摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-15页 |
第一章 猪繁殖与呼吸综合征及其病原的研究进展 | 第15-39页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒的起源和分类 | 第15-16页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒生物学特性 | 第16-18页 |
·病毒的形态特征 | 第16页 |
·病毒的侵入和释放 | 第16-17页 |
·病毒的培养特性 | 第17页 |
·病毒的抵抗力 | 第17页 |
·病毒的血凝特性 | 第17-18页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究 | 第18-28页 |
·病毒的基因组结构与特点 | 第18页 |
·病毒基因组编码的蛋白的结构和功能 | 第18-23页 |
·病毒的复制特点 | 第23页 |
·PRRSV 的分子遗传变异 | 第23-26页 |
·P RRSV 的流行病学研究 | 第26页 |
·宿主因素 | 第26页 |
·病毒因素 | 第26页 |
·疫苗因素 | 第26-27页 |
·饲养管理与环境因素的影响 | 第27-28页 |
·PRRS 的临床症状 | 第28-29页 |
·PRRS 发生后猪的组织病理学变化 | 第29-30页 |
·胎儿、新生仔猪 | 第29页 |
·哺乳仔猪 | 第29页 |
·母猪 | 第29-30页 |
·诊断研究 | 第30-33页 |
·病毒分离 | 第30页 |
·抗原检测 | 第30-31页 |
·血清学试验检测抗体 | 第31页 |
·分子生物学检测方法 | 第31-33页 |
·免疫学研究 | 第33-37页 |
·感染免疫反应 | 第33-34页 |
·对免疫细胞的影响 | 第34页 |
·体液免疫 | 第34-35页 |
·细胞免疫 | 第35页 |
·细胞因子的产生 | 第35-36页 |
·抗体依赖性增强作用 | 第36-37页 |
·PRRSV 与其他病原体的相互作用 | 第37页 |
·疫苗免疫及防制策略 | 第37-39页 |
第二章 2006 年“猪高热病”的概况 | 第39-43页 |
·“猪高热病”概况 | 第39-41页 |
·2006 年“猪高热病”病情进展 | 第39页 |
·“猪高热病”的流行病学调查 | 第39-40页 |
·“高热病”病猪主要临床症状 | 第40页 |
·“高热病”病猪剖检病变 | 第40页 |
·“猪高热病”流行的诱因 | 第40-41页 |
·“猪高热病”造成的负面影响 | 第41页 |
·“猪高热病”的诊断和治疗 | 第41页 |
·“猪高热病”病原研究进展 | 第41-43页 |
第三章 “高热病”猪群中PRRSV 的调查与其流行毒株的分离 | 第43-50页 |
·试验材料 | 第43-44页 |
·主要试验仪器 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43-44页 |
·细胞与阳性对照病毒株 | 第44页 |
·试验方法 | 第44-46页 |
·培养基的配制 | 第44页 |
·引物设计 | 第44页 |
·病例与猪群的调查 | 第44页 |
·病料的采集及处理 | 第44页 |
·血清中PRRSV 抗体的检测 | 第44-45页 |
·病料中PRRSV 的检测 | 第45页 |
·细胞培养 | 第45页 |
·病毒分离 | 第45-46页 |
·结果 | 第46-48页 |
·血清样品中PRRSV 抗体的检测 | 第46页 |
·病料样品中PRRSV RT-PCR 结果 | 第46页 |
·病毒分离 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
第四章 PRRSV 流行株JIANGXI-3 的全基因组序列分析 | 第50-72页 |
·试验材料 | 第50-51页 |
·主要仪器 | 第50页 |
·试剂和耗材 | 第50-51页 |
·毒株、菌种和质粒 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-55页 |
·培养基的配制 | 第51页 |
·引物设计 | 第51-52页 |
·病毒RNA 的提取 | 第52页 |
·各段基因的扩增 | 第52-53页 |
·RT-PCR 产物的鉴定 | 第53页 |
·纯化回收CDNA 片段 | 第53页 |
·纯化产物与PMD 18-T VECTOR 连接 | 第53页 |
·感受态细胞的制备(CACL2 法) | 第53-54页 |
·连接产物的转化 | 第54页 |
