| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| CHAPTER ONE INTRODUCTION | 第11-18页 |
| 1 THE JNK SIGNALING PATHWAY | 第11-13页 |
| 2 MYC-INTERACTING ZINC-FINGER PROTEIN 1 (MIZ1) | 第13-14页 |
| 3 MULE: AN E3 UBIQUITIN LIGASE | 第14-18页 |
| CHAPTER TWO MATERIALS AND METHODS | 第18-29页 |
| 1 REAGENTS AND ANTIBODY | 第18页 |
| 2 PLASMIDS AND SIRNA | 第18页 |
| 3 BACTERIA AND TRANSFORMATION | 第18页 |
| 4 CELL CULTURE | 第18-19页 |
| 5 PLASMIDS PREPARATION | 第19-21页 |
| ·Mini-prep procedure | 第19页 |
| ·Large-prep procedure | 第19-21页 |
| ·Harvest cells | 第19页 |
| ·Lyse cells | 第19-20页 |
| ·Purify the plasmid DNA | 第20-21页 |
| 6 TRANSFECTION | 第21页 |
| ·Exgene 500 | 第21页 |
| ·Lipofectamine 2000 | 第21页 |
| 7 WESTERN BLOT | 第21-23页 |
| ·SDS-PAGE Gel Preparation | 第21-22页 |
| ·Preparation of cell extraction (6-well plate) | 第22页 |
| ·Running gel | 第22页 |
| ·Transferring | 第22-23页 |
| ·Blotting | 第23页 |
| ·Developing | 第23页 |
| 8 RT-PCR | 第23-24页 |
| ·RNA preparation | 第23-24页 |
| ·RT reaction | 第24页 |
| ·PCR reaction | 第24页 |
| 9 LUCIFERASE REPORTER ASSAY | 第24-26页 |
| ·Plasmids and construction | 第24-25页 |
| ·Solution preparation | 第25-26页 |
| ·Measure luciferase activity | 第26页 |
| 10 CHROMATIN IMMUNOPRECIPITATION (CHIP) ASSAY | 第26-28页 |
| ·Preparation | 第26页 |
| ·Sonication | 第26-27页 |
| ·Immunoprecipitation | 第27页 |
| ·PCR reaction | 第27-28页 |
| 11 STATISTICAL ANALYSIS | 第28-29页 |
| CHAPTER THREE RESULTS AND DISCUSSION | 第29-37页 |
| 1 EXPRESSION LEVELS OF MULE IN WT, JNK1-/- AND JNK2-/- MEFS | 第29-30页 |
| 2 REINTRODUCTION OF JNK1 TO JNK1-/- MEFS | 第30页 |
| 3 OVER EXPRESSION OF JNK1 IN HEK293 CELLS | 第30-31页 |
| 4 THE KNOCKDOWN OF JNK1 EXPRESSION BY SIRNA IN HEK293 CELLS | 第31-32页 |
| 5 MRNA LEVELS OF MULE IN WT, JNK1-/- AND JNK2-/- MEFS | 第32页 |
| 6 LUCIFERASE REPORTER ASSAY | 第32-35页 |
| ·MP-LUC construction | 第32-33页 |
| ·The Mule promoter activity in HEK293 cells transfected RSV-c-Jun or empty vector | 第33-34页 |
| ·The Mule promoter activity with TNFαstimulation in WT, Jnk1-/- and Jnk2-/- MEFs | 第34-35页 |
| 7 CHIP ASSAY | 第35-37页 |
| ·Visualization the efficiency of sonication | 第35-36页 |
| ·Analysis of c-Jun binding at the Mule promoter by ChIP assay | 第36-37页 |
| CHAPTER FOUR CONCLUSION | 第37-39页 |
| APPENDIX | 第39-41页 |
| 1. EXPRESSION LEVELS OF OTHER PROTEINS IN WT, JNK1-/- AND JNK2-/- MEFS ANALYZED BY IMMUNOBLOTTING | 第39页 |
| 2. SEQUENCE OF MULE PROMOTER | 第39-41页 |
| ACKNOWLEDGEMENTS | 第41-42页 |
| REFERENCES | 第42-45页 |
