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高山被孢霉中ω3脂肪酸脱饱和酶的异源表达研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
1 绪论第7-16页
   ·ω-3 多不饱和脂肪酸第7-8页
     ·多不饱和脂肪酸的简介第7页
     ·ω-3 多不饱和脂肪酸的生理功能第7页
     ·ω-3 多不饱和脂肪酸的来源第7-8页
   ·高山被孢霉简介第8-9页
   ·ω3 脂肪酸脱饱和酶第9-11页
   ·表达系统介绍第11-14页
     ·毕赤酵母表达系统第11-12页
     ·无细胞蛋白质合成系统第12-14页
   ·课题研究意义和内容第14-16页
     ·本课题研究意义第14-15页
     ·研究内容第15-16页
2 材料与方法第16-25页
   ·实验材料第16-17页
     ·菌株与质粒第16页
     ·工具酶与试剂盒第16页
     ·培养基和培养条件第16-17页
     ·主要仪器与设备第17页
   ·实验方法第17-25页
     ·ω3 脂肪酸脱饱和酶体外重组表达载体的构建第17-19页
     ·FADS15 基因在毕赤酵母表达系统中的表达第19页
     ·FADS15 基因在麦胚无细胞蛋白质合成系统中的表达第19-20页
     ·FADS15 基因在麦胚无细胞蛋白质合成系统中的可溶性表达第20页
     ·SDS-PAGE 蛋白质凝胶电泳及 Western blot 分析第20-22页
     ·蛋白质浓度的测定第22页
     ·ω3 脂肪酸脱饱和酶的纯化第22-23页
     ·ω3 脂肪酸脱饱和酶的活性检测第23-25页
3 结果与讨论第25-38页
   ·ω3 脂肪酸脱饱和酶体外表达载体的构建第25-26页
   ·ω3 脂肪酸脱饱和酶在不同表达系统中的表达第26-27页
     ·FADS15 基因在毕赤酵母表达系统中的表达第26页
     ·FADS15 基因在麦胚无细胞蛋白质合成系统中的表达第26-27页
   ·ω3 脂肪酸脱饱和酶在麦胚无细胞蛋白质合成系统中的可溶性表达第27-33页
     ·蛋白质合成反应过程中未添加膜成分条件下ω3 脂肪酸脱饱和酶的表达第28-29页
     ·蛋白质合成反应过程中添加膜成分条件下ω3 脂肪酸脱饱和酶的表达第29-33页
   ·ω3 脂肪酸脱饱和酶的纯化第33-34页
     ·毕赤酵母系统表达的ω3 脂肪酸脱饱和酶的纯化第33页
     ·麦胚无细胞蛋白质合成系统表达的ω3 脂肪酸脱饱和酶的纯化第33-34页
   ·ω3 脂肪酸脱饱和酶的活性检测第34-36页
   ·ω3 脂肪酸脱饱和酶不同重组表达方式的比较第36-38页
主要结论与展望第38-39页
致谢第39-40页
参考文献第40-45页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第45页

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