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猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ基因的表达及其单克隆抗体的制备

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略词(Abbreviation)第10-12页
1 前言第12-23页
   ·文献综述第12-22页
     ·肉类食品安全问题的国内外现状第12-15页
     ·动物肉种类鉴别方法研究进展第15-22页
   ·研究目的与意义第22-23页
2 材料与方法第23-38页
   ·实验材料第23-25页
     ·载体及菌株第23-24页
     ·酶及主要试剂第24页
     ·主要仪器及器材第24页
     ·实验动物及细胞第24页
     ·肉样第24-25页
   ·实验方法第25-38页
     ·猪骨骼肌TnI-fast/TnI-slow基因的克隆与表达第25-32页
     ·兔抗猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ多克隆抗体的制备第32-33页
     ·抗猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备第33-38页
3 结果与分析第38-59页
   ·猪骨骼肌TnI-fast/TnI-slow基因的克隆与表达的结果与分析第38-50页
     ·TnI-fast基因和TnI-slow基因的RT-PCR扩增结果第38页
     ·TnI-fast基因和TnI-slow基因的克隆与鉴定第38-40页
     ·TnI-slow基因的序列测定与分析第40-43页
     ·重组质粒pKG-TnI-fast、pKG-TnI-slow、pET-32a-TnI-slow的鉴定第43-45页
     ·重组蛋白表达产物的SDS-PAGE分析结果第45-48页
     ·猪耐热蛋白高免血清效价的检测第48页
     ·重组蛋白表达产物的Western-blotting鉴定结果第48-50页
   ·兔抗猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ多克隆抗体的制备结果与分析第50-51页
     ·免疫兔血清效价的测定结果第50页
     ·兔抗TnI-SLOW IgG的纯化结果第50页
     ·兔抗TnI-SLOW IgG纯化的SDS-PAGE结果第50-51页
     ·兔抗TnI-SLOW IgG纯化后的浓度第51页
   ·抗猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备结果与分析第51-59页
     ·抗原(融合蛋白GST-TnI-SLOW)最佳包被浓度的确定第51-52页
     ·免疫小鼠血清效价的测定第52页
     ·阳性克隆的筛选与杂交瘤细胞株的建立第52-53页
     ·杂交瘤细胞染色体分析第53-54页
     ·抗TnI-SLOW蛋白单克隆抗体的纯化第54-55页
     ·抗TnI-SLOW蛋白单克隆抗体腹水效价的测定第55-56页
     ·抗TnI-SLOW蛋白单克隆抗体亲和力分析第56-57页
     ·抗TnI-SLOW蛋白单克隆抗体的验证第57页
     ·单克隆抗体的特异性验证第57-59页
4 讨论第59-62页
   ·目的蛋白的选择第59页
   ·RNA的提取第59页
   ·融合蛋白表达产物的纯化第59-60页
   ·免疫原的制备第60页
   ·细胞融合第60-61页
   ·阳性克隆的筛选第61页
   ·单克隆抗体的特异性试验第61-62页
5 结论第62-63页
参考文献第63-67页
致谢第67页

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