| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-28页 |
| ·认识转基因植物 | 第9-12页 |
| ·转基因植物的发展、应用领域 | 第9-10页 |
| ·转基因植物的安全性问题 | 第10页 |
| ·转Bt基因植物 | 第10-12页 |
| ·目标蛋白的纯化分离方法 | 第12-19页 |
| ·色谱法 | 第13-17页 |
| ·电泳法 | 第17-19页 |
| ·质谱技术鉴定蛋白 | 第19-21页 |
| ·MALDI-TOF-MS在PMF的应用 | 第19-20页 |
| ·ESI-MS/MS测定肽序列标签 | 第20-21页 |
| ·酶的固定化技术 | 第21-27页 |
| ·固定化酶在酶解反应中的重要性 | 第21-22页 |
| ·吸附法 | 第22-23页 |
| ·交联法 | 第23-24页 |
| ·共价结合法 | 第24-25页 |
| ·包埋法 | 第25-26页 |
| ·酶固定法的联用 | 第26-27页 |
| ·论文课题研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 第二章 转Cry1Ab基因植物中低丰度表达产物Cry1Ab蛋白的纯化方法及杀虫活性试验 | 第28-43页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·实验部分 | 第28-36页 |
| ·原料、仪器与试剂 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-42页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast-Flow离子交换色谱(IEC)分离效果 | 第36-37页 |
| ·Phenyl-Sepharose Fast Flow疏水作用色谱纯化目标蛋白 | 第37-38页 |
| ·Cry1Ab蛋白在Q-Sepharose Fast-Flow离子交换柱上的分离 | 第38-39页 |
| ·蛋白样品的多次循环上样分离 | 第39-40页 |
| ·Cry1Ab蛋白的纯度验证 | 第40-41页 |
| ·从转基因玉米和水稻中纯化的Cry1Ab蛋白(Bt-c和Bt-r)杀虫活性 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 Cry1Ab蛋白肽谱的鉴定 | 第43-53页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·实验部分 | 第43-46页 |
| ·仪器与试剂 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-51页 |
| ·酶消解前蛋白凝胶的预处理 | 第46页 |
| ·酶量对原位胶酶消解的影响 | 第46页 |
| ·Cry1Ab蛋白的肽谱鉴定 | 第46-50页 |
| ·数据库查询结果 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 第四章 溶胶—凝胶法固定胰蛋白酶 | 第53-67页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·实验部分 | 第53-56页 |
| ·仪器与试剂 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-65页 |
| ·不同硅试剂对凝胶膜的影响 | 第56-58页 |
| ·不同硅试剂包埋胰蛋白酶的活性比较 | 第58页 |
| ·包埋的胰蛋白酶稳定性测定 | 第58-60页 |
| ·pH对成膜及trypsin活性的影响 | 第60页 |
| ·HPLC分析酶解产物 | 第60-64页 |
| ·Trypsin经凝胶包埋前后的IR分析 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-67页 |
| 第五章 IMAC法固定胰蛋白酶 | 第67-79页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·实验部分 | 第67-71页 |
| ·仪器与试剂 | 第67-68页 |
| ·实验方法 | 第68-71页 |
| ·结果与讨论 | 第71-78页 |
| ·CTS-SiO_2的制备及表面形态分析 | 第71页 |
| ·CTS-SiO_2颗粒的化学稳定性 | 第71-72页 |
| ·胰蛋白酶结构及酶中有金属螯合能力氨基酸的表面接近度预测 | 第72-73页 |
| ·pH的吸附影响 | 第73-74页 |
| ·吸附动力曲线 | 第74页 |
| ·吸附等温线 | 第74-75页 |
| ·酶在IMAC的解附 | 第75-76页 |
| ·胰蛋白酶在M-CTS-SiO_2上的活性保留 | 第76-77页 |
| ·固定在CTS-SiO_2的酶的稳定性 | 第77-78页 |
| ·固定胰蛋白酶的重复使用 | 第78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
