| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 缩略语 | 第13-14页 |
| 第一部分 | 第14-23页 |
| 引言 | 第15页 |
| 1. 杆状病毒简介 | 第15-17页 |
| ·杆状病毒的结构和分类 | 第15-16页 |
| ·杆状病毒的基因组特征 | 第16-17页 |
| 2. 多角体病毒 P10 蛋白简介 | 第17-18页 |
| 3. 多角体蛋白简介 | 第18页 |
| 4. MnSOD 蛋白简介 | 第18-19页 |
| 5. 蛋白质结晶简介 | 第19-20页 |
| 6. 实验方案设计 | 第20-23页 |
| ·实验目的和意义 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20-22页 |
| ·实验流程图 | 第22-23页 |
| 第二部分 | 第23-80页 |
| 第一章 生物信息学分析 | 第24-29页 |
| ·序列与工具 | 第24-25页 |
| ·序列 | 第24页 |
| ·生物信息学工具与软件 | 第24-25页 |
| ·生物信息学分析结果 | 第25-28页 |
| ·序列比对 | 第25页 |
| ·疏水性分析 | 第25-26页 |
| ·跨膜区分析 | 第26页 |
| ·二级结构预测 | 第26-27页 |
| ·高级结构预测 | 第27页 |
| ·氨基酸序列同源性分析 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-29页 |
| 第二章 P10 蛋白的重组表达及其抗体亲和层析柱的制备 | 第29-45页 |
| ·材料与试剂及仪器设备 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·仪器设备 | 第29-30页 |
| ·主要试剂的配制 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-38页 |
| ·克隆实验设计 | 第30-31页 |
| ·家蚕核型多角体病毒 p10 基因的克隆 | 第31-32页 |
| ·重组质粒 pET‐32a‐p10 的构建与鉴定 | 第32-34页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的分离纯化 | 第35-36页 |
| ·质谱鉴定分析 | 第36页 |
| ·多克隆抗体及其亲和层析柱的制备 | 第36-38页 |
| ·结果 | 第38-43页 |
| ·p10 基因的克隆结果 | 第38页 |
| ·pET‐32a‐p10 重组质粒的构建与鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的表达及存在状态分析 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的分离纯化结果 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白的质谱鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·测定多克隆抗体效价 | 第42页 |
| ·测定抗原偶联效率 | 第42-43页 |
| ·多克隆抗体的纯化 | 第43页 |
| ·测定抗体的偶联效率 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 原核表达 P10 蛋白的存在形式研究 | 第45-55页 |
| ·材料与试剂及仪器设备 | 第45-47页 |
| ·材料与仪器设备 | 第45页 |
| ·试剂 | 第45-47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| ·实验设计 | 第47页 |
| ·p10 基因的 PCR 扩增 | 第47页 |
| ·重组质粒 pGEX‐6P‐1‐p10 的构建与鉴定 | 第47页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第47页 |
| ·P10 蛋白的分离纯化 | 第47-49页 |
| ·P10 蛋白进行质谱分析 | 第49页 |
| ·P10 蛋白存在形式探索 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-54页 |
| ·p10 基因的扩增 | 第49-50页 |
| ·重组质粒 pGEX‐6P‐1‐p10 鉴定 | 第50页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第50-51页 |
| ·P10 蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| ·P10 蛋白的质谱鉴定 | 第52-53页 |
| ·P10 蛋白存在形式探索 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第四章 P10 蛋白的结晶条件初探 | 第55-80页 |
| 第一节 His_6‐P10 重组蛋白的结晶条件初探 | 第55-57页 |
| ·材料与试剂及仪器设备 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56-57页 |
| 第二节 P10 蛋白的结晶条件初探 | 第57-58页 |
| ·材料与试剂及仪器设备 | 第57页 |
| ·方法 | 第57页 |
| ·结果 | 第57-58页 |
| 第三节 P10 蛋白与多角体蛋白的融合表达与共结晶初探 | 第58-64页 |
| ·材料与试剂及仪器设备 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-60页 |
| ·结果 | 第60-64页 |
| 第四节 P10 蛋白与 MnSOD 蛋白融合表达和结晶初筛 | 第64-78页 |
| ·材料与试剂及仪器设备 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-68页 |
| ·结果 | 第68-78页 |
| 第五节 讨论 | 第78-80页 |
| 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
