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BLG调控区指导hLF基因在GMECs、SP2/0和杂交瘤细胞中表达的研究

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略词第12-13页
第一章 文献综述第13-24页
 1 动物细胞表达系统第13-15页
   ·哺乳动物细胞表达系统第13-15页
 2 乳腺特异性表达载体的研究第15-19页
   ·顺式作用元件第15-16页
   ·反式作用因子第16-17页
   ·应用乳蛋白基因构建乳腺生物反应器表达载体第17-19页
 3 乳铁蛋白的作用机制第19-22页
   ·抗菌性过去的很多研究都证明了LfcinH 和LfcinB 在体外的抗菌活性第20-21页
   ·抗真菌活性和抗寄生虫活性第21页
   ·抗病毒活性第21-22页
   ·免疫调控作用第22页
 4 LFCIN 的转基因研究进展第22-24页
第二章 奶山羊乳腺上皮细胞的培养第24-33页
 1 材料与方法第24-27页
   ·材料第24-25页
   ·方法第25-27页
 2 结果第27-31页
   ·奶山羊乳腺上皮细胞的原代培养第27页
   ·奶山羊乳腺上皮细胞的纯化与传代第27-30页
   ·细胞生长曲线第30-31页
   ·细胞的贴壁率第31页
 3 讨论第31-33页
第三章 人乳铁蛋白基因电转染山羊乳腺第33-41页
 1 材料与方法第33-37页
   ·材料第33-34页
   ·方法第34-37页
 2 结果第37-39页
   ·细胞转染第37-38页
   ·抗性细胞株的诱导表达及检测第38-39页
 3 讨论第39-41页
   ·细胞的电转染第39页
   ·DNA 浓度与质量第39页
   ·G418 的筛选第39-40页
   ·单细胞株的获得第40页
   ·诱导表达第40-41页
第四章 人乳铁蛋白基因电转染SP2/0 细胞克隆的获得第41-49页
 1 材料与方法第41-44页
   ·材料第41页
   ·方法第41-44页
 2 结果第44-47页
   ·电脉冲参数的优化第44-45页
   ·单克隆细胞株的建立第45-46页
   ·转染细胞DNA 的PCR 检测第46-47页
   ·转染DNA 后的细胞上清液的蛋白质表达检测第47页
 3 讨论第47-49页
   ·细胞大小、类型和生长阶段第47-48页
   ·SP2/0 的运用第48-49页
第五章 表达人乳铁蛋白的杂交瘤细胞株的建立第49-57页
 1 材料与方法第49-50页
   ·材料第49-50页
 2 方法第50-52页
   ·骨髓瘤细胞的准备第50页
   ·脾脏淋巴细胞的准备第50页
   ·饲养细胞的制备第50-51页
   ·细胞融合第51-52页
   ·细胞株的PCR 检测(同上)第52页
   ·阳性细胞的ELISA 检测第52页
 3 结果第52-55页
   ·杂交瘤细胞观察及换液第52-54页
   ·融合细胞DNA 的PCR 检测第54-55页
   ·杂交瘤细胞上清液的蛋白质表达检测.如图3-2第55页
 4 讨论第55-57页
   ·淋巴细胞杂交瘤技术第55-56页
   ·骨髓瘤细胞的状态第56页
   ·HAT 筛选的原理第56-57页
结论第57-58页
参考文献第58-67页
致谢第67页

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