| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 英文缩写符号及中英文对照表 | 第16-19页 |
| 1 前言 | 第19-36页 |
| ·细胞信号转导 | 第19-22页 |
| ·细胞信号及其种类 | 第20-22页 |
| ·植物细胞信号转导 | 第22-25页 |
| ·环境信号的胞间传递 | 第23页 |
| ·环境信号的跨膜转换 | 第23-24页 |
| ·第二信使产生和传输过程 | 第24-25页 |
| ·蛋白质的可逆磷酸化 | 第25页 |
| ·蛋白磷酸酶 | 第25-35页 |
| ·蛋白磷酸酶的发现 | 第25-26页 |
| ·植物蛋白磷酸酶的分类 | 第26-27页 |
| ·植物中PP2C 的生化特性与蛋白质结构 | 第27-28页 |
| ·PP2C 的进化 | 第28-29页 |
| ·植物细胞内PP2C 的调控 | 第29-30页 |
| ·植物中PP2C 的功能 | 第30-35页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-67页 |
| ·实验材料 | 第36-40页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第36-37页 |
| ·菌株与质粒 | 第37页 |
| ·酶及生化试剂 | 第37页 |
| ·PCR 引物 | 第37-38页 |
| ·培养基 | 第38-40页 |
| ·实验方法 | 第40-67页 |
| ·植物材料总RNA 的提取 | 第40-42页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第42页 |
| ·cDNA 纯化（用于5’RACE） | 第42-43页 |
| ·对cDNA 进行末端加尾（用于5’RACE） | 第43页 |
| ·玉米根系蛋白磷酸酶ZmPP2C2 基因全长的克隆 | 第43-46页 |
| ·连接反应 | 第46页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第46-47页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第47-48页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第48页 |
| ·DNA 序列测定 | 第48-49页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第49-52页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第52-54页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化（如图2－1 所示） | 第54-56页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第56-57页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第57-58页 |
| ·ZmPP2C2 的原核表达及抗体制备 | 第58-62页 |
| ·Western blot 检测蛋白表达 | 第62-64页 |
| ·洋葱表皮亚细胞定位 | 第64页 |
| ·烟草种子萌发实验 | 第64-65页 |
| ·转基因烟草植株生理指标测定 | 第65-67页 |
| 3. 结果与分析 | 第67-107页 |
| ·玉米根系蛋白磷酸酶ZmPP2C2 基因的分离 | 第67-69页 |
| ·ZmPP2C2 中间片段的分离 | 第67页 |
| ·ZmPP2C2 5’片段的分离 | 第67页 |
| ·ZmPP2C2 3’片段的分离 | 第67-69页 |
| ·ZmPP2C2 全长cDNA 的分离 | 第69页 |
| ·ZmPP2C2 基因的序列分析 | 第69-73页 |
| ·ZmPP2C2-GFP 融合蛋白的亚细胞定位 | 第73-74页 |
| ·ZmPP2C2 基因在大肠杆菌中的表达、抗体制备及效价测定 | 第74-78页 |
| ·原核表达载体pET30a-ZmPP2C2 的构建 | 第74-75页 |
| ·重组蛋白SDS-PAGE 分析 | 第75-77页 |
| ·pET30a-Zm PP2C2 重组蛋白亲和纯化及抗血清效价测定 | 第77-78页 |
| ·ZmPP2C2 基因在玉米中的表达分析 | 第78-82页 |
| ·ZmPP2C2 在玉米基因组中的拷贝数分析 | 第78页 |
| ·ZmPP2C2 基因在玉米不同器官的表达 | 第78-79页 |
| ·ZmPP2C2 基因对信号物质和逆境胁迫的应答 | 第79-80页 |
| ·ZmPP2C2 基因对低温胁迫的时间响应 | 第80-82页 |
| ·ZmPP2C2 基因在烟草中的转化 | 第82-85页 |
| ·转基因烟草正义表达载体的构建 | 第82-83页 |
| ·转基因烟草植株的鉴定 | 第83-85页 |
| ·ZmPP2C2 的过表达增强转基因烟草对低温胁迫的抗性 | 第85-91页 |
| ·ZmPP2C2 的过表达对低温胁迫下烟草种子萌发的影响 | 第85-87页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对低温胁迫下转基因烟草相对电导率及MDA 含量的影响 | 第87-88页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对低温胁迫下转基因烟草抗氧化酶系统活性的影响 | 第88-90页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对低温胁迫下转基因烟草脯氨酸和可溶性糖含量的影响 | 第90-91页 |
| ·ZmPP2C2 的过表达增强转基因烟草对盐胁迫的抗性 | 第91-99页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对盐胁迫下烟草种子萌发的影响 | 第91-93页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对盐胁迫下转基因烟草叶片气体交换参数的影响 | 第93-94页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对盐胁迫下转基因烟草叶片荧光参数的影响 | 第94页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对盐胁迫下转基因烟草相对电导率及 MDA 含量的影响 | 第94-96页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对盐胁迫下转基因烟草抗氧化酶系统活性的影响 | 第96-97页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对盐胁迫下转基因烟草脯氨酸和可溶性糖含量的影响 | 第97-98页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对盐胁迫下转基因烟草可溶性蛋白的影响 | 第98-99页 |
| ·ZmPP2C2 的过表达增强转基因烟草对干旱胁迫的抗性 | 第99-107页 |
| ·ZmPP2C2 的过表达对水分胁迫下烟草种子萌发的影响 | 第99-101页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对水分胁迫下转基因烟草气体交换参数的影响 | 第101-102页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对水分胁迫下转基因烟草相对电导率及MDA 含量的影响 | 第102-103页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对水分胁迫下转基因烟草抗氧化酶系统活性的影响 | 第103-104页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对水分胁迫下转基因烟草脯氨酸和可溶性糖含量的影响 | 第104-105页 |
| ·ZmPP2C2 过表达对水分胁迫下转基因烟草可溶性蛋白的影响 | 第105-107页 |
| 4 讨论 | 第107-114页 |
| ·ZmPP2C2 编码PP2C 类蛋白磷酸酶 | 第107-108页 |
| ·信号物质及逆境胁迫对ZmPP2C2 基因的表达调控 | 第108-109页 |
| ·ZmPP2C2 过表达提高了转基因烟草对低温、盐渍和干旱逆境的抗性 | 第109-114页 |
| 5 结论 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第133页 |
