摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第11-13页 |
第1章 文献综述 | 第13-34页 |
·猪繁殖与呼吸综合征 | 第13页 |
·PRRS的危害及流行病学特点 | 第13-14页 |
·PRRSV病原特性 | 第14-17页 |
·PRRSV的分类 | 第14页 |
·PRRSV的理化学特性 | 第14-15页 |
·PRRSV的抗原性 | 第15页 |
·PRRSV的致病机理及生物学特性 | 第15-17页 |
·PRRSV分子生物学研究进展 | 第17-24页 |
·PRRSV基因组的结构与功能 | 第17-19页 |
·PRRSV的蛋白质 | 第19-23页 |
·PRRSV的基因组变异和 RNA重组 | 第23-24页 |
·PRRSV的抗原性变异 | 第24页 |
·PRRSV的毒力变异 | 第24页 |
·PRRSV的免疫学反应 | 第24-29页 |
·抗 PRRSV的体液免疫反应 | 第25-27页 |
·抗 PRRSV的细胞免疫反应 | 第27-28页 |
·PRRSV与免疫抑制 | 第28-29页 |
·PRRSV与猪肺泡巨噬细胞 | 第29页 |
·基因芯片的技术背景、工作原理及技术流程 | 第29-32页 |
·生物芯片的技术背景 | 第29-30页 |
·基因芯片的工作原理 | 第30-32页 |
·Affymetrix基因芯片系统简介 | 第32-34页 |
第2章 研究目的与意义 | 第34-35页 |
第3章 材料与方法 | 第35-50页 |
·试验材料 | 第35-37页 |
·试验动物、细胞与毒株 | 第35页 |
·工具酶及主要试剂 | 第35-36页 |
·基因芯片 | 第36页 |
·培养基与抗生素及其配制 | 第36页 |
·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第36-37页 |
·试验方法 | 第37-50页 |
·支气管肺泡灌洗和肺泡巨噬细胞的获取 | 第37页 |
·总 RNA的提取和纯化 | 第37-39页 |
·cDNA的合成和纯化 | 第39-41页 |
·cRNA的合成和纯化 | 第41-42页 |
·cRNA片段化、配制杂交液 | 第42-43页 |
·芯片杂交 | 第43页 |
·洗脱芯片 | 第43页 |
·扫描芯片 | 第43页 |
·数据分析 | 第43-44页 |
·PRRSV的增殖,复壮与感染 | 第44-45页 |
·半数细胞培养物感染量(TCID_(50))的测定 | 第45页 |
·细胞、感染病毒的细胞样品、血清或组织的病毒总 RNA的提取 | 第45页 |
·PRRSV的RT-PCR检测 | 第45-46页 |
·实时荧光定量 PCR验证芯片的结果 | 第46-47页 |
·统计学方法 | 第47页 |
·基因芯片的操作系统设备,流程及示意图 | 第47-50页 |
第4章 结果与分析 | 第50-92页 |
·筛选 PRRSV阴性猪肺泡巨噬细胞 | 第50页 |
·RNA样品质量控制 | 第50-51页 |
·芯片杂交质量控制及扫描图谱 | 第51-53页 |
·芯片结果的散点图 | 第53-55页 |
·筛选差异表达基因 | 第55-56页 |
·芯片差异表达基因归类 | 第56-57页 |
·显著差异表达的已知基因 | 第57-74页 |
·各类基因表达情况分类分析 | 第74-85页 |
·芯片中IFN相关基因的表达情况 | 第74页 |
·芯片中干扰素效应基因的表达情况 | 第74-75页 |
·芯片中干扰素信号基因的表达情况 | 第75-76页 |
·芯片中白介素相关基因表达情况 | 第76-78页 |
·芯片中TLR相关基因的表达情况 | 第78-79页 |
·趋化因子相关基因的表达情况 | 第79-81页 |
·CD分子相关基因的表达情况 | 第81-83页 |
·热效应蛋白相关基因表达情况 | 第83-85页 |
·RT-PCR验证结果和数据分析 | 第85-87页 |
·Genmapp软件对基因芯片中差异表达基因的Pathway分析 | 第87页 |
·猪肺泡巨噬细胞感染PRRS病毒后趋化因子表达情况差异研究 | 第87-92页 |
·CC趋化因子家族 | 第88-89页 |
·CXC趋化因子家族 | 第89-90页 |
·CX3C趋化因子家族 | 第90-92页 |
第5章 讨论与结论 | 第92-97页 |
·讨论 | 第92-96页 |
·结论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-106页 |
致谢 | 第106页 |