中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-23页 |
·高等植物中转录因子的研究进展 | 第11页 |
·植物 HB 转录因子基因的结构与分类 | 第11-14页 |
·植物 HB 转录因子基因的结构 | 第12页 |
·植物 HB 转录因子基因的分类 | 第12-13页 |
·植物 HB 转录因子的功能 | 第13-14页 |
·水杨酸 SA 在植物抗逆方面的研究进展 | 第14-16页 |
·水杨酸 SA 与植物的抗热性 | 第14-15页 |
·水杨酸 SA 与植物的抗冷性 | 第15页 |
·水杨酸 SA 与植物的抗旱性 | 第15页 |
·水杨酸 SA 与植物的抗盐性 | 第15-16页 |
·本实验应用的实验方法简介 | 第16-21页 |
·实时荧光定量 PCR 技术 | 第16-17页 |
·GatewayTM技术 | 第17-20页 |
·酵母双杂交 | 第20-21页 |
·立项依据 | 第21-23页 |
第2章 水稻转录因子 HB家族基因克隆及植物表达载体构建 | 第23-38页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌种和载体 | 第23页 |
·主要实验仪器 | 第23页 |
·酶与试剂 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-32页 |
·药品以及培养基的配制 | 第24-25页 |
·水稻培养 | 第25页 |
·PCR 引物设计 | 第25-26页 |
·RNA 提取 | 第26-27页 |
·合成 cDNA1st-strand | 第27页 |
·PCR 扩增体系 | 第27页 |
·目的片段回收 | 第27-28页 |
·目的基因与载体连接 | 第28-29页 |
·制备大肠杆菌感受态细胞 | 第29页 |
·重组质粒的转化(热激法) | 第29页 |
·菌液验证及测序 | 第29-30页 |
·重组质粒的提取 | 第30-31页 |
·制备农杆菌感受态细胞 | 第31页 |
·转化农杆菌感受态细胞 | 第31-32页 |
·结果及分析 | 第32-35页 |
·水稻 RNA 质量检测 | 第32-33页 |
·水稻 HB 转录因子家族基因的扩增 | 第33页 |
·BP 重组反应 | 第33-34页 |
·LR 重组反应 | 第34-35页 |
·LR 重组反应质粒转入农杆菌中 | 第35页 |
·讨论 | 第35-38页 |
第3章 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第38-47页 |
·实验材料 | 第38-39页 |
·植物材料 | 第38页 |
·主要实验仪器 | 第38页 |
·培养基 | 第38页 |
·Western Blot 试剂配制 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-42页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化体系 | 第39-41页 |
·PCR 检测 | 第41页 |
·Western-blot 鉴定 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-44页 |
·水稻转基因苗的获得 | 第42-43页 |
·转基因植株的 PCR 鉴定 | 第43-44页 |
·Western blot 结果分析 | 第44页 |
·讨论 | 第44-47页 |
第4章 水稻 HB转录因子家族基因 HB40功能的初步分析 | 第47-53页 |
·实验材料 | 第47页 |
·植物材料 | 第47页 |
·主要实验仪器 | 第47页 |
·主要试剂以及培养基 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-48页 |
·转 HB40 基因植株的田间统计分析 | 第47页 |
·HB40 启动子序列分析 | 第47页 |
·Real-time PCR 引物设计 | 第47-48页 |
·水杨酸 SA 处理水稻材料 | 第48页 |
·RNA 提取及 cDNA1st-strand 的合成 | 第48页 |
·Real-time PCR 扩增 | 第48页 |
·结果与分析 | 第48-51页 |
·HB40 转基因植株表型分析 | 第48-50页 |
·启动子序列分析 | 第50页 |
·RNA 质量检测 | 第50-51页 |
·水稻 HB40 基因在水杨酸 SA 处理下的表达模式 | 第51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
第5章 水稻 HB转录因子家族基因 HB102 功能初步分析 | 第53-67页 |
·实验材料 | 第53页 |
·菌株与载体 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-61页 |
·HB-KNOX 转录因子与 OFP 转录因子互作分析 | 第53-56页 |
·HB102 蛋白的亚细胞定位 | 第56-60页 |
·HB102 蛋白的原核表达 | 第60-61页 |
·结果与分析 | 第61-65页 |
·HB-KNOX 转录因子与 OFP 转录因子互作分析 | 第61-63页 |
·HB102 蛋白的亚细胞定位 | 第63-64页 |
·HB102 原核表达 | 第64-65页 |
·讨论与分析 | 第65-67页 |
第6章 总结及展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
作者简介 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |