中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略词 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
1 动物细胞表达系统 | 第13-15页 |
·哺乳动物细胞表达系统 | 第13-15页 |
2 乳腺特异性表达载体的研究 | 第15-19页 |
·顺式作用元件 | 第15-16页 |
·反式作用因子 | 第16-17页 |
·应用乳蛋白基因构建乳腺生物反应器表达载体 | 第17-19页 |
3 乳铁蛋白的作用机制 | 第19-22页 |
·抗菌性过去的很多研究都证明了LfcinH 和LfcinB 在体外的抗菌活性 | 第20-21页 |
·抗真菌活性和抗寄生虫活性 | 第21页 |
·抗病毒活性 | 第21-22页 |
·免疫调控作用 | 第22页 |
4 LFCIN 的转基因研究进展 | 第22-24页 |
第二章 奶山羊乳腺上皮细胞的培养 | 第24-33页 |
1 材料与方法 | 第24-27页 |
·材料 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-27页 |
2 结果 | 第27-31页 |
·奶山羊乳腺上皮细胞的原代培养 | 第27页 |
·奶山羊乳腺上皮细胞的纯化与传代 | 第27-30页 |
·细胞生长曲线 | 第30-31页 |
·细胞的贴壁率 | 第31页 |
3 讨论 | 第31-33页 |
第三章 人乳铁蛋白基因电转染山羊乳腺 | 第33-41页 |
1 材料与方法 | 第33-37页 |
·材料 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-37页 |
2 结果 | 第37-39页 |
·细胞转染 | 第37-38页 |
·抗性细胞株的诱导表达及检测 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
·细胞的电转染 | 第39页 |
·DNA 浓度与质量 | 第39页 |
·G418 的筛选 | 第39-40页 |
·单细胞株的获得 | 第40页 |
·诱导表达 | 第40-41页 |
第四章 人乳铁蛋白基因电转染SP2/0 细胞克隆的获得 | 第41-49页 |
1 材料与方法 | 第41-44页 |
·材料 | 第41页 |
·方法 | 第41-44页 |
2 结果 | 第44-47页 |
·电脉冲参数的优化 | 第44-45页 |
·单克隆细胞株的建立 | 第45-46页 |
·转染细胞DNA 的PCR 检测 | 第46-47页 |
·转染DNA 后的细胞上清液的蛋白质表达检测 | 第47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
·细胞大小、类型和生长阶段 | 第47-48页 |
·SP2/0 的运用 | 第48-49页 |
第五章 表达人乳铁蛋白的杂交瘤细胞株的建立 | 第49-57页 |
1 材料与方法 | 第49-50页 |
·材料 | 第49-50页 |
2 方法 | 第50-52页 |
·骨髓瘤细胞的准备 | 第50页 |
·脾脏淋巴细胞的准备 | 第50页 |
·饲养细胞的制备 | 第50-51页 |
·细胞融合 | 第51-52页 |
·细胞株的PCR 检测(同上) | 第52页 |
·阳性细胞的ELISA 检测 | 第52页 |
3 结果 | 第52-55页 |
·杂交瘤细胞观察及换液 | 第52-54页 |
·融合细胞DNA 的PCR 检测 | 第54-55页 |
·杂交瘤细胞上清液的蛋白质表达检测.如图3-2 | 第55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
·淋巴细胞杂交瘤技术 | 第55-56页 |
·骨髓瘤细胞的状态 | 第56页 |
·HAT 筛选的原理 | 第56-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
致谢 | 第67页 |