中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-15页 |
缩略词表 | 第15-17页 |
第一章 CIK 及全长抗体基因治疗抗肿瘤研究进展 | 第17-22页 |
·前言 | 第17-20页 |
·CIK 细胞免疫治疗研究进展 | 第17-19页 |
·抗体治疗相关 | 第19-20页 |
·本课题的创意及研究内容 | 第20-22页 |
·本课题的创意 | 第20页 |
·本课题的研究内容 | 第20-22页 |
第二章 CIK 的体外扩增及检测 | 第22-28页 |
·前言 | 第22页 |
·实验器材 | 第22-23页 |
·实验材料 | 第22页 |
·所需的主要仪器 | 第22-23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要试剂的配制 | 第23页 |
·方法 | 第23-25页 |
·外周血淋巴细胞的分离 | 第23-24页 |
·细胞因子诱导的杀伤细胞的诱导培养 | 第24-25页 |
·细胞表面标记检测 | 第25页 |
·结果 | 第25-26页 |
·PBMC 分离收获细胞量 | 第25页 |
·细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的增殖曲线 | 第25-26页 |
·CIK 细胞表面标记 | 第26页 |
·讨论 | 第26-27页 |
·小结 | 第27-28页 |
第三章 携带AVASTIN 全长抗体基因的腺病毒/腺相关病毒复合病毒的构建 | 第28-58页 |
·前言 | 第28页 |
·实验器材 | 第28-31页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·主要的实验仪器与设备 | 第29-30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·主要试剂的配制 | 第30-31页 |
·方法 | 第31-47页 |
·载体构建 | 第31-39页 |
·质粒的大量制备 | 第39-40页 |
·病毒重组、扩增和纯化 | 第40-46页 |
·病毒滴度的测定(50%组织培养感染剂量法) | 第46-47页 |
·结果 | 第47-57页 |
·用于质粒pDC759-Avastin 构建的各目的片段的电泳结果 | 第47-53页 |
·重组腺病毒的鉴定 | 第53-57页 |
·病毒滴度测定 | 第57页 |
·讨论 | 第57页 |
·小结 | 第57-58页 |
第四章 携带AVASTIN 复合病毒在CIK 中的表达 | 第58-65页 |
·实验器材 | 第58-60页 |
·实验所需材料 | 第58页 |
·实验所需仪器 | 第58-59页 |
·实验所需主要试剂 | 第59页 |
·主要试剂的配制 | 第59-60页 |
·实验方法 | 第60-63页 |
·细胞培养 | 第60页 |
·Ad-EGFP 病毒感染CIK | 第60页 |
·ELISA 方法检测蛋白的表达量 | 第60-61页 |
·Western Blot 方法检测蛋白的表达 | 第61-63页 |
·实验结果 | 第63-64页 |
·Ad5-EGFP、Ad11-EGFP、Ad35-EGFP 感染CIK 荧光图 | 第63页 |
·ELISA( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,酶联免疫吸附实验) 测抗体表达量 | 第63页 |
·Western Blot 检测 | 第63-64页 |
·讨论 | 第64页 |
·小结 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
附录 | 第71-74页 |
附录1 整体实验流程图 | 第71-72页 |
附录2 载体N-PDC659-AT7-H 的构建流程 | 第72-73页 |
附录3 载体N-PDC659-AT7 的构建流程 | 第73-74页 |
附录4 载体PDC759-AT7 的构建流程 | 第74页 |