| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 文中主要英文缩写 | 第8-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-19页 |
| ·生长素在植物发育中的作用 | 第11-13页 |
| ·植物生长素作用机制 | 第11-12页 |
| ·生长素受体家族 | 第12-13页 |
| ·黄瓜遗传转化体系的研究现状 | 第13-15页 |
| ·黄瓜离体再生体系研究进展 | 第13-14页 |
| ·黄瓜遗传转化体系研究进展 | 第14-15页 |
| ·RNA干涉机制 | 第15-17页 |
| ·RNA干涉机制的发现及其原理 | 第15-16页 |
| ·RNA干涉在植物上的应用 | 第16-17页 |
| ·本论文的内容和研究意义 | 第17-19页 |
| 2 黄瓜中生长素受体同源基因的克隆及表达载体的构建 | 第19-49页 |
| ·材料与试剂 | 第21页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-38页 |
| ·CsTIR和CsAFB的克隆 | 第21-29页 |
| ·表达载体35S:CsTIR和35S:CsAFB的构建 | 第29-31页 |
| ·I-CsTIR和I-CsAFB片段的克隆 | 第31-34页 |
| ·干涉载体CsTIR-RNAi和CsAFB-RNAi的构建 | 第34-37页 |
| ·表达载体转化农杆菌GV3101 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-47页 |
| ·CsTIR和CsAFB的克隆 | 第38-40页 |
| ·表达载体35S:CsTIR和35S:CsAFB的构建 | 第40-42页 |
| ·I-CsTIR和I-CsAFB片段的克隆 | 第42-44页 |
| ·CsTIR-RNAi和CsAFB-RNAi的构建 | 第44-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 3 烟草叶片的瞬时转化 | 第49-53页 |
| ·材料与试剂 | 第49-50页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-51页 |
| ·农杆菌侵染液注射烟草叶片 | 第50页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第50页 |
| ·烟草叶片的注射 | 第50页 |
| ·烟草叶片提取RNA | 第50页 |
| ·RNA逆转录成cDNA | 第50-51页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第51页 |
| ·实验结果 | 第51-52页 |
| ·RT-PCR检测CsTIR基因在烟草叶片中的表达 | 第51页 |
| ·RT-PCR检测CsAFB基因在烟草叶片中的表达 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 4 农杆菌介导的35S:CsTIR、35S:CsAFB、CsTIR-RNAi以及CsAFB-RNAi对黄瓜的遗传转化 | 第53-60页 |
| ·材料与试剂 | 第53页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| ·黄瓜的培养 | 第53-54页 |
| ·黄瓜RNA提取 | 第54页 |
| ·RNA反转录合成cDNA | 第54页 |
| ·半定量RT-PCR | 第54-55页 |
| ·农杆菌侵染黄瓜 | 第55-56页 |
| ·洗菌 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-59页 |
| ·黄瓜再生体系的建立 | 第56-57页 |
| ·黄瓜hyg筛选浓度的确定 | 第57-58页 |
| ·CsTIR和CsAFB基因在野生型黄瓜中的表达模式 | 第58-59页 |
| ·转基因黄瓜的RT-PCR验证 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| 5 农杆菌介导的35S:CsTIR和35S:CsAFB对拟南芥的遗传转化 | 第60-63页 |
| ·材料与试剂 | 第60页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·试剂 | 第60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-61页 |
| ·拟南芥的培养 | 第60-61页 |
| ·农杆菌侵染拟南芥 | 第61页 |
| ·实验结果 | 第61-63页 |
| ·转35S:CsTIR基因拟南芥的鉴定 | 第61-62页 |
| ·转35S:CsAFB基因拟南芥的鉴定 | 第62-63页 |
| 6 进一步工作安排 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 附录一 常用培养基配方 | 第69-70页 |
| 附录二 常用抗生素和激素的配制 | 第70页 |
