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白斑综合征病毒(WSSV)三种重要囊膜蛋白的重组表达及在病害防控中的作用

致谢第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-14页
第一章 文献综述第14-43页
   ·前言第14-15页
   ·脊尾白虾第15-17页
   ·甲壳动物的免疫系统第17-21页
     ·甲壳动物的先天免疫第18-21页
     ·甲壳动物中类似特异免疫防御的现象第21页
   ·白斑综合征病毒(white spot syndrome virus, WSSV)第21-40页
     ·WSSV的命名第21-22页
     ·虾类白斑综合症的症状第22页
     ·WSSV的分类地位第22-23页
     ·WSSV的大小、形态和结构第23-26页
     ·WSSV的宿主范围和传播途径第26-29页
     ·WSSV的DNA和蛋白研究第29-34页
     ·WSSV的感染机制研究第34-37页
     ·WSSV的防治研究第37-40页
   ·本研究的目的和意义第40-43页
第二章 组成型分泌WSSV囊膜蛋白VP28 的重组活菌的构建第43-60页
   ·材料和方法第43-52页
     ·材料第43-47页
       ·实验所选囊膜蛋白和报告基因第43-44页
       ·实验所用的菌株和载体第44页
       ·实验所用的引物第44-45页
       ·实验所用培养基和溶液配制第45-47页
     ·方法第47-52页
       ·目的序列的克隆第47-49页
       ·目的片段与表达载体的连接及宿主菌的转化第49-51页
       ·重组菌DhpV和DhpVB的表达分析第51-52页
   ·结果第52-58页
     ·目的序列的克隆第52-53页
     ·目的片段与表达载体的连接及宿主菌的转化第53-56页
     ·重组菌DhpV、 DhpVB和DhpVP28-EGFP的表达分析第56-58页
   ·讨论第58-60页
第三章 组成型分泌VP28 的重组活菌对脊尾白虾的保护试验第60-73页
   ·材料和方法第60-65页
     ·溶液配制及实验所用引物第60-61页
     ·实验动物第61页
     ·WSSV的制备和定量第61-62页
     ·重组活菌DhpVB在脊尾白虾体内的驻留情况检测第62-63页
     ·重组活菌DhpVB在脊尾白虾体内的表达分析第63-64页
     ·攻毒实验第64-65页
     ·数据统计第65页
   ·结果第65-70页
     ·WSSV的制备和定量第65-66页
     ·重组活菌DhpVB在脊尾白虾体内的驻留情况检测第66-67页
     ·重组活菌DhpVB在脊尾白虾体内的表达分析第67-68页
     ·攻毒实验第68-70页
   ·讨论第70-73页
第四章 WSSV囊膜蛋白VP281、VP31 和VP28 的原核表达第73-86页
   ·材料和方法第73-79页
     ·材料第73-76页
       ·候选WSSV囊膜蛋白第73页
       ·实验使用的菌株和载体第73-74页
       ·实验所用的引物第74页
       ·实验所用的溶液配制第74-76页
     ·方法第76-79页
       ·目的序列的克隆第76页
       ·目的片段与表达载体的连接及宿主菌的转化第76-77页
       ·重组蛋白的表达分析第77-78页
       ·重组蛋白的纯化、复性和浓度测定第78-79页
   ·结果第79-84页
     ·目的序列的克隆第79-80页
     ·目的片段与表达载体的连接及宿主菌的转化第80-82页
     ·重组菌的表达分析第82-83页
     ·重组蛋白的纯化、复性和浓度测定第83-84页
   ·讨论第84-86页
第五章 重组WSSV囊膜蛋白VP281 和VP31 的抗菌功能初步分析第86-96页
   ·材料和方法第86-89页
     ·材料第86-87页
     ·方法第87-89页
       ·含有组成分泌型表达载体pBTA1 的重组DH5α的构建第87页
       ·重组菌DhpVP281 的表达检测第87页
       ·rVP31 蛋白的获得第87页
       ·重组菌DhpVP281、DhpVP28 和DhpVP28-EGFP的生长比较第87-88页
       ·复性的rVP31 的抗菌作用检测第88-89页
   ·结果第89-93页
     ·重组菌DhpVP281 的构建第89-90页
     ·重组菌DhpVP281 的表达分析第90-91页
     ·WSSV囊膜蛋白VP281 对宿主菌大肠杆菌的抑制作用第91-93页
     ·WSSV囊膜蛋白VP31 对溶壁微球菌的溶菌作用第93页
   ·讨论第93-96页
结论第96-97页
参考文献第97-112页
作者简历第112-113页
攻读博士期间发表论文情况第113页

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