| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-16页 |
| 文献综述 | 第16-45页 |
| 第一章 气管黏膜上皮细胞体外培养与应用的研究进展 | 第16-33页 |
| ·气管的组成 | 第16页 |
| ·气管的微细结构 | 第16-19页 |
| ·黏膜上皮 | 第17-18页 |
| ·黏膜下层 | 第18-19页 |
| ·外膜 | 第19页 |
| ·气管黏膜上皮的生理功能 | 第19页 |
| ·纤毛生理功能 | 第19页 |
| ·气管和支气管分泌物功能 | 第19页 |
| ·气管黏膜上皮与呼吸道疾病 | 第19-23页 |
| ·气管黏膜上皮的防御作用 | 第20页 |
| ·气管、支气管黏膜上皮在哮喘发病中的作用 | 第20-21页 |
| ·气管黏膜上皮与禽流感新发现 | 第21页 |
| ·气管黏膜上皮与猪链球菌病 | 第21-22页 |
| ·气管黏膜上皮与新城疫 | 第22页 |
| ·气管黏膜上皮与鸡传染性支气管炎 | 第22-23页 |
| ·气管黏膜上皮细胞体外培养的应用 | 第23-26页 |
| ·为组织工程气管研制提供种子细胞 | 第23-24页 |
| ·用于气管黏膜上皮细胞转化试验 | 第24-25页 |
| ·用于气管黏膜上皮细胞抗菌多肽等分泌物分析研究 | 第25页 |
| ·用于动物疾病的研究 | 第25-26页 |
| ·气管黏膜上皮细胞体外培养技术的发展 | 第26-31页 |
| ·传统单层细胞生长方式的气管黏膜上皮培养技术 | 第26页 |
| ·气管黏膜上皮细胞气液界面培养技术 | 第26-30页 |
| ·上皮细胞共培养技术 | 第30-31页 |
| ·气管黏膜上皮细胞的鉴定 | 第31-33页 |
| 第二章 传染性支气管炎病毒研究进展 | 第33-45页 |
| ·IBV 基因组结构 | 第33-34页 |
| ·IBV 的非结构域 | 第34-35页 |
| ·IBV 的分子变异机制 | 第35-36页 |
| ·IBV 遗传变异的研究近况 | 第36-38页 |
| ·基因突变引起的遗传变异 | 第36-37页 |
| ·基因重组引起的遗传变异 | 第37页 |
| ·免疫压力引起的遗传变异 | 第37-38页 |
| ·外来禽只引进“新毒株” | 第38页 |
| ·IBV 的免疫机制 | 第38-42页 |
| ·IBV 的分子免疫学结构 | 第38-39页 |
| ·鸡体对IBV 的非特异性免疫 | 第39-40页 |
| ·宿主对IBV 的特异性体液免疫 | 第40页 |
| ·宿主对IBV 特异性的细胞免疫 | 第40-41页 |
| ·免疫方法 | 第41-42页 |
| ·IBV 的体外培养特性 | 第42-45页 |
| ·鸡胚中的培养 | 第42页 |
| ·气管环组织培养 | 第42-43页 |
| ·细胞培养 | 第43-45页 |
| 试验研究 | 第45-85页 |
| 第三章 鸡气管黏膜上皮细胞共培养体系的建立及鉴定 | 第45-61页 |
| ·材料 | 第45-48页 |
| ·试验动物和鸡胚来源 | 第45-46页 |
| ·基础培养基 | 第46页 |
| ·血清 | 第46页 |
| ·羊下丘脑粗提物的制备 | 第46页 |
| ·胰岛素 | 第46页 |
| ·转铁蛋白 | 第46页 |
| ·人表皮生长因子 | 第46页 |
| ·牛垂体提取物 | 第46-47页 |
| ·氢化可的松 | 第47页 |
| ·30 g/L 谷氨酰胺 | 第47页 |
| ·抗生素 | 第47页 |
| ·缓冲液 | 第47页 |
| ·消化液 | 第47-48页 |
| ·免疫荧光细胞化学试剂 | 第48页 |
| ·主要仪器设备 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-52页 |
| ·4 种完全培养液的准备 | 第48-49页 |
| ·鸡气管黏膜上皮细胞的分离 | 第49页 |
| ·鸡气管黏膜上皮细胞的单独培养 | 第49页 |
| ·小白鼠、兔子、猪气管黏膜上皮细胞的分离与培养 | 第49-50页 |
| ·气管黏膜上皮细胞生长曲线的测定 | 第50页 |
| ·鸡胚成纤维细胞分离培养及共培养培养液选择 | 第50-51页 |
| ·鸡气管黏膜上皮细胞与鸡胚成纤维细胞共培养体系的建立 | 第51-52页 |
| ·气管上皮细胞角蛋白8 和18 相关抗原鉴定 | 第52页 |
