| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 前言 | 第10-23页 |
| 1 FSH 的研究进展 | 第10-15页 |
| ·FSH 的生物学功能 | 第11-12页 |
| ·FSH 的来源 | 第12-13页 |
| ·重组 FSH 的长效表达研究 | 第13-15页 |
| 2 囊泡法用于转染的可行性分析 | 第15-20页 |
| ·转染方法的选择 | 第15-16页 |
| ·囊泡的结构研究与应用基础 | 第16-19页 |
| ·囊泡的制备方法与转染机理 | 第19-20页 |
| ·囊泡转染的影响因素 | 第20页 |
| 3 增强型绿色荧光蛋白的功能背景 | 第20-21页 |
| 4 实验基础与研究意义 | 第21-23页 |
| 材料和方法 | 第23-37页 |
| 1 材料 | 第23-26页 |
| ·质粒、菌株和主要试剂 | 第23页 |
| ·培养基与常用溶液配方 | 第23-25页 |
| ·主要实验仪器 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-37页 |
| ·酵母表达载体pPIC9K/FSHβ-CTP-α的鉴定与线性化处理 | 第26-27页 |
| ·囊泡的制备与性质分析 | 第27-28页 |
| ·囊泡法转染巴斯德毕赤酵母 | 第28-29页 |
| ·巴斯德毕赤酵母中阳性菌落的筛选与鉴定 | 第29-30页 |
| ·巴斯德毕赤酵母阳性菌落的生长与诱导表达 | 第30-31页 |
| ·目的蛋白表达产物的检测 | 第31-32页 |
| ·EGFP 与目的蛋白FSH 的共表达载体的构建 | 第32-36页 |
| ·共表达载体转染巴斯德毕赤酵母 | 第36-37页 |
| 结果 | 第37-54页 |
| 1 囊泡法转染质粒pPIC9K / FSHβ-CTP-α的表达 | 第37-48页 |
| ·质粒pPIC9K / FSHβ-CTP-α的提取与单酶切鉴定 | 第37页 |
| ·囊泡制备与性质分析 | 第37-44页 |
| ·阳性菌落的表型判定与筛选 | 第44页 |
| ·阳性菌落的鉴定 | 第44-45页 |
| ·巴斯德毕赤酵母阳性菌落的诱导表达与检测 | 第45-48页 |
| 2 融合质粒pPIC9K/EGFP-FSHβ-CTP-α的构建与表达 | 第48-54页 |
| ·报告基因 EGFP 的PCR 扩增 | 第48页 |
| ·表达载体pPIC9K/EFC 的构建和鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·共表达载体在巴斯德毕赤酵母中的G418 筛选 | 第49-50页 |
| ·EGFP 在巴斯德毕赤酵母中的表达 | 第50-51页 |
| ·pPIC9K/EFC 中目的基因的表达检测 | 第51-54页 |
| 讨论 | 第54-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第73页 |
