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猪PPARΓ2基因肌肉超表达真核表达载体构建以及在转基因小鼠中的功能验证

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
縮略词表第13-15页
第一章 文献综述第15-34页
   ·转基因动物研究方法与应用第15-19页
     ·转基因动物制备方法第15-17页
     ·转基因动物的应用第17-19页
     ·展望第19页
   ·肌内脂肪候选基因研究第19-27页
     ·脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase,FAS)第20-21页
     ·激素敏感脂酶(Hormone-sensitive lipase,HSL)第21页
     ·脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)第21-22页
     ·二酯酰甘油酰基转移(diaeylglyeerolaeyltransferas,DGAT)第22-24页
     ·脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding proteins,FABP)第24-26页
     ·CD36第26-27页
   ·PPARγ第27-34页
     ·PPARγ概述第27-34页
第二章 pEGFP-N1L-MCK-sPPARγ2真核表达载体的构建第34-53页
   ·研究目的第34页
   ·材料与方法第34-36页
     ·主要仪器设备第34页
     ·主要试剂与试剂盒第34-35页
     ·主要溶液配方第35-36页
     ·使用主要载体第36页
   ·实验方法第36-45页
     ·pEGFP-N1L-Tyb12载体的构建第36-41页
     ·pEGFP-N1L-sMCK载体的构建第41-43页
     ·最终载体pEGFP-N1L-MCK-PPARγ2的构建第43-45页
   ·实验结果第45-51页
     ·pEGFP-N1L-Tyb12载体的构建第45-47页
     ·载体pEGFP-N1L-sMCK的构建第47-48页
     ·最终载体pEGFP-N1L-MCK-PPARγ2的构建第48-51页
   ·讨论第51-53页
第三章 转基因细胞系建立与检测第53-67页
   ·实验目的第53页
   ·实验材料第53-54页
     ·实验动物第53页
     ·仪器设备第53页
     ·主要试剂和试剂盒第53-54页
     ·主要试剂的配制第54页
   ·实验方法第54-60页
     ·猪35日龄胚胎成纤维细胞培养建系第54-55页
     ·质粒大量提取第55-56页
     ·细胞转染实验第56-60页
   ·结果与分析第60-64页
     ·成纤维细胞原代培养第60页
     ·瞬时转染猪胚胎成纤维细胞检测和转染C2C12细胞检测第60-62页
     ·稳定转染C2C12细胞检测第62-64页
   ·讨论第64-67页
     ·关于成纤维细胞原代培养第64页
     ·关于载体的转染实验第64-67页
第四章 转基因小鼠制备与表达检测第67-93页
   ·实验目的第67页
   ·实验材料第67-70页
     ·实验动物第67页
     ·主要仪器第67页
     ·主要试剂与试剂盒第67-68页
     ·主要试剂配方第68-69页
     ·主要生物学网站以及分析软件第69页
     ·主要引物设计第69-70页
   ·试验方法第70-78页
     ·转基因小鼠获取和鉴定第70页
     ·转基因小鼠PPARγ2的组织表达检测第70-73页
     ·Western Blot第73-74页
     ·检测PPARγ2上调对组织相关基因表达的影响分析第74-75页
     ·转基因小鼠部分生化指标测定第75-78页
   ·实验结果第78-84页
     ·转基因小鼠F1代检测第78页
     ·转基因小鼠F1代PPARγ2组织表达检测第78-79页
     ·PPARγ2上调对组织相关基因表达以及生化指标的影响分析第79-82页
     ·转基因小鼠部分生理生化指标测定第82-84页
   ·讨论第84-93页
     ·转基因小鼠检测第84-86页
     ·超表达PPARγ2对骨骼肌的影响第86-89页
     ·超表达PPARγ2对皮下脂肪的影响第89-91页
     ·超表达PPARγ2对肝脏的影响第91-93页
第五章 结论第93-95页
   ·主要研究成果第93页
   ·主要创新点第93-94页
   ·研究的不足之处第94-95页
参考文献第95-113页
附录1 载体pEGFP-N1L-MCK-PPARγ2序列第113-117页
附录2 引物第117-119页
在读期间发表文章情况第119-120页
致谢第120-121页

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