| ·结果 | 第52-58页 |
| ·单独培养的鸡气管黏膜上皮细胞形态和生长特征 | 第52页 |
| ·兔子、小鼠、猪气管上皮细胞形态和生长特征 | 第52-53页 |
| ·上皮细胞生长曲线的测定 | 第53页 |
| ·鸡胚成纤维细胞形态和生长特征 | 第53-55页 |
| ·共培养的鸡气管黏膜上皮细胞形态和生长特征 | 第55页 |
| ·共培养对鸡气管黏膜上皮细胞增殖和细胞活力的影响 | 第55页 |
| ·鸡气管上皮细胞的鉴定结果 | 第55-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·共培养体系中细胞类型与培养液的选择 | 第58页 |
| ·提高气管上皮细胞贴壁增殖应注意的事项 | 第58-59页 |
| ·CTECs 分离和纯化应注意的问题 | 第59页 |
| ·原代细胞消化酶和血清的选择 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 第四章 鸡气管黏膜上皮细胞气液界面共培养体系的建立 | 第61-73页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·主要试剂 | 第61-62页 |
| ·主要仪器设备 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-65页 |
| ·鸡气管黏膜上皮细胞气液界面共培养 | 第62-63页 |
| ·气管上皮细胞生长曲线的测定 | 第63页 |
| ·气管黏膜上皮细胞电镜观察和组织切片观察 | 第63-65页 |
| ·结果 | 第65-70页 |
| ·气管黏膜上皮细胞生长状态和形态特征 | 第65页 |
| ·气管黏膜上皮细胞生长曲线 | 第65页 |
| ·气管黏膜上皮电子显微镜观察 | 第65-69页 |
| ·气管黏膜上皮组织切片染色观察 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·气液界面培养条件的优化 | 第70页 |
| ·气液界面共培养体系中的血清选择 | 第70页 |
| ·套皿支持膜的包被 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 第五章 鸡传染性支气管炎病毒致鸡气管黏膜上皮细胞病变作用的研究 | 第73-85页 |
| ·主要材料 | 第73-74页 |
| ·IBV 毒株与阳性血清 | 第73页 |
| ·实验动物 | 第73页 |
| ·鸡气管黏膜上皮细胞与鸡胚成纤维细胞共培养体系 | 第73-74页 |
| ·引物设计 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74页 |
| ·主要仪器 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-76页 |
| ·鸡气管黏膜上皮细胞无IBV 内源性污染的鉴定 | 第74页 |
| ·病毒的复壮及收获 | 第74页 |
| ·接毒及光镜观察 | 第74页 |
| ·接毒细胞透射电镜观察 | 第74-75页 |
| ·RT-PCR 检测接毒细胞中IBV | 第75-76页 |
| ·IBV CTECs 细胞毒对鸡胚致病性的检测 | 第76页 |
| ·结果 | 第76-82页 |
| ·鸡气管黏膜上皮细胞IBV 内源性污染检测 | 第76页 |
| ·光镜观察接毒气管上皮细胞形态特征 | 第76页 |
| ·接毒CTECs 透射电镜观察细胞病理变化 | 第76-80页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第80-81页 |
| ·IBV 气管上皮细胞毒对鸡胚致病性的检测 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| ·CTECs 对IBV 敏感性很高 | 第82-83页 |
| ·不同组织嗜性IBV 均致CTECs 病变 | 第83页 |
| ·小结 | 第83-85页 |
| 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-100页 |
| 缩略词 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简介 | 第103页 |
