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表达全长抗体Avastin的基因治疗系统联合CIK细胞治疗的实验研究

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-15页
缩略词表第15-17页
第一章 CIK 及全长抗体基因治疗抗肿瘤研究进展第17-22页
   ·前言第17-20页
     ·CIK 细胞免疫治疗研究进展第17-19页
     ·抗体治疗相关第19-20页
   ·本课题的创意及研究内容第20-22页
     ·本课题的创意第20页
     ·本课题的研究内容第20-22页
第二章 CIK 的体外扩增及检测第22-28页
   ·前言第22页
   ·实验器材第22-23页
     ·实验材料第22页
     ·所需的主要仪器第22-23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要试剂的配制第23页
   ·方法第23-25页
     ·外周血淋巴细胞的分离第23-24页
     ·细胞因子诱导的杀伤细胞的诱导培养第24-25页
     ·细胞表面标记检测第25页
   ·结果第25-26页
     ·PBMC 分离收获细胞量第25页
     ·细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的增殖曲线第25-26页
     ·CIK 细胞表面标记第26页
   ·讨论第26-27页
   ·小结第27-28页
第三章 携带AVASTIN 全长抗体基因的腺病毒/腺相关病毒复合病毒的构建第28-58页
   ·前言第28页
   ·实验器材第28-31页
     ·实验材料第28-29页
     ·主要的实验仪器与设备第29-30页
     ·主要试剂第30页
     ·主要试剂的配制第30-31页
   ·方法第31-47页
     ·载体构建第31-39页
     ·质粒的大量制备第39-40页
     ·病毒重组、扩增和纯化第40-46页
     ·病毒滴度的测定(50%组织培养感染剂量法)第46-47页
   ·结果第47-57页
     ·用于质粒pDC759-Avastin 构建的各目的片段的电泳结果第47-53页
     ·重组腺病毒的鉴定第53-57页
     ·病毒滴度测定第57页
   ·讨论第57页
   ·小结第57-58页
第四章 携带AVASTIN 复合病毒在CIK 中的表达第58-65页
   ·实验器材第58-60页
     ·实验所需材料第58页
     ·实验所需仪器第58-59页
     ·实验所需主要试剂第59页
     ·主要试剂的配制第59-60页
   ·实验方法第60-63页
     ·细胞培养第60页
     ·Ad-EGFP 病毒感染CIK第60页
     ·ELISA 方法检测蛋白的表达量第60-61页
     ·Western Blot 方法检测蛋白的表达第61-63页
   ·实验结果第63-64页
     ·Ad5-EGFP、Ad11-EGFP、Ad35-EGFP 感染CIK 荧光图第63页
     ·ELISA( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,酶联免疫吸附实验) 测抗体表达量第63页
     ·Western Blot 检测第63-64页
   ·讨论第64页
   ·小结第64-65页
结论第65-66页
参考文献第66-71页
附录第71-74页
 附录1 整体实验流程图第71-72页
 附录2 载体N-PDC659-AT7-H 的构建流程第72-73页
 附录3 载体N-PDC659-AT7 的构建流程第73-74页
 附录4 载体PDC759-AT7 的构建流程第74页

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