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人脐带胶质间充质干细胞的分离培养与特性研究

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
1 引言第10-17页
   ·MSC 的来源发展第11-12页
   ·hUC-MSC 的分离及培养第12页
   ·hUC-MSC 的生物学特性第12-13页
   ·hUC-MSC 的诱导分化能力第13-14页
   ·hUC-MSC 的临床应用基础研究第14-16页
   ·立题依据及研究内容第16-17页
2 实验材料和方法第17-25页
   ·实验材料第17-19页
     ·实验标本第17页
     ·主要试剂及配制第17-19页
       ·主要试剂第17-18页
       ·主要试剂配制第18-19页
     ·主要仪器第19页
   ·实验方法第19-25页
     ·手工机械分离联合酶消化法分离脐带间充质细胞并培养第19-20页
     ·脐带间充质细胞扩增培养方法第20页
     ·脐带间充质细胞冻存及复苏第20-21页
       ·脐带间充质细胞冻存第20页
       ·脐带间充质细胞复苏第20-21页
     ·脐带间充质细胞生物学特性鉴定第21-25页
       ·脐带间充质细胞形态学观察第21页
       ·脐带间充质细胞生长曲线实验第21-22页
       ·流式细胞术检测脐带间充质细胞的表面标志第22页
       ·流式细胞术检测脐带间充质细胞周期第22页
       ·RT-PCR 检测脐带间充质细胞P53、C-myc 和OCT-4 基因的表达第22-25页
         ·细胞总 RNA 提取第22-23页
         ·测提取 RNA 的浓度第23页
         ·提取的 RNA 逆转录成cDNA第23页
         ·设计各基因引物第23-24页
         ·PCR 扩增检测各因子基因第24-25页
           ·按表3 向 PCR 管中加入反应试剂第24页
           ·设置 PCR 循环反应条件并扩增第24页
           ·凝胶成像鉴定 PCR 产物第24-25页
3 实验结果第25-33页
   ·脐带间充质细胞镜下形态学观察第25-26页
   ·脐带间充质细胞的生长曲线绘制第26-27页
   ·流式细胞术检测分析脐带间充质细胞周期第27-29页
   ·流式细胞术检测脐带间充质细胞表面标志第29-31页
   ·脐带间充质细胞的 RT-PCR 结果第31-33页
     ·脐带间充质细胞 RNA 的浓度第31页
     ·RNA 反转录成cDNA 的检测第31-32页
     ·扩增脐带间充质细胞各代的 P53、C-myc 和 OCT-4 基因第32-33页
4 讨论第33-35页
   ·原代hUC-MSC 的分离第33-34页
   ·hUC-MSC 的基本特性鉴定第34页
   ·hUC-MSC 的癌基因及抑癌基因扩增检测第34-35页
5 实验结论及意义第35-36页
6 本论文创新之处第36-37页
致谢第37-38页
参考文献第38-42页
作者简介第42页

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