| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 1 绪论 | 第14-46页 |
| ·犬瘟热概况 | 第14-34页 |
| ·CDV病原学特性 | 第15-27页 |
| ·麻疹病毒属病毒受体分子 | 第27-30页 |
| ·CDV致病机理和CD临床症状 | 第30-33页 |
| ·我国CDV流行现状及其病原生态学概况 | 第33-34页 |
| ·CD的免疫与防治 | 第34-35页 |
| ·负链RNA病毒反向遗传学技术 | 第35-46页 |
| ·不分节段负链RNA病毒的复制和转录 | 第36-38页 |
| ·负链RNA病毒反向遗传操作系统研究进展 | 第38-41页 |
| ·负链RNA病毒反向遗传操作技术的建立 | 第41-42页 |
| ·负链RNA病毒反向遗传操作系统及其应用研究 | 第42-44页 |
| ·CDV病毒反向遗传操作系统及其应用研究 | 第44-46页 |
| 2 犬瘟热病毒TM-CC株全基因组序列分析 | 第46-63页 |
| ·材料与方法 | 第46-51页 |
| ·病毒毒株与载体 | 第46-47页 |
| ·全基因组测序及序列分析 | 第47-51页 |
| ·结果 | 第51-61页 |
| ·全基因组cDNA序列拼接 | 第51页 |
| ·全基因组cDNA序列分析及其同源性分析 | 第51-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 3 犬瘟热病毒TM-CC株反向遗传操作系统的建立 | 第63-74页 |
| ·材料与方法 | 第63-69页 |
| ·病毒株、细胞与载体 | 第63-64页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第64-65页 |
| ·引物设计 | 第65-66页 |
| ·RT-PCR扩增各基因片段及各片段阳性质粒的克隆 | 第66页 |
| ·辅助质粒构建 | 第66页 |
| ·CDV-TM-CC全长基因组的构建 | 第66-67页 |
| ·病毒拯救 | 第67-68页 |
| ·间接免疫荧光对救获病毒的检测 | 第68页 |
| ·Western blotting | 第68页 |
| ·rCDV-TM-CC种毒的制备及滴定 | 第68-69页 |
| ·病毒生长动力学曲线的测定 | 第69页 |
| ·结果 | 第69-72页 |
| ·CDV-TM-CC野毒株基因组全长cDNA克隆和辅助质粒的构建 | 第69-70页 |
| ·病毒拯救 | 第70页 |
| ·间接免疫荧光检测拯救的病毒 | 第70-71页 |
| ·Western blotting | 第71-72页 |
| ·救获病毒体外生长特性 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-73页 |
| ·本章小结 | 第73-74页 |
| 4 表达绿色荧光蛋白重组犬瘟热病毒TM-CC株病毒系统的构建及其生物学特性研究 | 第74-88页 |
| ·材料与方法 | 第74-79页 |
| ·病毒株、细胞与载体 | 第74-75页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第75页 |
| ·引物设计与合成 | 第75页 |
| ·表达EGFP外源基因片段的重组CDV基因组全长cDNA克隆的构建 | 第75-76页 |
| ·病毒的拯救 | 第76-77页 |
| ·救获病毒的序列鉴定 | 第77页 |
| ·重组病毒rCDV-TM-CC-EGFP在VerodogSLAM细胞上生长特性 | 第77页 |
| ·救获病毒免疫荧光检测 | 第77-78页 |
| ·Western blotting | 第78页 |
| ·种毒的制备及滴定 | 第78页 |
| ·病毒生长动力学曲线的测定 | 第78页 |
| ·重组病毒遗传稳定性的检测 | 第78-79页 |
| ·结果 | 第79-86页 |
| ·含有EGFP基因重组CDV基因组全长cDNA克隆的构建 | 第79页 |
| ·病毒的拯救 | 第79-80页 |
| ·重组病毒rCDV-TM-CC-EGFP在VerodogSLAM上感染特性 | 第80-81页 |
| ·激光共聚焦检测拯救的病毒 | 第81-82页 |
| ·Western blotting | 第82页 |
| ·重组病毒体外生长特性 | 第82-83页 |
| ·重组病毒遗传稳定性的检测 | 第83-86页 |
| ·重组病毒H基因抗原表位差异性及表面静态可及性分析 | 第86页 |
| ·讨论 | 第86-87页 |
| ·本章小结 | 第87-88页 |
| 5 表达CPV VP2蛋白的重组CDV/R-20/8株的构建及其生物学特性研究 | 第88-96页 |
| ·材料与方法 | 第88-91页 |
| ·病毒株与载体 | 第88页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第88-89页 |
| ·引物设计与合成 | 第89页 |
| ·CPV基因组DNA的提取 | 第89页 |
| ·表达CPV VP2蛋白重组CDV/R-20/8基因组全长cDNA克隆的构建 | 第89-90页 |
| ·表达CPV VP2蛋白的重组病毒CDV/R-20/8-VP2的拯救 | 第90页 |
| ·间接免疫荧光检测拯救的病毒 | 第90页 |
| ·Western blotting | 第90-91页 |
| ·种毒的制备及滴定 | 第91页 |
| ·病毒生长动力学曲线的测定 | 第91页 |
| ·结果 | 第91-94页 |
| ·表达CPV VP2蛋白重组CDV/R-20/8基因组全长cDNA克隆的构建 | 第91页 |
| ·表达CPV VP2蛋白重组CDV/R-20/8病毒的拯救 | 第91-92页 |
| ·间接免疫荧光对重组病毒rCDV/R-20/8-VP2进行检测 | 第92页 |
| ·Western blotting | 第92-93页 |
| ·重组病毒rCDV/R-20/8-VP2体外生长特性 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-95页 |
| ·本章小结 | 第95-96页 |
| 结论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-123页 |
| 附录 | 第123-124页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
