中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
1 前言 | 第14-29页 |
·蛋白质的翻译后修饰 | 第14-15页 |
·蛋白质的酰基化修饰 | 第15-17页 |
·N-棕榈酰化 | 第16页 |
·S-棕榈酰化 | 第16-17页 |
·蛋白质棕榈酰化的特征 | 第17页 |
·蛋白质棕榈酰化修饰的功能 | 第17-19页 |
·棕榈酰基转移酶 | 第19-21页 |
·MBOAT 类棕榈酰基转移酶 | 第19页 |
·Longin domain 类棕榈酰基转移酶 | 第19-20页 |
·DHHC-CRD 类棕榈酰基转移酶 | 第20-21页 |
·真核生物中棕榈酰基转移酶的功能及底物研究 | 第21-27页 |
·酵母中的棕榈酰基转移酶的功能及底物 | 第21-23页 |
·哺乳动物中的棕榈酰基转移酶的功能及底物 | 第23-24页 |
·植物中的棕榈酰基转移酶的功能及底物 | 第24-27页 |
·拟南芥中棕榈酰基转移酶的功能研究 | 第24-25页 |
·拟南芥中棕榈酰基转移酶的底物研究 | 第25-27页 |
·本研究的目的及其意义 | 第27-29页 |
2 材料与方法 | 第29-50页 |
·材料 | 第29-30页 |
·植物材料及生长条件 | 第29页 |
·菌株和质粒 | 第29页 |
·酶及生化试剂 | 第29-30页 |
·PCR 引物 | 第30页 |
·方法 | 第30-50页 |
·构建转基因植物表达载体 | 第30-35页 |
·植物总 RNA 的提取(试剂盒法) | 第30页 |
·反转录 | 第30-31页 |
·植物基因组 DNA 提取(小量法) | 第31页 |
·Phusion PCR 扩增 | 第31-32页 |
·PCR 产物回收(试剂盒法) | 第32-33页 |
·TOPO 连接反应 | 第33页 |
·大肠杆菌转化及质粒提取(试剂盒法) | 第33-34页 |
·DNA 序列测定 | 第34页 |
·LR 反应 | 第34页 |
·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第34-35页 |
·农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第35-37页 |
·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备与转化 | 第35-36页 |
·拟南芥的栽培及转化 | 第36-37页 |
·qRT-PCR | 第37页 |
·引物设计及合成 | 第37页 |
·反应条件及结果分析 | 第37页 |
·原位杂交分析 | 第37-42页 |
·材料的固定 | 第37页 |
·材料的包埋 | 第37-38页 |
·切片 | 第38页 |
·探针标记 | 第38-40页 |
·脱蜡、消化、乙酰化和杂交 | 第40-41页 |
·洗片 | 第41-42页 |
·检测 | 第42页 |
·GUS 染色分析 | 第42-43页 |
·GUS 染色后的石蜡切片 | 第43页 |
·取材固定 | 第43页 |
·脱水、透明、浸蜡、包埋 | 第43页 |
·钌红染色 | 第43页 |
·扫描电子显微镜观察 | 第43-44页 |
·透射电子显微镜观察 | 第44-45页 |
·拟南芥花粉萌发及染色分析 | 第45-46页 |
·拟南芥叶表皮细胞形态观察 | 第46页 |
·拟南芥叶肉原生质体的制备及转化 | 第46-48页 |
·拟南芥胚珠光学切片观察 | 第48页 |
·激光共聚焦扫描隧道显微镜观察及图像处理 | 第48页 |
·药剂处理及荧光染料染色 | 第48-50页 |
·FM4-64 染色 | 第48页 |
·BFA 处理 | 第48-49页 |
·2-BP 处理 | 第49-50页 |
3 结果与分析 | 第50-70页 |
·PAT10 功能缺失突变体的表型分析 | 第50-58页 |
·PAT10 功能缺失突变体的鉴定 | 第50-53页 |
·转录水平鉴定 PAT10 功能缺失突变体 | 第50页 |
·pat10 的表型分析 | 第50-53页 |
·pat10 雄配子体功能异常 | 第53-55页 |
·pat10 雌配子体功能异常 | 第55-58页 |
·PAT10 的表达模式及其蛋白的亚细胞定位分析 | 第58-63页 |
·启动子连接报告基因分析 PAT10 表达模式 | 第58页 |
·原位杂交实验分析 PAT10 的表达模式 | 第58-59页 |
·pat10 的功能互补实验及蛋白质亚细胞定位研究 | 第59-63页 |
·pat10 的功能互补实验 | 第59页 |
·PAT10 的亚细胞定位研究 | 第59-62页 |
·PAT10 的功能由其酶活性体现 | 第62-63页 |
·PAT10 的功能及底物研究 | 第63-70页 |
·pat10 纯合突变体对盐处理超敏感 | 第63-65页 |
·PAT10 通过棕榈酰化调控 CBL2/3/6 的液泡膜定位 | 第65-70页 |
4 讨论 | 第70-74页 |
·拟南芥 PAT10 通过蛋白质棕榈酰化调控液泡的功能 | 第70-71页 |
·拟南芥 PAT10 的底物 | 第71-72页 |
·PAT10 的亚细胞运输 | 第72-74页 |
5 结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第88页 |