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芯片技术在研究血红蛋白特异性抗原及特异性定量测定血红蛋白中的应用

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
缩略语表第12-13页
第一章 文献综述第13-39页
 1 血红蛋白(Hemoglobin,Hb)的结构与功能第13页
 2 血红蛋白类氧载体的历史背景及研究现状第13-19页
   ·修饰的血红蛋白第15-17页
     ·聚合血红蛋白第15-16页
     ·表面修饰血红蛋白第16-17页
     ·分子内交联血红蛋白第17页
     ·基因重组人血红蛋白第17页
   ·微囊化血红蛋白第17-19页
 3 人、牛、猪血红蛋白的比较第19-23页
   ·人、牛、猪血红蛋白序列结构的比较第19-20页
   ·人、牛、猪血红蛋白氧亲和力的比较第20-22页
     ·Cl~-对血红蛋白氧亲和力的影响第21页
     ·2,3-DPG对血红蛋白氧亲和力的影响第21-22页
   ·人、牛、猪红细胞膜磷脂种类的对比第22页
   ·人、牛、猪红细胞内蛋白质种类的对比第22-23页
 4 定性/定量测定血红蛋白的研究进展与现状第23-25页
   ·非特定血红蛋白测定方法第23-24页
   ·特定血红蛋白测定方法第24-25页
     ·分子排阻层析法(SEC)第24-25页
     ·非变性蛋白电泳/改良蛋白印记法第25页
     ·特异性抗原抗体结合反应为基础的蛋白芯片技术第25页
 5 抗原抗体反应第25-28页
   ·抗原抗体反应的原理第26-27页
     ·亲水胶体转化为疏水胶体第26页
     ·抗原抗体结合力第26-27页
   ·抗原抗体反应的特点第27-28页
     ·特异性第27页
     ·按比性第27页
     ·可逆性第27页
     ·分阶段反应第27页
     ·敏感性第27-28页
   ·影响抗原抗体反应的因素第28页
 6. 蛋白质芯片技术及其研究现状第28-39页
   ·蛋白质芯片的概念、原理及特点第29页
   ·蛋白质芯片的分类与制备第29-33页
     ·蛋白质芯片的分类第29-30页
     ·蛋白质微阵列的构建第30-33页
       ·载体的选择和处理第30页
       ·蛋白质微阵列的制作第30页
       ·配基在载体表面的固定第30-31页
       ·封闭第31页
       ·抗原或抗体的标记第31-32页
       ·蛋白质微阵列的检测第32-33页
   ·蛋白质芯片的应用第33-37页
     ·蛋白质芯片在医学研究与临床诊断中的应用第33-34页
     ·蛋白质芯片用于生物分子间的相互作用的研究第34-35页
     ·蛋白质芯片用于用于特异性抗原抗体的检测第35页
     ·蛋白质芯片在药物筛选、测试及其作用机理研究中的应用第35-36页
     ·蛋白质芯片在抗体及基因表达物筛选中的应用第36页
     ·蛋白质芯片在蛋白质功能研究中的应用第36页
     ·免疫检测及酶活性测定第36-37页
     ·蛋白质芯片在食品卫生监督及分析中的应用第37页
     ·蛋白质芯片在卫生检验中的应用第37页
   ·蛋白质芯片的不足及发展前景第37-39页
第二章 研究报告第39-80页
 引言第39-40页
 1 材料第40-43页
   ·实验动物第40页
   ·主要试剂第40-41页
   ·仪器第41页
   ·常用缓冲液配置第41-43页
     ·ELISA缓冲液系统第41-42页
     ·SDS-PAGE中的试剂第42页
     ·银染常用试剂第42-43页
     ·Westrn-blot常用试剂第43页
     ·考马斯亮蓝方法测定蛋白浓度中用到的试剂第43页
     ·蛋白质芯片中常用试剂第43页
     ·抗体纯化洗脱液第43页
 2 实验方法第43-50页
   ·超高纯度人、牛、猪血红蛋白及其戊二醛聚合体制备第43页
   ·SEC测定血红蛋白的纯度及聚合血红蛋白的分子量分布第43-44页
   ·SDS-PAGE第44-45页
   ·Westrn blot第45-46页
   ·动物免疫/加强免疫和抗血清的制备第46页
   ·抗体效价的测定(间接ELISA方法)第46-47页
   ·抗体的纯化第47-48页
     ·介质的处理第47页
     ·抗体纯化第47-48页
     ·样品的分装保存第48页
   ·抗体浓度的测定(Bradford方法)第48页
   ·蛋白芯片测定方法第48-50页
     ·荧光标记抗体的制备第48页
     ·芯片载体表面化学处理第48-49页
     ·蛋白的固相偶联第49页
     ·抗原抗体结合反应第49-50页
     ·结果测定及分析第50页
 3 结果与分析第50-80页
   ·血红蛋白的纯度分析及戊二醛聚合血红蛋白的分子量分布第50-51页
   ·抗血红蛋白多克隆抗体的制备及效价测定第51-52页
     ·抗体纯度测定第51-52页
     ·抗体效价测定第52页
   ·抗原芯片法检测戊二醛聚合猪血红蛋白的基本方法学研究第52-57页
     ·不同点样缓冲液的影响第52-53页
     ·固定条件的影响第53-55页
     ·封闭缓冲液的影响第55-56页
     ·抗原抗体反应时间的影响第56-57页
   ·抗原芯片法研究不同来源血红蛋白的主要抗原决定簇第57-69页
     ·人、牛、猪血红蛋白a和β亚基氨基酸序列比较分析第57-58页
     ·血红蛋白抗原抗体交叉反应研究人、牛、猪血红蛋白抗原异同性第58-65页
     ·Mg~(2+)离子对戊二醛聚合血红蛋白抗原抗体结合反应的影响第65-69页
   ·抗体芯片法检测戊二醛聚合猪血红蛋白的基本方法学研究第69-70页
   ·抗原芯片和抗体芯片定量测定戊二醛聚合猪血红蛋白特性的比较第70-80页
     ·抗原芯片法和抗体芯片法基本特性的比较第70-72页
     ·抗原芯片和抗体芯片在体液中检测pPolyHb制品的比较第72-80页
第三章 结论第80-84页
 1 抗原芯片在研究人、牛和猪血红蛋白主要抗原决定簇中的应用第80-82页
 2 抗原芯片法和抗体芯片法定量测定戊二醛聚合猪血红蛋白特性的比较第82-84页
参考文献第84-94页
致谢第94页

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