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RNAi介导双生病毒和马铃薯Y病毒的分子调控技术研究

内容摘要第1-6页
Abstract第6-11页
本论文所用重要縮写词及中文对照第11-14页
第一章 文献综述第14-41页
   ·双生病毒概述第14-18页
     ·双生病毒的分类与基因组结构第14-15页
     ·双生病毒的传播介体第15页
     ·双生病毒的危害及在中国的现状第15-18页
   ·烟粉虱内共生菌GroEL蛋白第18-19页
   ·马铃薯Y病毒的概述第19-25页
     ·马铃薯Y病毒的分类、病原形态及生物学第19-21页
     ·马铃薯Y病毒的传播方式与传播介体第21-22页
     ·马铃薯Y病毒的危害及在中国的现状第22-24页
     ·马铃薯Y病毒病的防治第24-25页
   ·烟蚜传毒相关蛋白RPS2第25-26页
     ·蚜虫传毒相关蛋白理论的提出与验证第25页
     ·蚜虫传毒相关蛋白的分类第25-26页
   ·RNA沉默概述第26-39页
     ·RNA沉默的现象和定义第26-29页
     ·RNA沉默的机制第29-34页
     ·RNA沉默的应用第34-39页
   ·本研究的目的与意义第39-41页
第二章 中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)外壳蛋白(CP)片段dsRNA介导的抗病性研究第41-96页
   ·材料与方法第41-68页
     ·材料第41-43页
     ·方法第43-68页
   ·结果与分析第68-93页
     ·pBIN19载体的改造第68-70页
     ·含TYLCCNV CP片段一系列植物表达载体的构建第70-81页
     ·含TYLCCNV CP片段一系列植物表达载体的农杆菌转化第81-82页
     ·未转化植物的选择压力的确定第82-84页
     ·农杆菌介导的遗传转化第84-85页
     ·转基因植株PCR鉴定第85-88页
     ·T0代转基因植株的无性扩繁第88页
     ·T0代转基因烟草扩繁株的攻毒实验和抗病性分析第88-90页
     ·转基因的Southern blot分析第90-92页
     ·转基因烟草T1代攻毒实验和抗病性分析第92-93页
     ·转基因番茄T1代攻毒实验和抗病性分析第93页
     ·转基因烟草的Northern blot分析第93页
   ·讨论第93-95页
   ·结论第95-96页
第三章 B型烟粉虱内共生菌传毒相关蛋白GroEL基因片段dsRNA介导的抗病性研究第96-114页
   ·材料与方法第96-99页
     ·材料第96-97页
     ·方法第97-99页
   ·结果与分析第99-112页
     ·GroEL基因的克隆第99页
     ·含GroEL基因片段一系列植物表达载体的构建第99-105页
     ·含GroEL片段的一系列植物表达载体的农杆菌转化第105-106页
     ·末转化植物的选择压力的确定第106页
     ·烟草和番茄的遗传转化第106页
     ·转基因植株PCR鉴定第106-108页
     ·T0代转基因植株的无性扩繁第108页
     ·利用农杆菌介导的植株接种对T0代转基因烟草扩繁株的攻毒实验和抗病性分析第108-109页
     ·利用B型烟粉虱传毒体系对T0代转基因烟草扩繁株进行攻毒实验和抗病性分析第109-110页
     ·T0代转基因烟草扩繁株对B型烟粉虱传毒能力的干扰分析第110页
     ·转基因烟草的Southern blot分析第110-111页
     ·转基因烟草的Northern blot分析第111-112页
   ·讨论第112-113页
   ·结论第113-114页
第四章 在烟草中瞬时表达TYLCCNV CP基因dsRNA的抗病性初步分析第114-122页
   ·材料和方法第114-117页
     ·材料第114页
     ·方法第114-117页
   ·结果与分析第117-121页
     ·用于瞬时表达的系列植物表达载体的构建第117-120页
     ·用于瞬时表达的系列植物表达载体的农杆菌转化第120页
     ·含TYLCCNV CP片段的dsRNA载体干扰GFP的表达第120页
     ·TYLCCNV CP片段的dsRNA基因瞬时表达烟草抑制TYLCCNV的表达第120-121页
     ·基因瞬时表达的Northern blot分析第121页
   ·讨论第121页
   ·结论第121-122页
第五章 马铃薯Y病毒(PVY)RPS2基因dsRNA原核表达载体的构建及对烟蚜传毒的影响第122-143页
   ·材料与方法第122-132页
     ·材料第122-123页
     ·方法第123-132页
   ·结果与分析第132-143页
     ·烟蚜(Myzus persicae)RNA的提取第132页
     ·RPS2基因cDNA全序列的获得第132-133页
     ·三段RPS2基因片段的获得第133页
     ·RPS2基因片段与LITMUS-28i载体片段的连接第133-134页
     ·RPS2基因dsRNA的诱导表达及dsRNA的提取第134-141页
     ·人工饲养烟蚜的结果第141页
     ·人工饲养烟蚜注意事项第141-142页
     ·RPS2的dsRNA片段对烟蚜传毒的影响第142-143页
第六章 全文主要结论第143-144页
致谢第144-145页
参考文献第145-159页
附录A 常用缓冲液及培养基配方第159-166页
附录B 常用的抗生素及使用浓度第166-167页
附录C 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器第167-169页
个人简历第169-170页
博士后期间发表的学术论文,专著第170-173页
永久通信地址第173页

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