提要 | 第1-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-21页 |
第1章 溶菌酶的研究进展 | 第11-17页 |
·溶菌酶的一般性质 | 第11-12页 |
·溶菌酶的分类 | 第12-13页 |
·溶菌酶的作用机制 | 第13-14页 |
·溶菌酶的抗细菌作用及机制 | 第13页 |
·溶菌酶的抗肿瘤作用及机制 | 第13-14页 |
·溶菌酶的抗病毒作用及机制 | 第14页 |
·溶菌酶基因的表达 | 第14-15页 |
·溶菌酶的活性检测 | 第15页 |
·溶菌酶的应用前景 | 第15-17页 |
第2章 溶菌酶的基因工程研究进展 | 第17-21页 |
·溶菌酶的基因工程菌制备 | 第17-20页 |
·大肠杆菌表达系统 | 第17-18页 |
·真核表达系统 | 第18-20页 |
·溶菌酶基因工程在改良动植物方面的应用 | 第20页 |
·溶菌酶基因工程存在的问题 | 第20-21页 |
第二篇 研究内容 | 第21-63页 |
第1章 人溶菌酶基因hLYZ 的克隆和序列分析 | 第21-32页 |
·材料和方法 | 第21-26页 |
·材料 | 第21-23页 |
·方法 | 第23-26页 |
·结果 | 第26-30页 |
·人溶菌酶基因的克隆 | 第26-29页 |
·人溶菌酶基因hLYZ 的序列测定及分析 | 第29-30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
·人溶菌酶基因的提取 | 第30页 |
·溶菌酶的结构与生物活性的关系 | 第30-31页 |
·小结 | 第31-32页 |
第2章 人溶菌酶基因hLYZ 在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性 | 第32-50页 |
·材料与方法 | 第32-39页 |
·材料 | 第32-34页 |
·方法 | 第34-39页 |
·结果 | 第39-48页 |
·目的基因的PCR 扩增 | 第39-40页 |
·重组质粒pPIC9K-hLYZ 的鉴定 | 第40-41页 |
·重组质粒pPIC9K-hLYZ 的线性化 | 第41-42页 |
·阳性酵母菌落的筛选 | 第42-44页 |
·重组人溶菌酶的检测 | 第44-46页 |
·重组人溶菌酶的抗菌活性 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·人溶菌酶基因hLYZ 在毕赤酵母中的表达 | 第48页 |
·表达载体的选择 | 第48页 |
·毕赤酵母阳性克隆的筛选 | 第48-49页 |
·甲醇的诱导作用 | 第49页 |
·表达蛋白的活性 | 第49页 |
·小结 | 第49-50页 |
第3章 人溶菌酶基因hLYZ 在小鼠乳腺中的表达及其抗菌活性 | 第50-63页 |
·材料与方法 | 第50-54页 |
·材料 | 第50-51页 |
·方法 | 第51-54页 |
·结果 | 第54-61页 |
·目的基因的PCR 扩增结果 | 第54页 |
·重组质粒pcDNA3.1-hLYZ 的鉴定 | 第54-55页 |
·真核表达载体pcDNA3.1-hLYZ 测序结果 | 第55-56页 |
·RT-PCR 检测pcDNA3.1-hLYZ 在小鼠乳腺中的表达 | 第56页 |
·乳汁中hLYZ 的SDS-PAGE 和Western bloting 检测 | 第56-57页 |
·乳腺组织免疫组化检测蛋白表达 | 第57-58页 |
·小鼠乳汁中人溶菌酶的体外抑菌活性的检测 | 第58-61页 |
·讨论 | 第61-62页 |
·人溶菌酶在动物体内的表达 | 第61页 |
·免疫组化实验检测 | 第61页 |
·表达产物的活性检测 | 第61-62页 |
·小结 | 第62-63页 |
结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
详细摘要 | 第70-72页 |
Abstract | 第72-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
导师及作者简介 | 第75页 |