摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-21页 |
·沙波病毒的发现 | 第12-13页 |
·基本生物学特征 | 第13页 |
·理化特性 | 第13-14页 |
·沙波病毒基因分型 | 第14页 |
·基因组结构和功能 | 第14-15页 |
·基因重组 | 第15-16页 |
·结构蛋白 | 第16-17页 |
·VP1 | 第16页 |
·VP2 | 第16-17页 |
·非结构蛋白 | 第17页 |
·衣壳结构 | 第17-18页 |
·细胞培养 | 第18页 |
·流行病学调查 | 第18-19页 |
·临床症状与病理变化 | 第19页 |
·检测方法 | 第19-21页 |
·电子显微镜技术 | 第19-20页 |
·RT-PCR检测 | 第20页 |
·酶联免疫吸附试验方法(ELISA) | 第20-21页 |
第二章 猪沙波病毒CH430株全基因组序列测定及生物信息学分析 | 第21-37页 |
·材料和方法 | 第21-25页 |
·材料 | 第21页 |
·方法 | 第21-25页 |
·结果 | 第25-35页 |
·目的片段的扩增 | 第25-26页 |
·重组质粒的鉴定 | 第26页 |
·PoSaV CH430株全序列的分析 | 第26-30页 |
·结构蛋白VP1的分析 | 第30-33页 |
·非结构蛋白p70生物信息学分析结果 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
第三章 PoSaV CH430株衣壳蛋白S区域的原核表达 | 第37-44页 |
·材料与方法 | 第37-40页 |
·样品、载体和菌种 | 第37页 |
·主要试剂和仪器 | 第37页 |
·主要仪器 | 第37页 |
·引物的设计与合成 | 第37-38页 |
·病毒总RNA的提取 | 第38页 |
·衣壳蛋白S区域基因扩增 | 第38页 |
·S区域基因纯化回收 | 第38页 |
·S区域基因与pMD19-T sample载体连接,构建重组质粒pT-S | 第38页 |
·重组质粒pT-S转化及菌落筛选 | 第38页 |
·质粒DNA提取 | 第38页 |
·重组质粒pT-S双酶切鉴定 | 第38页 |
·原核表达质粒pET-S的构建 | 第38-39页 |
·衣壳蛋白S区域蛋白表达 | 第39页 |
·表达产物的SDS-PAGE电泳鉴定 | 第39页 |
·重组蛋白的纯化 | 第39页 |
·兔源多克隆抗体制备 | 第39页 |
·western-blot分析 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-43页 |
·衣壳蛋白S区域基因扩增及重组pT-S质粒的鉴定 | 第40页 |
·重组原核表达载体pET-S的鉴定 | 第40-41页 |
·重组蛋白的表达 | 第41-42页 |
·融合蛋白的纯化 | 第42页 |
·Western blot鉴定 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
第四章 全文结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-53页 |
附录 | 第53-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |