| 中文摘要 | 第1-16页 |
| Abstract | 第16-20页 |
| 1 前言 | 第20-59页 |
| ·盐胁迫 | 第20-31页 |
| ·盐胁迫对植物的影响 | 第21-23页 |
| ·植物对盐胁迫的响应 | 第23-27页 |
| ·盐胁迫下植物的生长调节 | 第24-25页 |
| ·体内离子平衡的维持 | 第25-26页 |
| ·活性氧自由基的清除 | 第26-27页 |
| ·渗透调节物质的合成 | 第27页 |
| ·盐胁迫信号转导途径 | 第27-31页 |
| ·盐胁迫信号在质膜上的感知 | 第28页 |
| ·钙离子信号转导途径 | 第28页 |
| ·SOS 信号转导途径 | 第28-30页 |
| ·MAPK 级联反应途径 | 第30页 |
| ·ABA 依赖的盐胁迫信号途径 | 第30-31页 |
| ·ABA 代谢过程及信号转导 | 第31-38页 |
| ·ABA 的代谢过程 | 第31-34页 |
| ·ABA 的生物合成 | 第32-33页 |
| ·ABA 的分解代谢 | 第33-34页 |
| ·ABA 的感受及信号转导 | 第34-38页 |
| ·ABA 信号转导中的磷酸化和去磷酸化 | 第35-37页 |
| ·ABA 依赖的盐胁迫信号途径中的调控基因 | 第37-38页 |
| ·MYB 转录因子 | 第38-43页 |
| ·MYB 转录因子结构特征 | 第39-40页 |
| ·R2R3 型 MYB 转录因子分类及功能 | 第40-43页 |
| ·R2R3 型 MYB 转录因子调控初级和次级代谢 | 第42页 |
| ·R2R3 型 MYB 转录因子调控细胞命运 | 第42页 |
| ·R2R3 型 MYB 转录因子调控生长发育 | 第42-43页 |
| ·R2R3 型 MYB 转录因子调控生物和非生物胁迫 | 第43页 |
| ·表观遗传学 | 第43-46页 |
| ·表观遗传学发展及研究内容 | 第44页 |
| ·表观遗传学主要研究方法 | 第44-46页 |
| ·DNA 甲基化与去甲基化 | 第46-53页 |
| ·植物 DNA 甲基化特征 | 第47-49页 |
| ·植物 DNA 甲基化转移酶 | 第49-51页 |
| ·植物 DNA 去甲基化与去甲基化酶 | 第51-52页 |
| ·DNA 调控基因表达的机制 | 第52-53页 |
| ·RNA 介导的 DNA 甲基化 | 第53-56页 |
| ·siRNA 的形成 | 第53-54页 |
| ·RdDM 的作用机制 | 第54-56页 |
| ·表观遗传学对植物响应非生物胁迫的调控 | 第56-57页 |
| ·表观遗传学与环境因素 | 第56页 |
| ·植物 RdDM 调控对盐胁迫的响应 | 第56-57页 |
| ·本研究的目的及其意义 | 第57-59页 |
| 2 材料与方法 | 第59-87页 |
| ·材料 | 第59-63页 |
| ·植物材料 | 第59页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第59页 |
| ·载体与植株 | 第59页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第59-60页 |
| ·实验引物及探针 | 第60-61页 |
| ·网络信息资源 | 第61-63页 |
| ·方法 | 第63-87页 |
| ·植物基因组 DNA 的提取与纯化 | 第63-64页 |
| ·植物基因组的大量提取 | 第63-64页 |
| ·植物基因组的纯化 | 第64页 |
| ·植物基因组的小量提取 | 第64页 |
| ·亚硫酸氢盐处理测序 | 第64-65页 |
| ·RNA 的提取 | 第65-69页 |
| ·RNeasy Plant Mini Kit 提取总 RNA | 第65-66页 |
| ·miRcute miRNA Isolation Kit 提取 sRNA | 第66-67页 |
| ·TRIZOL 法提取总 RNA | 第67页 |
| ·RNA 的纯化 | 第67-68页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第68页 |
| ·miRcute miRNA cDNA 第一链的合成 | 第68-69页 |
| ·PCR 扩增 | 第69-72页 |
| ·普通 PCR 扩增 | 第69-70页 |
| ·半定量 RT-PCR（Semiquantitative RT-PCR） | 第70页 |
| ·实时荧光定量 PCR（Real-time quantitative PCR, qRT-PCR） | 第70-71页 |
| ·miRcute miRNA 荧光定量 PCR | 第71-72页 |
| ·亚硫氢酸盐测序 PCR（Bisulfite Sequencing PCR, BSP） | 第72页 |
| ·载体构建 | 第72-74页 |
| ·凝胶电泳中 DNA 片段的回收 | 第72-73页 |
| ·连接反应 | 第73页 |
| ·酶切反应 | 第73页 |
| ·超表达载体的构建 | 第73页 |
| ·启动子驱动 gusA 报告基因表达载体的构建 | 第73-74页 |
| ·RNAi 干涉表达载体的构建 | 第74页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第74-76页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第74页 |
| ·大肠杆菌细胞的转化 | 第74页 |
| ·煮沸法提取大肠杆菌中质粒 | 第74-75页 |
| ·大量法提取大肠杆菌中质粒 | 第75页 |
| ·小量碱法提取大肠杆菌中质粒 | 第75-76页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第76页 |
| ·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备 | 第76页 |
| ·冻融法转化农杆菌细胞 | 第76页 |
| ·植物材料的遗传转化及鉴定 | 第76-78页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第76-77页 |
| ·转基因拟南芥的鉴定 | 第77页 |
| ·突变体纯合植株的鉴定 | 第77-78页 |
| ·本生烟瞬时转化 | 第78页 |
| ·洋葱表皮细胞转化 | 第78页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察 GFP 定位 | 第78-79页 |
| ·转基因植物的 GUS 表达分析 | 第79-81页 |
| ·转基因植物的 GUS 组织化学染色分析 | 第79-80页 |
| ·转基因植物的 GUS 活性测定 | 第80-81页 |
| ·siRNA Northern Blot 杂交 | 第81-84页 |
| ·实验准备 | 第81页 |
| ·sRNA 提取 | 第81-82页 |
| ·sRNA 电泳（聚丙烯酰胺凝胶电泳） | 第82-83页 |
| ·sRNA 转膜及固定 | 第83页 |
| ·探针制备 | 第83页 |
| ·siRNA 杂交 | 第83-84页 |
| ·染色质免疫共沉淀（CHIP） | 第84-87页 |
| ·药品配置 | 第84-85页 |
| ·材料准备 | 第85页 |
| ·操作步骤 | 第85-87页 |
| 3 结果与分析 | 第87-121页 |
| ·拟南芥 DNA 甲基化调控的盐胁迫诱导表达基因的筛选 | 第87-93页 |
| ·拟南芥盐胁迫响应基因的筛选 | 第87-88页 |
| ·拟南芥盐胁迫响应基因中 DNA 甲基化调控基因的筛选 | 第88-90页 |
| ·DNA 甲基化调控响应盐胁迫候选基因的试验验证 | 第90-93页 |
| ·AtMYB74 的序列分析及蛋白结构预测 | 第93-95页 |
| ·AtMYB74 的启动子序列分析 | 第93-94页 |
| ·AtMYB74 的蛋白序列分析 | 第94页 |
| ·AtMYB74 蛋白结构预测 | 第94-95页 |
| ·AtMYB74 的亚细胞定位 | 第95-97页 |
| ·35S::AtMYB74-GFP 表达载体的构建 | 第95-96页 |
| ·AtMYB74-GFP 融合蛋白在洋葱表皮细胞中的表达和亚细胞定位 | 第96-97页 |
| ·AtMYB74 表达模式分析 | 第97-100页 |
| ·AtMYB74 组织表达模式分析 | 第97-98页 |
| ·AtMYB74 诱导表达模式分析 | 第98-100页 |
| ·AtMYB74 超表达植株及 RNAi 植株的表型及功能鉴定 | 第100-104页 |
| ·AtMYB74 RNAi 植株及超表达植株的获得 | 第100-101页 |
| ·盐胁迫下 AtMYB74 超表达及 RNAi 植株的表型鉴定 | 第101-103页 |
| ·盐胁迫下 ABA 抑制剂处理后 AtMYB74 超表达植株表型鉴定 | 第103页 |
| ·盐胁迫下 AtMYB74 靶基因鉴定 | 第103-104页 |
| ·盐胁迫下 AtMYB74 的启动子 DNA 甲基化分析 | 第104-108页 |
| ·盐胁迫下 RdDM 突变体和去甲基化酶 RNAi 植株中 AtMYB74 的表达量检测 | 第104-105页 |
| ·盐胁迫下 RdDM 突变体和去甲基化酶 RNAi 植株中 AtMYB74 启动子区 DNA 甲基化水平分析 | 第105-107页 |
| ·盐胁迫下 AtMYB74 表达量与 DNA 甲基化实时检测 | 第107-108页 |
| ·盐胁迫下靶向 AtMYB74 启动子的 24-nt siRNA 分析 | 第108-111页 |
| ·AtMYB74 启动子 DNA 甲基化的调控区域的 24-nt siRNA 分析 | 第108-110页 |
| ·盐胁迫下靶向 AtMYB74 启动子的 24-nt siRNA 积累量检测 | 第110-111页 |
| ·本生烟中对外源 24-nt siRNA 介导 AtMYB74 启动子 DNA 甲基化的验证 | 第111-114页 |
| ·侵染本生烟的瞬时表达载体的构建 | 第111-112页 |
| ·本生烟瞬时共转化后 GUS 活性检测 | 第112页 |
| ·本生烟瞬时共转化后启动子 DNA 甲基化水平分析 | 第112-113页 |
| ·本生烟瞬时共转化后 siRNA 积累量检测 | 第113-114页 |
| ·RdDM 与 ABRE 在调控 AtMYB74 启动子响应盐胁迫中的作用分析 | 第114-121页 |
| ·AtMYB74 启动子 ABRE 顺式作用元件分析 | 第114-116页 |
| ·ABA 信号途径重要转录因子 ABI5 与 AtMYB74 启动子结合验证 | 第116-117页 |
| ·abi5 突变体中 AtMYB74 对盐胁迫的响应分析 | 第117页 |
| ·盐胁迫下 abi5 突变体中 AtMYB74 启动子 DNA 甲基化水平分析 | 第117-118页 |
| ·盐胁迫下 abi5 突变体中靶向 AtMYB74 启动子的 24-nt siRNA 积累量检测 | 第118-119页 |
| ·盐胁迫下缺失 RdDM 调控区域的 AtMYB74 启动子转基因植株组织化学染色 | 第119-121页 |
| 4 讨论 | 第121-125页 |
| 5 结论 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-144页 |
| 致谢 | 第144-145页 |
| 攻读学位期间发表论文及专利 | 第145页 |
