内容提要 | 第1-8页 |
第1章 前言 | 第8-23页 |
·基质金属蛋白酶(MMPs) | 第8-18页 |
·基质金属蛋白酶的结构 | 第8-9页 |
·基质金属蛋白酶的分类 | 第9-10页 |
·基质金属蛋白酶的底物 | 第10-11页 |
·基质金属蛋白酶的活性调控 | 第11-13页 |
·基质金属蛋白酶的功能 | 第13-14页 |
·MMP-26 简介 | 第14-18页 |
·外源蛋白的原核表达 | 第18-19页 |
·外源蛋白表达系统简介 | 第18页 |
·活性蛋白的检测 | 第18-19页 |
·外源蛋白的真核表达 | 第19-22页 |
·转染技术简介 | 第20-22页 |
·本论文的研究目的和策略 | 第22-23页 |
第2章 MMP-26 在原核细胞中的表达、纯化以及复性 | 第23-37页 |
·实验材料 | 第23-28页 |
·实验仪器 | 第23页 |
·实验耗材 | 第23-24页 |
·实验菌株 | 第24页 |
·实验工作液 | 第24-28页 |
·方法 | 第28-31页 |
·包涵体的表达与纯化 | 第28-29页 |
·MMP-26 活力检测 | 第29-30页 |
·Western-blotting 检测 | 第30-31页 |
·结果与讨论 | 第31-36页 |
·MMP-26 包涵体的诱导表达 | 第31页 |
·包涵体的纯化和复性 | 第31-33页 |
·酶活的检测 | 第33-35页 |
·Western-blotting 检测 | 第35-36页 |
·小结 | 第36-37页 |
第3章 MMP-26 真核表达质粒的构建以及在哺乳动物细胞中的表达 | 第37-56页 |
·实验材料 | 第37-40页 |
·实验主要仪器 | 第37页 |
·实验耗材 | 第37-38页 |
·实验用细菌株、细胞株 | 第38页 |
·实验工作液 | 第38-40页 |
·实验方法 | 第40-47页 |
·构建PCS-MMP26-MYC 克隆载体 | 第40-43页 |
·构建pcDNA3.1-MMP26-MYC 克隆载体 | 第43页 |
·瞬时和稳定转染MMP26 质粒到哺乳动物细胞中 | 第43-44页 |
·RT-PCR 检测MMP-26 的表达 | 第44-46页 |
·细胞免疫荧光检测MMP-26 表达 | 第46页 |
·Western-blotting 检测MMP-26 的表达 | 第46-47页 |
·结果与讨论 | 第47-56页 |
·MMP-26 真核表达载体的构建 | 第47-48页 |
·MMP-26 在COS-7 中表达的检测 | 第48-55页 |
·小结 | 第55-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
中文摘要 | 第66-68页 |
Abstract | 第68-70页 |