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利用电融合方法生产体细胞克隆小鼠

摘要第1-9页
Abstract第9-10页
1 引言第10-16页
   ·电融合技术国内外研究动态第10-12页
     ·细胞融合技术发展历史第10-11页
     ·电融合机制和动力学过程第11页
     ·电融合技术的基础研究第11-12页
   ·应用核移植技术生产体细胞克隆动物的发展历史第12-13页
   ·核移植技术生产体细胞克隆小鼠的研究第13-14页
     ·体细胞克隆小鼠的诞生第13页
     ·电融合技术生产体细胞小鼠的局限性第13页
     ·电融合与卵细胞活化第13-14页
     ·哺乳动物四倍体发育问题的研究第14页
   ·研究的目的和意义第14-16页
     ·为小鼠体细胞核移植建立一种体系第14-15页
     ·与显微注射技术结合形成一种对照第15-16页
2 材料与方法第16-28页
   ·实验材料第16-20页
     ·小鼠第16页
     ·主要试剂第16页
     ·实验设备第16-17页
     ·实验过程所用缓冲液与常用试剂的配制第17-20页
   ·实验方法第20-27页
     ·显微操作(电融合)第21-22页
     ·显微操作(显微注射)第22-23页
     ·孤雌培养对照试验第23-24页
     ·受精胚胎对照实验第24页
     ·胚胎移植实验操作流程第24-25页
     ·老化卵母细胞的获得第25页
     ·单胚成纤维细胞的分离和传代第25-27页
   ·数据处理第27-28页
3 结果第28-40页
   ·不同核移植方法对于重构胚发育的影响第28-29页
     ·电融合重构胚胎的体外发育第28页
     ·注射和电融合两种核移植方法获得的重构胚胎的体外发育第28页
     ·注射和电融合两种核移植方法获得的重构胚胎的体内发育第28-29页
   ·不同的活化方法对于胚胎活化以及活化后体外发育的影响第29-31页
     ·电融合液中的Ca~(2+)对于重构胚胎发育的影响第29页
     ·电融合液中的不同Ca~(2+)浓度对于重构胚胎发育的影响第29-30页
     ·不同的活化方法对于重构胚胎发育的影响第30-31页
   ·受体卵母细胞老化对于电融合重构胚的影响第31-32页
     ·老年雌鼠的新鲜卵母细胞对于重构胚胎发育的影响第31页
     ·老年雌鼠的老化卵母细胞对于重构胚胎发育的影响第31页
     ·成年雌鼠的老化卵母细胞对于重构胚胎发育的影响第31-32页
     ·老化对于重构胚胎发育的影响第32页
   ·不同品系小鼠的电融合效率比较第32-33页
   ·不同电融合条件对于电融合重构胚胎的融合和早期发育的影响第33-35页
     ·直流电压对于电融合重构胚胎的融合和早期发育的影响第33-34页
     ·电脉冲次数对于电融合重构胚胎的融合和早期发育的影响第34页
     ·电压作用时间对于电融合重构胚胎的融合和早期发育的影响第34-35页
   ·不同供体细胞对于体细胞克隆小鼠早期发育的影响第35页
     ·单胚成纤维细胞和颗粒细胞作为供体细胞对于体细胞克隆小鼠早期发育的影响第35页
   ·体细胞克隆小鼠后期观察第35-40页
     ·体细胞克隆小鼠胎盘﹑正常出生小鼠和体外胚胎操作小鼠胎盘的比较第36-37页
     ·体细胞克隆小鼠体重﹑正常出生小鼠和体外胚胎操作小鼠体重的比较第37-38页
     ·体细胞克隆小鼠可育性分析第38-40页
4 讨论第40-44页
   ·不同核移植方法对于小鼠克隆胚胎发育的影响第40页
   ·Ca~(2+)对于小鼠克隆胚胎的活化和早期发育的影响第40-41页
   ·老化对于小鼠克隆胚胎的活化和早期发育的影响第41页
   ·不同品系小鼠核移植效率第41-42页
   ·电融合条件对于重构胚胎体外发育的影响第42页
   ·不同供体细胞对于克隆胚胎早期发育的影响第42页
   ·体细胞克隆小鼠后期观察第42-44页
5 结论第44-45页
致谢第45-46页
参考文献第46-51页
附录第51-52页
中英文全名对照表第52-53页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第53页

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