中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 引言 | 第12-24页 |
·叶籽银杏的发现和分布 | 第12-14页 |
·叶籽银杏的研究现状 | 第14-15页 |
·DNA 甲基化与表观遗传 | 第15-21页 |
·DNA 甲基化分布 | 第17-18页 |
·植物基因组 DNA 甲基化的水平与模式 | 第18-20页 |
·植物基因组 DNA 甲基化的水平 | 第18-19页 |
·植物基因组甲基化模式和遗传 | 第19-20页 |
·DNA 甲基化的生物学意义 | 第20-21页 |
·DNA 甲基化与基因表达调控 | 第20-21页 |
·DNA 甲基化维持基因组稳定性 | 第21页 |
·DNA 甲基化的检测方法 | 第21-24页 |
·甲基化敏感扩增多态性技术 | 第22-23页 |
·特异基因位点的甲基化检测方法 | 第23-24页 |
·本研究的目的意义 | 第24页 |
2 材料与方法 | 第24-36页 |
·实验地概况 | 第24-25页 |
·实验材料、仪器及试剂 | 第25-28页 |
·实验材料的采集 | 第25-26页 |
·仪器、耗材 | 第26页 |
·酶和试剂 | 第26页 |
·试剂配制 | 第26-28页 |
·实验方法 | 第28-36页 |
·基因组 DNA 提取 | 第28-29页 |
·模板 DNA 纯度与浓度的检测 | 第29页 |
·DNA 甲基化 MSAP 体系的建立 | 第29-31页 |
·酶切体系 | 第30页 |
·连接反应体系 | 第30页 |
·预扩增反应及 PCR 程序 | 第30页 |
·选择性扩增及 PCR 程序 | 第30-31页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳及染色 | 第31-32页 |
·6%的聚丙烯酰胺凝胶制作 | 第31页 |
·银染 | 第31-32页 |
·条带统计及甲基化修饰位点的回收 | 第32-33页 |
·数据统计(读带) | 第32页 |
·甲基化修饰位点的回收 | 第32页 |
·二次扩增修饰片段的纯化回收 | 第32-33页 |
·TA 克隆 | 第33-34页 |
·菌液 PCR 鉴定及质粒酶切鉴定 | 第34-35页 |
·菌液 PCR 鉴定 | 第34页 |
·质粒鉴定 | 第34-35页 |
·测序及序列分析 | 第35页 |
·数据分析 | 第35-36页 |
3 结果分析 | 第36-51页 |
·叶籽银杏基因组 DNA 提取 | 第36-37页 |
·DNA 提取 | 第36页 |
·DNA 质量检测 | 第36-37页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第36页 |
·核酸分析仪检测 | 第36-37页 |
·MSAP 体系的优化 | 第37-41页 |
·酶切体系的优化 | 第37-38页 |
·连接反应体系的优化 | 第38页 |
·预扩增体系的优化 | 第38-40页 |
·选扩增体系的优化 | 第40-41页 |
·叶籽银杏 DNA 甲基化的 MSAP 分析 | 第41-47页 |
·DNA 甲基化水平的分析 | 第41-47页 |
·DNA 甲基化模式的分析 | 第47页 |
·遗传多样性分析和甲基化多样性分析 | 第47-49页 |
·不同单株叶籽银杏的聚类分析 | 第47-49页 |
·不同单株叶籽银杏的主成分分析 | 第49页 |
·序列比对分析 | 第49-51页 |
4.讨论 | 第51-54页 |
·MSAP 技术体系的建立和其有效性 | 第51-52页 |
·不同单株叶籽银杏 DNA 甲基化水平和模式的差异 | 第52-53页 |
·不同单株间甲基化的差异与基因表达的关系 | 第53-54页 |
5.结论 | 第54-56页 |
·MSAP 技术体系的建立 | 第54页 |
·叶籽银杏不同单株 DNA 甲基化水平和模式的差异 | 第54-55页 |
·不同单株叶籽银杏的聚类分析和主成分分析 | 第55页 |
·修饰位点同原序列比较 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
附录 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第69页 |