| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| ·锌指蛋白结构 | 第13-15页 |
| ·人工锌指蛋白转录因子 | 第15-16页 |
| ·人工设计的转录抑制子 | 第15-16页 |
| ·人工转录激活子 | 第16页 |
| ·人工锌指核酸酶 | 第16-23页 |
| ·ZFN 介导的基因敲除在基础研究中的作用 | 第20-21页 |
| ·ZFN 介导的基因沉默 | 第21-22页 |
| ·ZFN 介导的基因同源重组修复 | 第22页 |
| ·脱靶与安全问题 | 第22-23页 |
| ·人工锌指蛋白筛选技术 | 第23-26页 |
| ·人DYRK1A 基因的研究进展 | 第26-29页 |
| ·DYRKs 激酶研究进展 | 第26-27页 |
| ·DYRKs 激酶对RAS 诱导的细胞转化以及E1A 肿瘤抑制作用的影响 | 第27-29页 |
| 第二章 人工锌指蛋白随机库的构建与锌指蛋白的筛选 | 第29-43页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·实验所需菌种或质粒 | 第29-30页 |
| ·实验所需工具酶及试剂 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-39页 |
| ·基因靶位点的选择 | 第30-31页 |
| ·三锌指蛋白库的构建 | 第31-34页 |
| ·报告载体和报告菌株的构建 | 第34-35页 |
| ·有效锌指库的筛选 | 第35-36页 |
| ·有效锌指库的连接组装 | 第36-38页 |
| ·高效特异结合单侧靶序列的锌指蛋白的筛选 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-42页 |
| ·人DYRK1A 基因中靶序列的选择 | 第39页 |
| ·三锌指蛋白库的构建 | 第39页 |
| ·有效锌指库筛选 | 第39-40页 |
| ·有效锌指库的连接组装 | 第40页 |
| ·识别人DYRK1A 基因单侧靶序列的锌指蛋白酶活分析 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第三章 锌指核酸酶活性的酵母细胞验证 | 第43-48页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·实验所需菌种或质粒 | 第43页 |
| ·实验所需工具酶及试剂 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-45页 |
| ·含有人DYRK1A 基因靶位点的酵母报告载体和报告菌株的构建 | 第44-45页 |
| ·ZFN 酵母表达载体的构建 | 第45页 |
| ·ZFN 在酵母细胞中的活性检测 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第四章 结论 | 第48-50页 |
| ·研究结论 | 第48-49页 |
| ·本研究的创新点 | 第49页 |
| ·还需深入的研究 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 附录 | 第59-65页 |
| 缩略词 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
