摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
1 前言 | 第15-50页 |
·异三聚体G 蛋白信号转导研究进展 | 第15-28页 |
·哺乳动物异三聚体G 蛋白 | 第15-17页 |
·异三聚体G 蛋白模式 | 第17页 |
·植物异三聚体G 蛋白 | 第17-19页 |
·植物G 蛋白的组成成分 | 第19-21页 |
·植物G 蛋白响应众多信号途径 | 第21-28页 |
·蛋白互作研究进展 | 第28-39页 |
·Gal-4 酵母双杂交 | 第28-30页 |
·酵母单杂交系统 | 第30-31页 |
·酵母三杂交系统 | 第31-33页 |
·酵母四杂交系统 | 第33-34页 |
·逆向双杂交系统 | 第34页 |
·泛素分离系统 | 第34-36页 |
·RRS 和rRRS 酵母双杂交系统 | 第36-39页 |
·拟南芥XBAT 家族基因研究进展 | 第39-42页 |
·N-末端肉豆蔻酰基化 | 第40-41页 |
·锚蛋白重复序列(ANK) | 第41页 |
·拟南芥E3 ligase | 第41-42页 |
·植物先天免疫研究进展 | 第42-49页 |
·植物多层次的防卫反应 | 第43-44页 |
·PAMP 激活的免疫反应 | 第44-45页 |
·毒性病原菌抑制PAMP 激活的免疫反应 | 第45-46页 |
·效应蛋白激活的免疫反应 | 第46-47页 |
·植物先天免疫与动物先天免疫 | 第47页 |
·黄单胞菌与植物互作的研究进展 | 第47-49页 |
·本研究的目的与意义 | 第49-50页 |
2 材料与方法 | 第50-72页 |
·材料 | 第50-52页 |
·植物材料 | 第50页 |
·菌株和质粒 | 第50页 |
·酶和生化试剂 | 第50页 |
·实验引物 | 第50-52页 |
·实验方法 | 第52-72页 |
·拟南芥cDNA 文库的构建 | 第52-57页 |
·Reverse RAS RecruitmentSystem 酵母双杂交 | 第57-61页 |
·互作因子的鉴定 | 第61-69页 |
·植物表达载体的构建与转化 | 第69-70页 |
·拟南芥的培养,转化与筛选 | 第70-71页 |
·病原菌的培养与接种 | 第71页 |
·ABA 处理 | 第71-72页 |
3 结果与分析 | 第72-91页 |
·拟南芥cDNA 文库的构建 | 第72-73页 |
·拟南芥总RNA 的提取 | 第72页 |
·mRNA 的分离 | 第72-73页 |
·cDNA 的合成 | 第73页 |
·cDNA 与pUra 表达载体的连接与转化 | 第73页 |
·Reverse RAS Recruitment System 酵母双杂交 | 第73-76页 |
·Bait 的构建与转化 | 第73-74页 |
·酵母双杂交的初步筛选 | 第74-75页 |
·酵母双杂交的二次筛选 | 第75页 |
·酵母双杂交阳性克隆的鉴定 | 第75-76页 |
·AtXB31 基因的克隆及功能鉴定 | 第76-85页 |
·AtGPA1 推论互作因子AtXB31 的获得 | 第76-77页 |
·AtXB31 基因的克隆 | 第77页 |
·AtXB31 蛋白的二级结构及功能性预测分析 | 第77-78页 |
·XB 家族基因之间的比较分析 | 第78-81页 |
·AtXB31 亚细胞定位 | 第81-82页 |
·RT-PCR 检测AtXB31 的表达 | 第82-83页 |
·正义以及RNAi 转基因植株的鉴定 | 第83-84页 |
·Xcc8004 病原菌接种分析 | 第84-85页 |
·AtXB31 同AtGPA1 体内体外蛋白互作的验证 | 第85-91页 |
·酵母双杂交 | 第85-86页 |
·Pull down | 第86-88页 |
·免疫荧光蛋白互作:BiFC | 第88页 |
·免疫共沉淀:CoIP | 第88-91页 |
4 讨论 | 第91-99页 |
·植物G 蛋白响应众多信号途径 | 第91-93页 |
·反向Ras 拯救恢复系统适合研究植物蛋白互作 | 第93-95页 |
·AtXB31 的结构与功能特征 | 第95-98页 |
·AtXB31 同AtGPA1 体外与体内互作的验证 | 第98页 |
·AtXB31 和AtGPA1 与病原菌Xcc8004 的信号转导 | 第98-99页 |
5 结论 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-116页 |
附录 | 第116-121页 |
致谢 | 第121-122页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第122页 |