| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1.脂肪酸 | 第14-17页 |
| ·脂肪酸的分类与功能 | 第14-15页 |
| ·γ-亚麻酸 | 第15-17页 |
| ·γ-亚麻酸的药理作用 | 第16-17页 |
| 2.脂肪酸脱饱和酶 | 第17-28页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶的分类 | 第17-18页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶的研究进展 | 第18-20页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶基因的研究进展 | 第20-21页 |
| ·Δ6-脂肪酸脱饱和酶基因的研究进展 | 第21-23页 |
| ·微生物油脂工程研究进展 | 第23-24页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶应用概况 | 第24-28页 |
| 第2章 引言 | 第28-30页 |
| 第3章 材料与方法 | 第30-46页 |
| 1.材料 | 第30-32页 |
| ·微生物材料 | 第30页 |
| ·质粒、菌株及培养条件 | 第30页 |
| ·工具酶和主要分子生物学试剂 | 第30页 |
| ·溶液的配制 | 第30-32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| 2.方法 | 第32-46页 |
| ·微小毛霉脂肪酸成分测定 | 第32页 |
| ·微小毛霉基因组DNA的提取(CTAB法) | 第32-33页 |
| ·微小毛霉RNA的提取(CTAB法) | 第33-34页 |
| ·RNA中混有的DNA的降解 | 第34页 |
| ·cDNA的合成 | 第34-36页 |
| ·基因组DNA的PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·目的片段的克隆 | 第37-39页 |
| ·转化子的筛选鉴定 | 第39页 |
| ·酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·DNA测序 | 第40页 |
| ·核苷酸和氨基酸序列分析 | 第40-41页 |
| ·Δ6-脂肪酸脱饱和酶基因在酿酒酵母中的表达 | 第41-46页 |
| 第4章 结果与分析 | 第46-64页 |
| 1.微小毛霉脂肪酸成分测定 | 第46页 |
| 2.微小毛霉核酸的提取 | 第46-48页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第46-47页 |
| ·RNA样品的质量检测 | 第47-48页 |
| ·cDNA的质量检测 | 第48页 |
| 3. Δ6-脱饱和酶基因的克隆与序列分析 | 第48-61页 |
| ·Δ6-脱饱和酶基因的克隆 | 第48-50页 |
| ·MpD6D脱饱和酶基因的核苷酸序列分析 | 第50-52页 |
| ·微小毛霉Δ6-脱饱和酶的氨基酸序列分析 | 第52-57页 |
| ·微小毛霉Δ6-脱饱和酶的跨膜结构分析 | 第57-59页 |
| ·微小毛霉Δ6-脱饱和酶蛋白高级结构预测 | 第59-60页 |
| ·Δ6-脱饱和酶蛋白的系统发生树分析 | 第60-61页 |
| 4.外源基因MpD6D在酵母中的表达 | 第61-64页 |
| ·外源基因和载体的酶切和连接 | 第61-63页 |
| ·Δ6-脱饱和酶基因在酵母中表达后的GC分析 | 第63-64页 |
| 第5章 讨论 | 第64-68页 |
| 1.微小毛霉的生产价值 | 第64页 |
| 2.不同来源Δ6-脱饱和酶基因的核苷酸序列差异分析 | 第64-65页 |
| 3.Δ6-脱饱和酶的氨基酸结构与功能的关系分析 | 第65-66页 |
| 4.外源基因在酵母中的表达 | 第66页 |
| 5.脂肪酸脱饱和酶与生物体适应低温环境的关系 | 第66-68页 |
| 第6章 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 缩略词表 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 硕士期间发表论文及参与课题情况 | 第78-79页 |
| 附录 | 第79页 |