| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| ·短链脂肪酸的概述 | 第13-15页 |
| ·短链脂肪酸的生成 | 第13-14页 |
| ·短链脂肪酸的吸收和作用 | 第14-15页 |
| ·G 蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors, GPCRs)概述 | 第15-20页 |
| ·GPCRs 分类和基本结构 | 第15-17页 |
| ·GPCRs 的寡聚化及其功能 | 第17-20页 |
| ·短链脂肪酸受体GPR41 和GPR43 的研究进展 | 第20-23页 |
| ·GPR41 和GPR43 的简介 | 第20页 |
| ·GPR41 和GPR43 的克隆和结构特点 | 第20-21页 |
| ·短链脂肪酸受体GPR41 和GPR43 的组织表达 | 第21页 |
| ·GPR41 和GPR43 的信号转导模式 | 第21-22页 |
| ·短链脂肪酸受体GPR41 和GPR43 的功能 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 奶山羊GPR41 基因的CDS 区克隆、序列分析及组织表达分析 | 第25-36页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·试验材料 | 第25页 |
| ·仪器设备 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-30页 |
| ·奶山羊乳腺组织总RNA 的提取 | 第26页 |
| ·第一链cDNA 合成 | 第26-27页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·奶山羊GPR41 基因CDS 的PCR 扩增 | 第27页 |
| ·奶山羊GPR41 基因PCR 产物片段的回收 | 第27-28页 |
| ·目的基因的连接、转化和鉴定 | 第28-29页 |
| ·序列生物信息学分析 | 第29页 |
| ·山羊GPR41 基因组织表达分析 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-33页 |
| ·奶山羊乳腺总RNA 的提取 | 第30页 |
| ·奶山羊GPR41 基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·奶山羊GPR41 基因同源性分析 | 第31页 |
| ·奶山羊GPR41 蛋白的结构预测分析 | 第31-32页 |
| ·奶山羊GPR41 基因组织表达分析 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| ·关于GPR41 的克隆与序列分析 | 第33-34页 |
| ·关于GPR41 蛋白的结构分析 | 第34页 |
| ·关于GPR41 组织表达分析 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第三章 短链脂肪酸盐对奶山羊乳腺上皮细胞GPR41 及脂代谢相关基因的影响 | 第36-43页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·仪器设备 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·实验所需溶液的配制 | 第36-37页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞的培养 | 第37页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞的处理 | 第37页 |
| ·油红O 染色 | 第37页 |
| ·细胞总RNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第38页 |
| ·实时定量引物设计 | 第38-39页 |
| ·脂代谢相关基因的实时定量分析 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-41页 |
| ·油红O 染色结果分析 | 第39-40页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞RNA 提取 | 第40页 |
| ·RT-qPCR 分析脂肪代谢相关基因 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章 奶山羊GPR41 基因RNA 干扰序列的筛选及其重组腺病毒载体的构建 | 第43-54页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·试验材料 | 第43页 |
| ·仪器设备 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-49页 |
| ·奶山羊GPR41 基因的shRNA 干扰序列的设计与合成 | 第44页 |
| ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 穿梭载体的构建 | 第44-45页 |
| ·pDsRed1-GPR41 表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·筛选shRNA 有效序列 | 第46-47页 |
| ·pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA 重组腺病毒载体的构建及鉴定 | 第47-48页 |
| ·腺病毒的包装与扩增 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-53页 |
| ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 载体的构建 | 第49页 |
| ·pDsRed1-C1-GPR41 载体的构建 | 第49-50页 |
| ·有效的干扰 shRNA 序列的筛选 | 第50页 |
| ·pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA 重组载体的构建及鉴定 | 第50-52页 |
| ·腺病毒的包装、扩增 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
