| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-15页 |
| ·Toll 家族背景介绍 | 第9-12页 |
| ·TLR 信号转导 | 第9-10页 |
| ·TLR 信号与疾病的关系 | 第10页 |
| ·TLR3、TLR4 简介及关联 | 第10-11页 |
| ·TLR3、4 配体介绍 | 第11-12页 |
| ·Rab 家族背景介绍 | 第12-13页 |
| ·Rab5、7、9 的简介 | 第13页 |
| ·研究意义 | 第13-15页 |
| ·Poly I:C/TLR3 信号通路过渡活化 | 第13-14页 |
| ·LPS/TLR4 信号通路过渡活化 | 第14-15页 |
| ·研究目的 | 第15页 |
| 2 Rab7 诱导表达模式的研究 | 第15-23页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·实验材料及试剂 | 第16页 |
| ·仪器 | 第16页 |
| ·试剂配置 | 第16页 |
| ·引物 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-19页 |
| ·小鼠巨噬细胞株 RAW264.7 的培养 | 第17页 |
| ·细胞总 RNA 的提取及反转录 | 第17页 |
| ·cDNA 的制备 | 第17-18页 |
| ·PCR 反应体系 | 第18-19页 |
| ·LPS 和poly I:C 刺激后 Rab5a、Rab7、Rab9 的mRNA 水平表达时效关系研究 | 第19页 |
| ·结果分析 | 第19-22页 |
| ·RAW 264.7 细胞的培养及刺激 | 第19-20页 |
| ·LPS 刺激 RAW264.7 细胞后 Rab5a、Rab7、Rab9 的mRNA 水平表达时-效关系研究 | 第20页 |
| ·Poly I:C 刺激 RAW264.7 细胞后 Rab5a、Rab7、Rab9 的mRNA 水平表达时-效关系研究 | 第20-21页 |
| ·RTQ-PCR 检测 Rab7 的mRNA 水平表达时效关系研究 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22-23页 |
| 3 Rab7 调节巨噬细胞 Toll 样受体信号转导通路的研究 | 第23-40页 |
| ·材料与方法 | 第23-28页 |
| ·细胞株和主要试剂 | 第23页 |
| ·试剂配置 | 第23-24页 |
| ·配制聚丙烯酰电泳的试剂 | 第23-24页 |
| ·转膜的试剂 | 第24页 |
| ·引物 | 第24-25页 |
| ·实验步骤 | 第25-28页 |
| ·RAW264.7 巨噬细胞的培养 | 第25页 |
| ·细胞计数 | 第25页 |
| ·突变载体的构建 | 第25页 |
| ·细胞转染 | 第25页 |
| ·蛋白提取 | 第25-26页 |
| ·BCA 检测检测蛋白浓度 | 第26页 |
| ·SDS-PAGE | 第26页 |
| ·Western blotting | 第26-28页 |
| ·NO、iNOS 含量测定 | 第28页 |
| ·MTT 法测基因转染对 RAW264.7 细胞的影响 | 第28页 |
| ·结果分析 | 第28-38页 |
| ·Rab7 突变体稳定表达的细胞株的鉴定 | 第28-29页 |
| ·稳定转染细胞 RAW264.7 生长形态 | 第29-30页 |
| ·Rab7 抑制 Poly I:C 诱导的巨噬细胞中 TNF-α、IL-1β的表达 | 第30-32页 |
| ·Rab7 抑制 Poly I:C 诱导的巨噬细胞中 IP-10、IFN-β的表达 | 第32-34页 |
| ·Poly I:C 诱导的巨噬细胞中 NO/iNOs 的表达 | 第34-35页 |
| ·Rab7 抑制 LPS 诱导的巨噬细胞中 IP-10、IFN-β的表达 | 第35-37页 |
| ·Rab7 在 LPS 介导的 TLR4 通路中的作用 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 4 结论 | 第40页 |
| 5 展望 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 作者简介 | 第47页 |
