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猪沙波病毒CH430株全基因组测序及VP1 S区原核表达

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-21页
   ·沙波病毒的发现第12-13页
   ·基本生物学特征第13页
   ·理化特性第13-14页
   ·沙波病毒基因分型第14页
   ·基因组结构和功能第14-15页
   ·基因重组第15-16页
   ·结构蛋白第16-17页
     ·VP1第16页
     ·VP2第16-17页
   ·非结构蛋白第17页
   ·衣壳结构第17-18页
   ·细胞培养第18页
   ·流行病学调查第18-19页
   ·临床症状与病理变化第19页
   ·检测方法第19-21页
     ·电子显微镜技术第19-20页
     ·RT-PCR检测第20页
     ·酶联免疫吸附试验方法(ELISA)第20-21页
第二章 猪沙波病毒CH430株全基因组序列测定及生物信息学分析第21-37页
   ·材料和方法第21-25页
     ·材料第21页
     ·方法第21-25页
   ·结果第25-35页
     ·目的片段的扩增第25-26页
     ·重组质粒的鉴定第26页
     ·PoSaV CH430株全序列的分析第26-30页
     ·结构蛋白VP1的分析第30-33页
     ·非结构蛋白p70生物信息学分析结果第33-35页
   ·讨论第35-37页
第三章 PoSaV CH430株衣壳蛋白S区域的原核表达第37-44页
   ·材料与方法第37-40页
     ·样品、载体和菌种第37页
     ·主要试剂和仪器第37页
     ·主要仪器第37页
     ·引物的设计与合成第37-38页
     ·病毒总RNA的提取第38页
     ·衣壳蛋白S区域基因扩增第38页
     ·S区域基因纯化回收第38页
     ·S区域基因与pMD19-T sample载体连接,构建重组质粒pT-S第38页
     ·重组质粒pT-S转化及菌落筛选第38页
     ·质粒DNA提取第38页
     ·重组质粒pT-S双酶切鉴定第38页
     ·原核表达质粒pET-S的构建第38-39页
     ·衣壳蛋白S区域蛋白表达第39页
     ·表达产物的SDS-PAGE电泳鉴定第39页
     ·重组蛋白的纯化第39页
     ·兔源多克隆抗体制备第39页
     ·western-blot分析第39-40页
   ·结果与分析第40-43页
     ·衣壳蛋白S区域基因扩增及重组pT-S质粒的鉴定第40页
     ·重组原核表达载体pET-S的鉴定第40-41页
     ·重组蛋白的表达第41-42页
     ·融合蛋白的纯化第42页
     ·Western blot鉴定第42-43页
   ·讨论第43-44页
第四章 全文结论第44-45页
参考文献第45-53页
附录第53-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页

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