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小麦—黑麦抗白粉病衍生系遗传分析及其相关基因差异表达与克隆

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-37页
   ·黑麦在小麦改良中的应用第12-20页
     ·黑麦属分类物质第12页
     ·黑麦基因在小麦育种中的重要性第12-13页
     ·黑麦染色体特性第13-14页
     ·黑麦遗传物质鉴定方法第14-20页
   ·植物抗病性研究进展第20-34页
     ·过敏性坏死反应第20页
     ·系统获得性抗性第20-21页
     ·植物与病原菌的互作第21-22页
     ·小麦白粉病的发生、流行及危害第22-23页
     ·小麦抗白粉病基因研究第23-27页
     ·植物抗病基因克隆策略第27-32页
     ·全长cDNA 克隆方法及其验证第32-34页
   ·生物信息学及其应用第34-35页
   ·本研究技术路线及预期成果第35页
   ·本研究立题依据第35-37页
第二章 小麦-黑麦抗白粉病衍生系遗传学研究第37-52页
   ·材料第37页
   ·方法第37-40页
     ·农艺性状调查第37-38页
     ·白粉病抗性鉴定第38页
     ·细胞学分析第38页
     ·奥地利黑麦C-分带及核型分析第38-39页
     ·基因组原位杂交第39页
     ·高分子量麦谷蛋白亚基分析第39-40页
     ·酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)分析第40页
     ·分子标记第40页
   ·结果与分析第40-49页
     ·小麦-黑麦衍生系农艺性状调查第40-41页
     ·小麦-黑麦衍生系白粉病抗性鉴定第41-42页
     ·小麦-黑麦衍生系细胞学分析第42-43页
     ·奥地利黑麦C-分带及核型分析第43-45页
     ·小麦-黑麦衍生系C-分带第45页
     ·小麦-黑麦衍生系基因组原位杂交第45-46页
     ·小麦-黑麦衍生系高分子量麦谷蛋白亚基分析第46页
     ·小麦-黑麦衍生系酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)分析第46-47页
     ·分子标记第47-49页
   ·讨论第49-52页
     ·C 分带技术在鉴定外源遗传物质中的重要性第49-50页
     ·黑麦优异基因在小麦育种中的应用前景第50-52页
第三章 小麦-黑麦抗白粉病衍生系抑制性消减杂交文库的构建第52-61页
   ·材料第52页
   ·方法第52-56页
     ·总RNA 提取及纯化第52-53页
     ·cDNA 文库的构建第53-56页
   ·实验方案第56-57页
   ·结果与分析第57-60页
     ·总RNA 质量检测第57页
     ·双链cDNA 的合成及酶切检测第57-58页
     ·消减杂交后两轮PCR 扩增检测第58页
     ·PCR 产物的克隆转化及阳性克隆的检测第58-59页
     ·提取质粒检测第59-60页
   ·讨论第60-61页
第四章 小麦-黑麦抗白粉病衍生系相关基因片段的生物信息学分析及表达谱的初步建立第61-78页
   ·材料第61页
   ·方法第61-62页
     ·文库的构建与差异片段的获得第61页
     ·差异片段的序列测定及生物信息学分析第61-62页
   ·结果与分析第62-75页
     ·正交文库EST 序列的比对分析第62-69页
     ·反交文库EST 序列的比对分析第69-74页
     ·两个文库的比较分析第74-75页
   ·讨论第75-78页
     ·植物抗白粉病反应涉及的基因第75-76页
     ·抗病机制与抗病性改良第76-78页
第五章 小麦-黑麦抗白粉病衍生系部分差异片段的半定量RT-PCR 验证及表达模式分析第78-86页
   ·材料第78页
   ·方法第78-79页
     ·小麦-黑麦衍生系总RNA 提取及纯化第78页
     ·cDNA 第一链的合成第78页
     ·RT-PCR 所用引物、反应体系及程序第78-79页
   ·结果与分析第79-85页
     ·循环次数的确定及模板浓度的调整第79-80页
     ·不同基因表达模式分析第80-85页
   ·讨论第85-86页
第六章 小麦-黑麦抗白粉病衍生系差异表达基因全长CDNA 序列的克隆与结构分析第86-97页
   ·材料第86页
   ·方法第86-88页
     ·总RNA 的提取及纯化第86页
     ·cDNA 第一链的合成第86页
     ·根据已知EST 进行电子克隆延伸第86-87页
     ·RT-PCR 验证引物设计及反应温度第87页
     ·RT-PCR 反应体系及程序第87页
     ·目的片段的回收、克隆及测序第87页
     ·序列的生物信息学分析第87-88页
   ·结果与分析第88-95页
     ·谷胱甘肽硫转移酶 RT-PCR 分析第88页
     ·谷胱甘肽硫转移酶Blastx 比对分析第88-89页
     ·谷胱甘肽硫转移酶ORF 分析第89页
     ·谷胱甘肽硫转移酶结构与功能分析第89-92页
     ·谷胱甘肽硫转移酶其他特性分析第92-95页
   ·讨论第95-97页
第七章 结论第97-98页
参考文献第98-109页
致谢第109-110页
作者简介第110页

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