| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-24页 |
| ·碳循环中的嗜甲烷菌 | 第12-14页 |
| ·微生物在碳循环中的作用 | 第12页 |
| ·甲烷的循环 | 第12-13页 |
| ·甲烷氧化作用 | 第13-14页 |
| ·嗜甲烷菌简介 | 第14页 |
| ·嗜甲烷菌的分类 | 第14-17页 |
| ·基于形态学的分类情况 | 第14-15页 |
| ·基于16S rDNA的分类情况 | 第15-17页 |
| ·嗜甲烷菌的研究方法 | 第17-20页 |
| ·纯培养方法 | 第17页 |
| ·分子生物学研究方法 | 第17-20页 |
| ·嗜甲烷菌的生态分布 | 第20页 |
| ·研究意义及主要研究工作 | 第20-24页 |
| ·研究意义 | 第20-22页 |
| ·研究主要工作 | 第22-24页 |
| 2 活性污泥总 DNA提取方法的确定 | 第24-31页 |
| 引言 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-27页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验试剂 | 第25页 |
| ·污泥样品的预处理 | 第25页 |
| ·活性污泥总 DNA的提取方法 | 第25-27页 |
| ·提取总 DNA质量检测 | 第27-28页 |
| ·基因组 DNA浓度测定和纯度鉴定 | 第27页 |
| ·PCR和凝胶电泳检测 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-29页 |
| ·提取方法的对比 | 第28-29页 |
| ·PCR扩增情况 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 3 活性污泥中微生物群落多样性鉴定 | 第31-38页 |
| 引言 | 第31页 |
| ·材料与方法 | 第31-33页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| ·实验试剂 | 第31-32页 |
| ·活性污泥样品的采集及保存 | 第32页 |
| ·活性污泥 DNA的提取 | 第32页 |
| ·细菌16S rDNAV3区的扩增 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增产物的 DGGE分析 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·总染色体 DNA提取 | 第33-34页 |
| ·活性污泥中细菌16S rDNA V3区DGGE结果 | 第34-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 4 嗜甲烷菌16S rDNA的变性梯度凝胶电泳分析 | 第38-49页 |
| 引言 | 第38页 |
| ·材料与方法 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38页 |
| ·PCR产物的扩增 | 第38-40页 |
| ·嗜甲烷菌16S rDNA基因的扩增 | 第38-39页 |
| ·嗜甲烷菌16S rDNA片断 V3区扩增反应条件 | 第39-40页 |
| ·变性梯度凝胶电泳检测嗜甲烷菌I型和II型多样性 | 第40-41页 |
| ·嗜甲烷菌16S rDNA的V3区变性梯度凝胶电泳 | 第40页 |
| ·对 DGGE图谱进行分析 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-47页 |
| ·嗜甲烷菌16S rDNA扩增结果 | 第41页 |
| ·嗜甲烷菌 I型多样性分析 | 第41-44页 |
| ·嗜甲烷菌 II型多样性分析 | 第44-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 5 嗜甲烷菌16S rDNA扩增片断的克隆与初步分析 | 第49-59页 |
| 引言 | 第49页 |
| ·材料与方法 | 第49-50页 |
| ·取样地点 | 第49页 |
| ·实验仪器 | 第49-50页 |
| ·培养基、抗生素以及常用溶液的配制 | 第50页 |
| ·PCR产物的扩增 | 第50页 |
| ·PCR产物的检测及纯化 | 第50页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
| ·构建克隆质粒 | 第51页 |
| ·电转化感受态细胞 | 第51页 |
| ·提取质粒 | 第51页 |
| ·质粒的 ARDRA分析 | 第51-52页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第51-52页 |
| ·酶切产物的电泳分析 | 第52页 |
| ·文库指标分析 | 第52页 |
| ·序列测定 | 第52页 |
| ·系统发育分析 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-56页 |
| ·重组质粒转化感受态细胞 | 第53页 |
| ·文库的 RFLP酶切图谱分析 | 第53-55页 |
| ·文库分析 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录A 部分嗜甲烷菌typeI的16S rDNA序列 | 第65-68页 |
| 附录B 部分嗜甲烷菌typeII的16S rDNA序列 | 第68-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 大连理工大学学位论文版权使用授权书 | 第72页 |
