促分化机制 | 第54-59页 |
·TGIF1通过抑制TGFβ通路来影响红系分化 | 第54-55页 |
·TGIF1通过激活GATA1和ALAS2来促进红系分化 | 第55页 |
·TGIF1通过mTOR信号通路和mitotic信号通路来影响祖细胞的增殖 | 第55-59页 |
第四章 结论 | 第59-61页 |
附录 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第69页 |