| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 第一章 白细胞介素-6的研究进展 | 第12-24页 |
| 1 白细胞介素-6的发现 | 第12页 |
| 2 白细胞介素-6的产生和结构 | 第12-13页 |
| 3 白细胞介素-6受体 | 第13-14页 |
| ·IL-6Rα | 第13页 |
| ·gp130 | 第13-14页 |
| 4 白细胞介素-6作用的信号转导通路 | 第14页 |
| 5 白细胞介素-6的生物学功能 | 第14-16页 |
| ·调节免疫应答 | 第14-15页 |
| ·促进细胞分化及抗体产生 | 第14-15页 |
| ·调节造血系统 | 第15页 |
| ·诱导肝细胞产生急性期蛋白 | 第15页 |
| ·调节肿瘤生长 | 第15-16页 |
| ·调节神经内分泌系统 | 第16页 |
| 6 白细胞介素-6的表达 | 第16页 |
| 7 白细胞介素-6的生物学活性检测 | 第16-17页 |
| 8 白细胞介素-6的应用前景 | 第17-19页 |
| 参考文献 | 第19-24页 |
| 第二章 鸡白细胞介素-6在毕赤酵母中的表达、纯化及活性检测 | 第24-54页 |
| 1 材料 | 第24-25页 |
| ·质粒、菌株、毒株、细胞及实验动物 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| 2 方法 | 第25-35页 |
| ·chIL-6的原核表达和多抗制备 | 第25-28页 |
| ·引物的设计与合成 | 第25页 |
| ·chIL-6基因片段的PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·酶切 | 第26页 |
| ·连接 | 第26-27页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·转化 | 第27页 |
| ·重组克隆的筛选 | 第27页 |
| ·ch/L-6在大肠杆菌中的表达 | 第27页 |
| ·大肠杆菌制备rchIL-6蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| ·chIL-6多抗的制备 | 第28页 |
| ·chIL-6多抗的鉴定 | 第28页 |
| ·表达chIL-6的重组毕赤酵母菌的构建 | 第28-31页 |
| ·引物设计与合成 | 第28-29页 |
| ·chIL-6成熟肽编码区的PCR扩增 | 第29页 |
| ·重组表达载体pPICZαA-IL6的构建 | 第29页 |
| ·重组克隆的筛选 | 第29页 |
| ·pPICzαA-IL-6质粒的大量制备及纯化 | 第29页 |
| ·重组质粒pPICzαA-IL-6的转化 | 第29-30页 |
| ·电穿孔转化 | 第30页 |
| ·高抗性转化子的筛选 | 第30页 |
| ·His~+Mut~+与His~+Muts~-表型的鉴别 | 第30页 |
| ·阳性转化子的PCR鉴定 | 第30-31页 |
| ·rchIL-6诱导表达条件的确定 | 第31页 |
| ·rchIL-6的大量诱导表达与纯化 | 第31-33页 |
| ·rchIL-6的表达 | 第31页 |
| ·rchIL-6的纯化 | 第31-33页 |
| ·rchIL-6的生物活性检测 | 第33-34页 |
| ·促7TD1细胞生长试验 | 第33-34页 |
| ·促淋巴细胞增殖试验 | 第34页 |
| ·rchIL-6的免疫佐剂作用研究 | 第34-35页 |
| ·试验分组 | 第34页 |
| ·HI抗体水平监测 | 第34页 |
| ·鸡外周血T淋巴细胞亚群分类检测 | 第34-35页 |
| ·攻毒保护试验 | 第35页 |
| 3 结果 | 第35-50页 |
| ·chIL-6多抗的制备 | 第35-38页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第35-36页 |
| ·阳性重组克隆的鉴定 | 第36页 |
| ·rchIL-6原核表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第36-37页 |
| ·原核表达制备rchIL-6的纯化 | 第37页 |
| ·rchIL-6多抗的鉴定 | 第37-38页 |
| ·白细胞介素-6在毕赤酵母中的表达 | 第38-42页 |
| ·chIL-6成熟肽基因的扩增 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pPICZα-IL6鉴定 | 第39页 |
| ·阳性转化子及高抗性转化子的筛选 | 第39页 |
| ·重组转化子的表型鉴定 | 第39页 |
| ·阳性转化子的筛选和鉴定 | 第39-40页 |
| ·GS115-pPICZα-IL-6小量诱导表达 | 第40-42页 |
| ·rchIL-6的大量诱导表达与纯化 | 第42-45页 |
| ·rchIL-6的大量制备及浓度测定 | 第42页 |
| ·酵母表达蛋白的纯化 | 第42-45页 |
| ·酵母表达产物活性检测 | 第45-47页 |
| ·rchIL-6对7TD1细胞生长的影响 | 第45页 |
| ·rchIL-6对淋巴细胞增殖的影响 | 第45-47页 |
| ·rchIL-6对禽流感灭活苗的免疫增强作用 | 第47-50页 |
| ·鸡外周血T淋巴细胞亚群分类 | 第47-48页 |
| ·各实验组鸡群抗体水平检测 | 第48-49页 |
| ·攻毒后各试验组排毒检测 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
