| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 文献综述 HOK/SOK 解离后致死系统研究进展 | 第14-34页 |
| 1 稳定性基因hok/sok 的结构特点 | 第15-16页 |
| 2 稳定性基因hok/sok 在肠道菌染色体上的分布 | 第16-17页 |
| 3 hok/sok 解离后致死系统作用机制 | 第17-20页 |
| 4 hok/sok 类基因家族 | 第20-21页 |
| 5 hok/sok 解离后致死系统的应用 | 第21-25页 |
| ·质粒系统的稳定性 | 第21-22页 |
| ·抗菌性 | 第22-23页 |
| ·T4 噬菌体的排斥性 | 第23-25页 |
| 6 hok/sok 解离后致死系统应用前景展望 | 第25页 |
| 参考文献 | 第25-34页 |
| 研究一 重组质粒PACYC184-HOK/SOK 和 PACYC184-HOK/SOK(M)的构建 | 第34-53页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| ·菌株与质粒 | 第35页 |
| ·培养基和主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-46页 |
| ·PCR 引物的设计 | 第36-37页 |
| ·重组质粒pACYC184-hok/sok 的构建及鉴定 | 第37-44页 |
| ·hok/sok 目的基因片段的获得 | 第37-40页 |
| ·煮沸法制备PCR 模板 | 第37-38页 |
| ·hok/sok PCR 产物的制备及纯化 | 第38页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第38页 |
| ·PCR 纯化产物与pGEM-T Vector 连接转化 | 第38-39页 |
| ·pGEM-hok/sok 的鉴定 | 第39页 |
| ·重组质粒pGEM-hok/sok 双酶切得到hok/sok 目的片段 | 第39-40页 |
| ·pACYC184 载体片段的获得 | 第40-42页 |
| ·提取质粒DNA | 第40-41页 |
| ·质粒DNA BamH I 酶切 | 第41页 |
| ·酶切产物去磷酸化 | 第41-42页 |
| ·重组质粒pACYC184-hok/sok 的构建策略 | 第42页 |
| ·目的片段与载体片段的连接转化 | 第42-43页 |
| ·重组质粒pACYC184-hok/sok 的鉴定 | 第43-44页 |
| ·PCR 扩增 | 第43页 |
| ·酶切鉴定 | 第43页 |
| ·测序鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组质粒pACYC184-hok/sok（M）的构建及鉴定 | 第44-46页 |
| ·构建策略 | 第44页 |
| ·长片段PCR 产物的制备和纯化 | 第44-45页 |
| ·长片段PCR 产物与T 载体连接 | 第45页 |
| ·目的基因长片段自连成环 | 第45-46页 |
| ·重组质粒pACYC184-hok/sok（M）的鉴定 | 第46页 |
| 3 结果 | 第46-49页 |
| ·hok/sok PCR 产物的制备 | 第46页 |
| ·重组质粒pACYC184-hok/sok 的鉴定 | 第46-47页 |
| ·长片段PCR 产物的制备 | 第47-48页 |
| ·重组质粒pACYC184-hok/sok（M）的鉴定 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 研究二 重组质粒PACYC184-HOK/SOK 的质粒稳定性分析 | 第53-68页 |
| 1 材料 | 第55-56页 |
| ·质粒与菌株 | 第55页 |
| ·LB 琼脂板和Cm 抗性LB 琼脂板的制备 | 第55页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第55-56页 |
| 2 方法 | 第56-58页 |
| ·菌落形态观察 | 第56页 |
| ·质粒分离稳定性的测定方法 | 第56-57页 |
| ·酶切鉴定 | 第57页 |
| ·生长曲线的测定 | 第57-58页 |
| 3 结果 | 第58-62页 |
| ·菌落形态观察 | 第58页 |
| ·质粒分离稳定性的测定 | 第58-60页 |
| ·酶切鉴定 | 第60-61页 |
| ·生长曲线的测定 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| ·重组质粒pACYC184-hok/sok 的分离稳定性 | 第63-64页 |
| ·酶切鉴定 | 第64-65页 |
| ·hok/sok 基因对于宿主细胞生长的影响 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第69页 |
