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毛白杨PtAUX1和PtPIN1基因的克隆及遗传转化

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-27页
   ·影响杨树木材性状基因的研究进展第13-14页
     ·木质素合成酶类基因第13页
     ·调节次生生长功能基因第13-14页
     ·合成纤维素酶基因第14页
   ·转基因杨树第14-18页
     ·材性改良基因的研究进展第14-15页
       ·纤维素基因改良工程第14-15页
       ·木质素基因改良工程第15页
     ·抗旱、抗盐碱基因的研究进展第15-16页
       ·抗旱基因研究现状第15-16页
       ·抗盐碱基因研究现状第16页
     ·抗虫基因的研究进展第16-17页
       ·Bt 抗虫基因的研究现状第16-17页
       ·蛋白酶抑制剂 PI 的研究现状第17页
       ·双价抗虫基因的研究现状第17页
     ·转基因杨树的发展前景第17-18页
   ·生长素的研究进展第18-26页
     ·生长素运输的 3 条途径第19-20页
     ·生长素的极性运输第20-22页
       ·生长素的长距离极性运输第21页
       ·生长素在维管组织中的非极性运输第21页
       ·极性与非极途径的关联第21-22页
     ·生长素极性运输与植物发育第22-23页
       ·细胞分裂、分化与极性建立第22页
       ·向性第22-23页
       ·模式第23页
     ·生长素输入载体第23-24页
     ·生长素输出载体第24-26页
       ·磷酸化作用第25页
       ·NPA 的抑制作用第25页
       ·生长素输入抑制剂第25页
       ·生长素和其他激素的调节作用第25-26页
   ·本研究的目的及意义第26-27页
2 材料与方法第27-38页
   ·实验材料第27页
     ·植物材料及其生长条件第27页
     ·菌株和质粒第27页
     ·酶和生化试剂第27页
     ·主要实验仪器第27页
     ·PCR 引物第27页
   ·实验方法第27-38页
     ·植物的种植与培养第27-28页
       ·拟南芥的种植与培养第27-28页
       ·毛白杨的培养第28页
     ·总 RNA 的提取第28-29页
     ·cDNA 的合成第29页
     ·目的基因的克隆第29-31页
       ·PtPIN1 基因的克隆第29-30页
       ·PtAUX1 基因的克隆第30-31页
     ·表达载体的构建第31-32页
       ·克隆载体的构建第31-32页
       ·表达载体的构建第32页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第32-33页
     ·碱法大量质粒 DNA 的提取第33页
     ·农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备和转化第33-34页
       ·农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备第34页
       ·冻融法转化农杆菌第34页
     ·农杆菌介导的毛白杨遗传转化第34-36页
       ·毛白杨的培养第34页
       ·叶盘法转化毛白杨第34-35页
       ·转基因苗的驯化第35页
       ·培养基类型第35-36页
     ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化第36-37页
       ·拟南芥的培养第36页
       ·转化拟南芥第36页
       ·转基因植株的筛选第36-37页
     ·检测转基因植株第37-38页
       ·RT-PCR 检测转基因植株第37页
       ·PtAUX1 转毛白杨植株表型分析第37页
       ·PtPIN1 转毛白杨植株表型分析第37页
       ·PtAUX1 转拟南芥植株表型分析第37-38页
3 结果与分析第38-51页
   ·生长素运输载体基因的克隆第38-43页
     ·PtAUX1 基因的克隆第38-40页
     ·PtPIN1 基因的克隆第40-43页
   ·生长素运输载体基因表达载体的构建第43-45页
     ·PtAUX1 基因表达载体的构建第43-44页
     ·PtPIN1 基因表达载体的构建第44-45页
   ·生长素运输基因转基因植株的表型分析第45-51页
     ·PtAUX1 基因转毛白杨植株的表型分析第45-46页
       ·PtAUX1 基因促进毛白杨幼苗子房的发生第45-46页
       ·PtAUX1 基因促进毛白杨幼苗叶片的产生第46页
       ·PtAUX1 基因诱导毛白杨幼苗体状胚的发生第46页
     ·PtAUX1 基因转拟南芥植株的表型分析第46-49页
       ·PtAUX1 基因对拟南芥根的影响第47页
       ·PtAUX1 基因对拟南芥叶片的影响第47-48页
       ·PtAUX1 基因对拟南芥表皮毛的影响第48页
       ·PtAUX1 基因对拟南芥花器官发育的影响第48-49页
     ·PtPIN1 基因转毛白杨的表型分析第49-51页
       ·PtPIN1 基因促进毛白杨幼苗生长第49-50页
       ·PtPIN1 基因影响毛白杨幼株叶片发育第50-51页
       ·PtPIN1 基因影响毛白杨幼株芽体的分化第51页
4 讨论第51-55页
   ·生长素运输载体基因的序列分析第52页
     ·PtAUX1 基因是生长素输入载体第52页
     ·PtPIN1 基因是生长素输出载体第52页
   ·生长素运输载体基因的功能分析第52-55页
     ·PtAUX1 参与毛白杨根、茎、叶、花的发育第52-55页
     ·PtPIN1 参与毛白杨植株生长、叶片极性建成以及花的发育第55页
5 结论第55-57页
参考文献第57-67页
附录第67-70页
致谢第70-71页
攻读硕士学位期间发表论文情况第71页

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