摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
1 引言 | 第10-17页 |
·MSC 的来源发展 | 第11-12页 |
·hUC-MSC 的分离及培养 | 第12页 |
·hUC-MSC 的生物学特性 | 第12-13页 |
·hUC-MSC 的诱导分化能力 | 第13-14页 |
·hUC-MSC 的临床应用基础研究 | 第14-16页 |
·立题依据及研究内容 | 第16-17页 |
2 实验材料和方法 | 第17-25页 |
·实验材料 | 第17-19页 |
·实验标本 | 第17页 |
·主要试剂及配制 | 第17-19页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·主要试剂配制 | 第18-19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-25页 |
·手工机械分离联合酶消化法分离脐带间充质细胞并培养 | 第19-20页 |
·脐带间充质细胞扩增培养方法 | 第20页 |
·脐带间充质细胞冻存及复苏 | 第20-21页 |
·脐带间充质细胞冻存 | 第20页 |
·脐带间充质细胞复苏 | 第20-21页 |
·脐带间充质细胞生物学特性鉴定 | 第21-25页 |
·脐带间充质细胞形态学观察 | 第21页 |
·脐带间充质细胞生长曲线实验 | 第21-22页 |
·流式细胞术检测脐带间充质细胞的表面标志 | 第22页 |
·流式细胞术检测脐带间充质细胞周期 | 第22页 |
·RT-PCR 检测脐带间充质细胞P53、C-myc 和OCT-4 基因的表达 | 第22-25页 |
·细胞总 RNA 提取 | 第22-23页 |
·测提取 RNA 的浓度 | 第23页 |
·提取的 RNA 逆转录成cDNA | 第23页 |
·设计各基因引物 | 第23-24页 |
·PCR 扩增检测各因子基因 | 第24-25页 |
·按表3 向 PCR 管中加入反应试剂 | 第24页 |
·设置 PCR 循环反应条件并扩增 | 第24页 |
·凝胶成像鉴定 PCR 产物 | 第24-25页 |
3 实验结果 | 第25-33页 |
·脐带间充质细胞镜下形态学观察 | 第25-26页 |
·脐带间充质细胞的生长曲线绘制 | 第26-27页 |
·流式细胞术检测分析脐带间充质细胞周期 | 第27-29页 |
·流式细胞术检测脐带间充质细胞表面标志 | 第29-31页 |
·脐带间充质细胞的 RT-PCR 结果 | 第31-33页 |
·脐带间充质细胞 RNA 的浓度 | 第31页 |
·RNA 反转录成cDNA 的检测 | 第31-32页 |
·扩增脐带间充质细胞各代的 P53、C-myc 和 OCT-4 基因 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-35页 |
·原代hUC-MSC 的分离 | 第33-34页 |
·hUC-MSC 的基本特性鉴定 | 第34页 |
·hUC-MSC 的癌基因及抑癌基因扩增检测 | 第34-35页 |
5 实验结论及意义 | 第35-36页 |
6 本论文创新之处 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
作者简介 | 第42页 |