中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-39页 |
1 血红蛋白(Hemoglobin,Hb)的结构与功能 | 第13页 |
2 血红蛋白类氧载体的历史背景及研究现状 | 第13-19页 |
·修饰的血红蛋白 | 第15-17页 |
·聚合血红蛋白 | 第15-16页 |
·表面修饰血红蛋白 | 第16-17页 |
·分子内交联血红蛋白 | 第17页 |
·基因重组人血红蛋白 | 第17页 |
·微囊化血红蛋白 | 第17-19页 |
3 人、牛、猪血红蛋白的比较 | 第19-23页 |
·人、牛、猪血红蛋白序列结构的比较 | 第19-20页 |
·人、牛、猪血红蛋白氧亲和力的比较 | 第20-22页 |
·Cl~-对血红蛋白氧亲和力的影响 | 第21页 |
·2,3-DPG对血红蛋白氧亲和力的影响 | 第21-22页 |
·人、牛、猪红细胞膜磷脂种类的对比 | 第22页 |
·人、牛、猪红细胞内蛋白质种类的对比 | 第22-23页 |
4 定性/定量测定血红蛋白的研究进展与现状 | 第23-25页 |
·非特定血红蛋白测定方法 | 第23-24页 |
·特定血红蛋白测定方法 | 第24-25页 |
·分子排阻层析法(SEC) | 第24-25页 |
·非变性蛋白电泳/改良蛋白印记法 | 第25页 |
·特异性抗原抗体结合反应为基础的蛋白芯片技术 | 第25页 |
5 抗原抗体反应 | 第25-28页 |
·抗原抗体反应的原理 | 第26-27页 |
·亲水胶体转化为疏水胶体 | 第26页 |
·抗原抗体结合力 | 第26-27页 |
·抗原抗体反应的特点 | 第27-28页 |
·特异性 | 第27页 |
·按比性 | 第27页 |
·可逆性 | 第27页 |
·分阶段反应 | 第27页 |
·敏感性 | 第27-28页 |
·影响抗原抗体反应的因素 | 第28页 |
6. 蛋白质芯片技术及其研究现状 | 第28-39页 |
·蛋白质芯片的概念、原理及特点 | 第29页 |
·蛋白质芯片的分类与制备 | 第29-33页 |
·蛋白质芯片的分类 | 第29-30页 |
·蛋白质微阵列的构建 | 第30-33页 |
·载体的选择和处理 | 第30页 |
·蛋白质微阵列的制作 | 第30页 |
·配基在载体表面的固定 | 第30-31页 |
·封闭 | 第31页 |
·抗原或抗体的标记 | 第31-32页 |
·蛋白质微阵列的检测 | 第32-33页 |
·蛋白质芯片的应用 | 第33-37页 |
·蛋白质芯片在医学研究与临床诊断中的应用 | 第33-34页 |
·蛋白质芯片用于生物分子间的相互作用的研究 | 第34-35页 |
·蛋白质芯片用于用于特异性抗原抗体的检测 | 第35页 |
·蛋白质芯片在药物筛选、测试及其作用机理研究中的应用 | 第35-36页 |
·蛋白质芯片在抗体及基因表达物筛选中的应用 | 第36页 |
·蛋白质芯片在蛋白质功能研究中的应用 | 第36页 |
·免疫检测及酶活性测定 | 第36-37页 |
·蛋白质芯片在食品卫生监督及分析中的应用 | 第37页 |
·蛋白质芯片在卫生检验中的应用 | 第37页 |
·蛋白质芯片的不足及发展前景 | 第37-39页 |
第二章 研究报告 | 第39-80页 |
引言 | 第39-40页 |
1 材料 | 第40-43页 |
·实验动物 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40-41页 |
·仪器 | 第41页 |
·常用缓冲液配置 | 第41-43页 |
·ELISA缓冲液系统 | 第41-42页 |
·SDS-PAGE中的试剂 | 第42页 |
·银染常用试剂 | 第42-43页 |
·Westrn-blot常用试剂 | 第43页 |
·考马斯亮蓝方法测定蛋白浓度中用到的试剂 | 第43页 |
·蛋白质芯片中常用试剂 | 第43页 |
·抗体纯化洗脱液 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-50页 |
·超高纯度人、牛、猪血红蛋白及其戊二醛聚合体制备 | 第43页 |
·SEC测定血红蛋白的纯度及聚合血红蛋白的分子量分布 | 第43-44页 |
·SDS-PAGE | 第44-45页 |
·Westrn blot | 第45-46页 |
·动物免疫/加强免疫和抗血清的制备 | 第46页 |
·抗体效价的测定(间接ELISA方法) | 第46-47页 |
·抗体的纯化 | 第47-48页 |
·介质的处理 | 第47页 |
·抗体纯化 | 第47-48页 |
·样品的分装保存 | 第48页 |
·抗体浓度的测定(Bradford方法) | 第48页 |
·蛋白芯片测定方法 | 第48-50页 |
·荧光标记抗体的制备 | 第48页 |
·芯片载体表面化学处理 | 第48-49页 |
·蛋白的固相偶联 | 第49页 |
·抗原抗体结合反应 | 第49-50页 |
·结果测定及分析 | 第50页 |
3 结果与分析 | 第50-80页 |
·血红蛋白的纯度分析及戊二醛聚合血红蛋白的分子量分布 | 第50-51页 |
·抗血红蛋白多克隆抗体的制备及效价测定 | 第51-52页 |
·抗体纯度测定 | 第51-52页 |
·抗体效价测定 | 第52页 |
·抗原芯片法检测戊二醛聚合猪血红蛋白的基本方法学研究 | 第52-57页 |
·不同点样缓冲液的影响 | 第52-53页 |
·固定条件的影响 | 第53-55页 |
·封闭缓冲液的影响 | 第55-56页 |
·抗原抗体反应时间的影响 | 第56-57页 |
·抗原芯片法研究不同来源血红蛋白的主要抗原决定簇 | 第57-69页 |
·人、牛、猪血红蛋白a和β亚基氨基酸序列比较分析 | 第57-58页 |
·血红蛋白抗原抗体交叉反应研究人、牛、猪血红蛋白抗原异同性 | 第58-65页 |
·Mg~(2+)离子对戊二醛聚合血红蛋白抗原抗体结合反应的影响 | 第65-69页 |
·抗体芯片法检测戊二醛聚合猪血红蛋白的基本方法学研究 | 第69-70页 |
·抗原芯片和抗体芯片定量测定戊二醛聚合猪血红蛋白特性的比较 | 第70-80页 |
·抗原芯片法和抗体芯片法基本特性的比较 | 第70-72页 |
·抗原芯片和抗体芯片在体液中检测pPolyHb制品的比较 | 第72-80页 |
第三章 结论 | 第80-84页 |
1 抗原芯片在研究人、牛和猪血红蛋白主要抗原决定簇中的应用 | 第80-82页 |
2 抗原芯片法和抗体芯片法定量测定戊二醛聚合猪血红蛋白特性的比较 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
致谢 | 第94页 |