摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
1 绪论 | 第7-16页 |
·ω-3 多不饱和脂肪酸 | 第7-8页 |
·多不饱和脂肪酸的简介 | 第7页 |
·ω-3 多不饱和脂肪酸的生理功能 | 第7页 |
·ω-3 多不饱和脂肪酸的来源 | 第7-8页 |
·高山被孢霉简介 | 第8-9页 |
·ω3 脂肪酸脱饱和酶 | 第9-11页 |
·表达系统介绍 | 第11-14页 |
·毕赤酵母表达系统 | 第11-12页 |
·无细胞蛋白质合成系统 | 第12-14页 |
·课题研究意义和内容 | 第14-16页 |
·本课题研究意义 | 第14-15页 |
·研究内容 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-25页 |
·实验材料 | 第16-17页 |
·菌株与质粒 | 第16页 |
·工具酶与试剂盒 | 第16页 |
·培养基和培养条件 | 第16-17页 |
·主要仪器与设备 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-25页 |
·ω3 脂肪酸脱饱和酶体外重组表达载体的构建 | 第17-19页 |
·FADS15 基因在毕赤酵母表达系统中的表达 | 第19页 |
·FADS15 基因在麦胚无细胞蛋白质合成系统中的表达 | 第19-20页 |
·FADS15 基因在麦胚无细胞蛋白质合成系统中的可溶性表达 | 第20页 |
·SDS-PAGE 蛋白质凝胶电泳及 Western blot 分析 | 第20-22页 |
·蛋白质浓度的测定 | 第22页 |
·ω3 脂肪酸脱饱和酶的纯化 | 第22-23页 |
·ω3 脂肪酸脱饱和酶的活性检测 | 第23-25页 |
3 结果与讨论 | 第25-38页 |
·ω3 脂肪酸脱饱和酶体外表达载体的构建 | 第25-26页 |
·ω3 脂肪酸脱饱和酶在不同表达系统中的表达 | 第26-27页 |
·FADS15 基因在毕赤酵母表达系统中的表达 | 第26页 |
·FADS15 基因在麦胚无细胞蛋白质合成系统中的表达 | 第26-27页 |
·ω3 脂肪酸脱饱和酶在麦胚无细胞蛋白质合成系统中的可溶性表达 | 第27-33页 |
·蛋白质合成反应过程中未添加膜成分条件下ω3 脂肪酸脱饱和酶的表达 | 第28-29页 |
·蛋白质合成反应过程中添加膜成分条件下ω3 脂肪酸脱饱和酶的表达 | 第29-33页 |
·ω3 脂肪酸脱饱和酶的纯化 | 第33-34页 |
·毕赤酵母系统表达的ω3 脂肪酸脱饱和酶的纯化 | 第33页 |
·麦胚无细胞蛋白质合成系统表达的ω3 脂肪酸脱饱和酶的纯化 | 第33-34页 |
·ω3 脂肪酸脱饱和酶的活性检测 | 第34-36页 |
·ω3 脂肪酸脱饱和酶不同重组表达方式的比较 | 第36-38页 |
主要结论与展望 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45页 |