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人溶菌酶基因hLYZ在毕赤酵母及小鼠乳腺中的表达及其生物活性研究

提要第1-10页
前言第10-11页
第一篇 文献综述第11-21页
 第1章 溶菌酶的研究进展第11-17页
   ·溶菌酶的一般性质第11-12页
   ·溶菌酶的分类第12-13页
   ·溶菌酶的作用机制第13-14页
     ·溶菌酶的抗细菌作用及机制第13页
     ·溶菌酶的抗肿瘤作用及机制第13-14页
     ·溶菌酶的抗病毒作用及机制第14页
   ·溶菌酶基因的表达第14-15页
   ·溶菌酶的活性检测第15页
   ·溶菌酶的应用前景第15-17页
 第2章 溶菌酶的基因工程研究进展第17-21页
   ·溶菌酶的基因工程菌制备第17-20页
     ·大肠杆菌表达系统第17-18页
     ·真核表达系统第18-20页
   ·溶菌酶基因工程在改良动植物方面的应用第20页
   ·溶菌酶基因工程存在的问题第20-21页
第二篇 研究内容第21-63页
 第1章 人溶菌酶基因hLYZ 的克隆和序列分析第21-32页
   ·材料和方法第21-26页
     ·材料第21-23页
     ·方法第23-26页
   ·结果第26-30页
     ·人溶菌酶基因的克隆第26-29页
     ·人溶菌酶基因hLYZ 的序列测定及分析第29-30页
   ·讨论第30-31页
     ·人溶菌酶基因的提取第30页
     ·溶菌酶的结构与生物活性的关系第30-31页
   ·小结第31-32页
 第2章 人溶菌酶基因hLYZ 在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性第32-50页
   ·材料与方法第32-39页
     ·材料第32-34页
     ·方法第34-39页
   ·结果第39-48页
     ·目的基因的PCR 扩增第39-40页
     ·重组质粒pPIC9K-hLYZ 的鉴定第40-41页
     ·重组质粒pPIC9K-hLYZ 的线性化第41-42页
     ·阳性酵母菌落的筛选第42-44页
     ·重组人溶菌酶的检测第44-46页
     ·重组人溶菌酶的抗菌活性第46-48页
   ·讨论第48-49页
     ·人溶菌酶基因hLYZ 在毕赤酵母中的表达第48页
     ·表达载体的选择第48页
     ·毕赤酵母阳性克隆的筛选第48-49页
     ·甲醇的诱导作用第49页
     ·表达蛋白的活性第49页
   ·小结第49-50页
 第3章 人溶菌酶基因hLYZ 在小鼠乳腺中的表达及其抗菌活性第50-63页
   ·材料与方法第50-54页
     ·材料第50-51页
     ·方法第51-54页
   ·结果第54-61页
     ·目的基因的PCR 扩增结果第54页
     ·重组质粒pcDNA3.1-hLYZ 的鉴定第54-55页
     ·真核表达载体pcDNA3.1-hLYZ 测序结果第55-56页
     ·RT-PCR 检测pcDNA3.1-hLYZ 在小鼠乳腺中的表达第56页
     ·乳汁中hLYZ 的SDS-PAGE 和Western bloting 检测第56-57页
     ·乳腺组织免疫组化检测蛋白表达第57-58页
     ·小鼠乳汁中人溶菌酶的体外抑菌活性的检测第58-61页
   ·讨论第61-62页
     ·人溶菌酶在动物体内的表达第61页
     ·免疫组化实验检测第61页
     ·表达产物的活性检测第61-62页
   ·小结第62-63页
结论第63-64页
参考文献第64-70页
详细摘要第70-72页
Abstract第72-74页
致谢第74-75页
导师及作者简介第75页

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