| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 英文縮略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-22页 |
| ·病原学 | 第14-18页 |
| ·分类 | 第14页 |
| ·基因组结构与功能 | 第14-15页 |
| ·PCV DNA复制过程 | 第15-18页 |
| ·滚环复制(RCR)熔炉模型 | 第18页 |
| ·病毒复制相关的蛋白分子与宿主细胞信号通路 | 第18-21页 |
| ·病毒自身编码的Rep蛋白复合体 | 第18-19页 |
| ·病毒复制相关的宿主蛋白分子与信号通路 | 第19-21页 |
| ·酵母单杂交系统 | 第21页 |
| ·问题与展望 | 第21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 与PCV2基因组茎环结构相互作用宿主细胞蛋白的筛选 | 第22-31页 |
| 摘要 | 第22-23页 |
| ·材料与方法 | 第23-25页 |
| ·质粒、菌株、细胞和主要试剂 | 第23页 |
| ·引物设计与目的基因扩增 | 第23页 |
| ·诱饵质粒和诱饵菌株的构建及鉴定 | 第23-24页 |
| ·AbA对诱饵菌株最低抑制浓度的确定 | 第24页 |
| ·PK-15细胞双链cDNA的扩增与纯化 | 第24页 |
| ·酵母单杂交文库的构建和筛选 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-29页 |
| ·诱饵质粒和诱饵酵母菌株的构建 | 第25页 |
| ·诱饵酵母菌株AbA的最低使用浓度的确定 | 第25-26页 |
| ·PK-15细胞双链cDNA的扩增与纯化 | 第26-27页 |
| ·酵母单杂交文库的构建和初步筛选 | 第27-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 三种宿主细胞源蛋白对PCV2复制的调节作用研究 | 第31-43页 |
| 摘要 | 第31-32页 |
| ·材料与方法 | 第32-36页 |
| ·细胞、毒株、质粒、试剂和抗体 | 第32页 |
| ·基因克隆与序列 | 第32-33页 |
| ·重组真核表达质粒的构建 | 第33页 |
| ·Small hairpin RNA(shRNA)表达质粒的构建 | 第33-34页 |
| ·体外转染和稳定细胞系的筛选 | 第34-35页 |
| ·Wstern blot试验 | 第35页 |
| ·总RNA提取与荧光定量PCR | 第35-36页 |
| ·毒价测定 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-42页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第36页 |
| ·重组真核表达载体的鉴定及序列分析 | 第36-38页 |
| ·AP2α2、Elf4和ISCU蛋白表达的检测 | 第38-39页 |
| ·shRNA干扰效果分析 | 第39-40页 |
| ·过表达细胞系中PCV2毒价的测定 | 第40-41页 |
| ·干扰表达细胞系中PCV2毒价的测定 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 全文结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简历 | 第51页 |
