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拟南芥RNA解旋酶AtHelps调控盐胁迫抗性的分子机理

符号说明第1-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-15页
1 前言第15-51页
   ·盐胁迫第15-23页
     ·高盐胁迫对植物的影响第15-18页
     ·高盐对新陈代谢过程的影响第18-19页
     ·植物对高盐胁迫的适应性响应第19-23页
       ·植物在形态结构方面对于高盐的适应第19-20页
       ·离子稳态的调节第20-21页
       ·渗透调节物质的积累第21-22页
       ·活性氧的清除第22-23页
   ·盐胁迫的信号转导途径第23-28页
     ·盐胁迫的最初感受第24页
     ·盐过敏感(salt overly sensitive, SOS)信号转导途径第24-26页
     ·钙依赖型蛋白激酶(calcium-dependent protein kinase, CDPK)级联反应途径第26页
     ·脱落酸(abscisic acid, ABA)信号通路第26页
     ·磷脂信号通路第26-27页
     ·促分裂原活化蛋白激酶级联反应途径第27-28页
     ·Ca~(2+)在盐胁迫信号转导中的作用第28页
   ·重要的 Na~+转运蛋白第28-32页
     ·环核苷酸门控通道(CNGC)第28-29页
     ·质膜定位的 SOS1 蛋白第29-30页
     ·胞内定位的 NHX 家族第30-31页
     ·HKT 家族第31-32页
   ·植物激素第32-40页
     ·经典植物激素的主要生理效应第32-33页
     ·主要生物激素的受体及其信号转导第33-37页
       ·受体定位于胞内,信号转导起始依赖于泛素化途径的激素第34-35页
       ·受体定位于膜内,信号转导起始依赖于磷酸化状态改变的激素第35-37页
     ·植物激素与植物的抗盐性第37-40页
       ·ABA 与植物抗盐性第37页
       ·乙烯与植物抗盐性第37-38页
       ·细胞分裂素与植物抗盐性第38页
       ·赤霉素与植物抗盐性第38-39页
       ·生长素与植物抗盐性第39页
       ·多种激素调控的网络性第39-40页
   ·解旋酶第40-49页
     ·解旋酶的定义第40页
     ·解旋酶的结构特征第40-42页
     ·解旋酶的分类第42-43页
     ·解旋酶的作用模式第43-44页
     ·RNA 解旋酶的生物学功能第44-47页
     ·SKI2 家族第47-48页
     ·解旋酶在植物中研究进展第48-49页
   ·本研究的目的与意义第49-51页
2 材料与方法第51-69页
   ·实验材料第51-52页
     ·植物材料第51页
     ·菌株与质粒第51页
     ·酶与各种生化试剂第51页
     ·引物第51-52页
   ·实验方法第52-68页
     ·RNA 的提取第52-54页
     ·RNA 中基因组 DNA 的去除第54页
     ·RNA 反转录第54页
     ·植物基因组的提取与纯化第54-55页
     ·载体构建第55-57页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第57-58页
     ·质粒 DNA 的提取第58-59页
     ·植物表达载体的农杆菌转化第59-60页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化第60页
     ·Western Blot第60-64页
     ·GUS 分析第64-66页
     ·花青素含量测定第66页
     ·石蜡切片制作第66-67页
     ·转化洋葱表皮细胞观察 GFP 定位第67页
     ·Confocal 510Meta 观察 GFP 定位第67-68页
     ·进化树的获得第68页
   ·网络资源第68-69页
3 结果与分析第69-93页
   ·研究对象 AtHelps 的确定及结构特征第69-71页
     ·AtHelps 作为研究对象的确定第69-70页
     ·AtHelps 的结构特征第70-71页
   ·AtHelps 的表达模式分析第71-73页
     ·AtHelps 的器官和时期表达模式分析第71-72页
     ·AtHelps 的诱导表达模式分析第72-73页
   ·AtHelps 的启动子活性分析第73-76页
   ·AtHelps 的亚细胞定位第76-78页
     ·AtHelps-GFP 融合蛋白载体的构建第76页
     ·AtHelpsN-GFP 的洋葱表皮瞬时转化定位第76-77页
     ·AtHelpsN-GFP 的稳定转化株系根尖和原生质体定位第77-78页
   ·AtHelps 的 knockdown 突变体和超表达株系的获得第78-79页
   ·AtHelps 参与到了盐胁迫的响应第79-83页
     ·AtHelps 参与的不同时期及表型分析第79-81页
     ·AtHelps 响应盐胁迫的离子毒害第81-83页
   ·AtHelps 响应盐胁迫的分子机理第83-91页
     ·ABA 参与到了 AtHelps 对于盐胁迫的响应第83页
     ·ABA 途径相关基因的表达分析第83-85页
     ·突变体中 ABI3/5 蛋白的稳定性与表型的关系第85-87页
     ·AtHelps 参与了萌发后生长阶段的盐胁迫抗性过程第87-88页
     ·钠离子体内的优化分配是突变体萌发后生长阶段抗盐的主要原因第88-90页
     ·靶 mRNA 稳定性的增加是突变体盐胁迫抗性增强的重要原因第90-91页
   ·AtHelps 参与其它非生物胁迫响应第91-93页
4 讨论第93-97页
5 结论第97-98页
参考文献第98-112页
致谢第112-113页
攻读学位期间发表论文情况第113页

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