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脑膜炎大肠杆菌的IbeA诱导多形核细粒细胞穿越血脑屏障的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
英文缩略词表第13-14页
第一章 绪论第14-34页
   ·新生儿细菌性脑膜炎的研究进展第14-16页
     ·病理生理学特征第14-15页
     ·细菌性脑膜炎病理机制的研究进展第15-16页
   ·多核白细胞跨内皮迁移的研究进展第16-23页
     ·细胞跨内皮迁移研究的概述第16-17页
     ·细胞跨内皮迁移与一些疾病的发生及发展的关系第17-18页
     ·细胞跨内皮迁移的方式第18-19页
     ·细胞跨内皮迁移的机制第19-20页
     ·白细胞跨内皮迁移的研究进展第20-23页
   ·中间纤维波形蛋白的结构和功能第23-27页
     ·中间纤维蛋白概述第23-26页
     ·波形蛋白和神经胶质酸性蛋白第26-27页
     ·波形蛋白的功能和作用第27页
   ·脂阀及其在脑膜炎性大肠杆菌引起的白细胞迁移中的作用第27-31页
     ·脂阀概述第27-29页
     ·脂筏与细菌相互作用第29-30页
     ·脂筏与细菌毒素第30-31页
     ·脂筏参与病毒入胞过程第31页
   ·立题依据和主要研究内容第31-34页
     ·立题依据第31-33页
     ·主要研究内容第33-34页
第二章 IbeA 在脑膜炎性细菌引起的 PMN 迁移中的作用第34-54页
   ·材料与方法第35-43页
     ·菌种和细胞及主要试剂第35页
     ·实验器材和实验耗材第35-36页
     ·细菌培养第36页
     ·细胞培养第36-39页
     ·多核白细胞跨内皮迁移的体外实验第39-40页
     ·感受态细胞制备和电转化第40页
     ·His-IbeA 蛋白的表达与纯化第40-41页
     ·ibeA 基因在脑膜炎性大肠杆菌引起的白细胞跨越血脑屏障的体内动物实验第41-42页
     ·IbeA 包被的 beads 及大肠杆菌之间的相互作用第42-43页
   ·结果与分析第43-51页
     ·大肠杆菌 K1 菌株引起的 PMN 与 BMEC 的相互作用第43-44页
     ·纯化的 IbeA 蛋白引起的 PMN 与 BMEC 的相互作用第44-47页
     ·IbeA 蛋白足以诱导体外的 PMN 跨脑部微血管内皮细胞迁移第47-48页
     ·IbeA 蛋白诱导体内的 PMN 跨脑内皮迁移现象第48-50页
     ·条件培养基对 PMN 跨内皮迁移的效应第50-51页
   ·本章小结第51-54页
第三章 波形蛋白在脑膜炎性大肠杆菌 K1 菌株引起多核白细胞跨内皮迁移中的作用第54-68页
   ·材料与方法第55-60页
     ·菌种、细胞及主要试剂第55页
     ·实验仪器与耗材第55-56页
     ·大肠杆菌菌株第56页
     ·Western Blotting 杂交第56-57页
     ·PMN 迁移体外实验第57-58页
     ·Lentivirus 慢病毒转染人 BMECs第58-59页
     ·人 BMEC 中慢病毒介导的波形蛋白过表达第59页
     ·免疫荧光与共聚焦显微分析第59-60页
   ·结果与分析第60-66页
     ·波形蛋白断裂抑制了 IbeA 诱导的 PMN 跨内皮迁移第60-62页
     ·BMEC 波形蛋白过量表达对 PMN 穿脑内皮迁移的效应第62-64页
     ·PMN 通过 BMEC 的跨细胞迁移是由波形蛋白介导的第64-66页
   ·本章小结第66-68页
第四章 脑膜炎性大肠杆菌诱导多核白细胞跨 BMEC 迁移的路径探索第68-86页
   ·材料与方法第69-73页
     ·菌种、细胞及主要试剂第69-70页
     ·实验仪器与耗材第70页
     ·大肠杆菌菌株第70页
     ·Western Blotting 杂交第70-71页
     ·内皮细胞粘附分子表达的免疫印迹分析第71-72页
     ·人 BMEC 中慢病毒介导的波形蛋白过表达与头部区域缺失表达第72-73页
     ·PMN 体外迁移实验第73页
     ·免疫荧光观察与数据统计第73页
   ·结果与分析第73-83页
     ·脑膜炎性大肠杆菌诱导内皮细胞粘附分子表达第73-74页
     ·IbeA 蛋白诱导内皮细胞粘附分子表达第74-77页
     ·BMEC 波形蛋白对内皮细胞上粘附分子表达的效应第77-80页
     ·脂阀在 ibeA+的大肠杆菌诱导的 PMN 跨 BMEC 迁移中的作用第80-83页
   ·本章小结第83-86页
第五章 IbeA 蛋白引起白细胞迁移的功能性片段初步鉴定第86-100页
   ·材料与方法第86-95页
     ·菌种与细胞第86-87页
     ·质粒与载体第87页
     ·工具酶及主要试剂第87页
     ·实验仪器与耗材第87-88页
     ·原核表达载体的构建第88-92页
     ·融合蛋白的诱导表达与纯化第92-95页
   ·结果与分析第95-99页
     ·IbeA 蛋白的生物信息学分析第95-97页
     ·PCR 目的片段扩增第97页
     ·融合蛋白的诱导表达与纯化第97-98页
     ·IbeA 片段蛋白的功能鉴定第98-99页
   ·本章小结第99-100页
结论与展望第100-102页
 结论第100页
 论文创新之处第100-101页
 展望第101-102页
参考文献第102-118页
攻读博士学位期间取得的研究成果第118-120页
致谢第120-121页
答辩委员会对论文的评定意见第121页

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