·重组质粒的提取 | 第54-55页 |
·重组质粒的鉴定 | 第55页 |
·重组质粒的测序分析 | 第55页 |
·本研究分离毒株全基因组序列变异分析 | 第55页 |
·结果 | 第55-70页 |
·全基因组多个片断的扩增及阳性克隆鉴定 | 第55-57页 |
·序列测定与分析 | 第57-70页 |
·讨论 | 第70-72页 |
第五章 PRRSV 流行株NSP2、ORF5、ORF3 基因的序列分析 | 第72-78页 |
·实验材料 | 第72-73页 |
·毒株、菌种和质粒 | 第72页 |
·试剂和耗材 | 第72页 |
·主要仪器 | 第72-73页 |
·实验方法 | 第73-74页 |
·引物设计 | 第73页 |
·病毒的增殖 | 第73页 |
·病毒RNA 的提取 | 第73页 |
·RT-PCR | 第73页 |
·RT-PCR 产物的鉴定 | 第73页 |
·纯化回收CDNA 片段 | 第73页 |
·纯化产物与PMD 18-T VECTOR 连接 | 第73页 |
·感受态细胞的制备(CACL2 法) | 第73页 |
·连接产物的转化 | 第73页 |
·重组质粒的提取 | 第73-74页 |
·重组质粒的鉴定 | 第74页 |
·分离毒株ORF3、ORF5、NSP2 序列分析 | 第74页 |
·结果 | 第74-76页 |
·病毒的增殖 | 第74页 |
·ORF3、NSP2 和ORF5 基因的克隆测序 | 第74页 |
·NSP2 基因变异缺失区序列分析 | 第74-75页 |
·所测毒株ORF5 基因的同源性分析 | 第75-76页 |
·ORF3 基因序列分析 | 第76页 |
·讨论 | 第76-78页 |
第六章 上述PRRSV NSP2 缺失株检测方法的建立 | 第78-83页 |
·试验材料 | 第78页 |
·细胞及毒株 | 第78页 |
·主要试剂 | 第78页 |
·主要仪器 | 第78页 |
·试验方法 | 第78-79页 |
·引物设计 | 第78-79页 |
·病毒RNA 的制备 | 第79页 |
·RT-PCR 扩增 | 第79页 |
·特异性试验 | 第79页 |
·敏感性试验 | 第79页 |
·灵敏度试验 | 第79页 |
·结果 | 第79-81页 |
·PCR 扩增条件的优化 | 第79页 |
·特异性试验 | 第79-80页 |
·敏感性试验 | 第80-81页 |
·灵敏度试验 | 第81页 |
·讨论 | 第81-83页 |
第七章 猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株的致病性试验 | 第83-91页 |
·试验材料 | 第83页 |
·毒株 | 第83页 |
·试剂 | 第83页 |
·试验动物 | 第83页 |
·试验方法 | 第83-84页 |
·病毒增殖 | 第83-84页 |
·病毒TCID_(50) 的测定 | 第84页 |
·致病性试验 | 第84页 |
·结果 | 第84-88页 |
·病毒的增殖 | 第84页 |
·TCID_(50) 测定 | 第84-85页 |
·致病性试验 | 第85-88页 |
·讨论 | 第88-91页 |
第八章 PRRSV 流行株JIANGXI-3 灭活疫苗的效果评价 | 第91-109页 |
·试验材料 | 第91页 |
·毒株 | 第91页 |
·试剂 | 第91页 |
·试验动物 | 第91页 |
·试验方法 | 第91-93页 |
·病毒增殖 | 第91页 |
·病毒TCID_(50) 的测定 | 第91-92页 |
·JIANGXI-3 毒株的6 月龄猪的攻毒试验 | 第92页 |
·JIANGXI-3 毒株的LD_(50) 的测定 | 第92页 |
·灭活疫苗的研制 | 第92页 |
·灭活疫苗的效果评价 | 第92-93页 |
·结果 | 第93-105页 |
·JIANGXI-3 9 代的TCID_(50) 测定 | 第93页 |
·6 月龄猪试验结果 | 第93-95页 |
·LD_(50) 试验的结果 | 第95-97页 |
·LD_(50) 试验后存活猪的再次攻毒试验结果 | 第97-98页 |
·灭活疫苗的免疫效果评价试验结果 | 第98-105页 |
·讨论 | 第105-109页 |
·临床症状 | 第105-106页 |
·解剖病变和病理变化 | 第106页 |
·抗原的变化 | 第106页 |
·抗体的变化 | 第106-109页 |
结论 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-122页 |
附录1 动物试验部分照片 | 第122-124页 |
附录2 部分毒株的基因登录结果 | 第124-136页 |
致谢 | 第136-137页 |
作者简介 | 第137页 |