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新型HIV-1多肽抑制剂的筛选及作用机理研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第1章 引言第10-29页
   ·概述第10-12页
   ·HIV-1与胞膜蛋白gp41第12-14页
   ·HIV-1 病毒的膜融合机理第14-16页
   ·HIV-1 胞内区性质的研究第16-18页
   ·HIV-1 抑制剂的研究第18-21页
   ·HIV-1 逃脱免疫监视的研究第21-27页
   ·本文的研究目的与内容第27-29页
第2章 LLP1-2 功能区新型功能的鉴定第29-56页
   ·本章引言第29-30页
   ·材料和方法第30-44页
     ·材料第30页
     ·分子构建第30-32页
     ·DNA 的琼脂糖凝胶电泳和胶回收第32-33页
     ·重组质粒的构建第33-34页
     ·重组质粒扩增和鉴定第34-35页
     ·重组蛋白的提取第35-36页
     ·重组蛋白的电泳鉴定第36-38页
     ·抗体的制备与纯化第38-39页
     ·酶联免疫吸附实验(ELISA)第39-41页
     ·圆二色光谱(CD)测定第41页
     ·流式细胞仪检测贴膜活性第41-42页
     ·利用分子筛区分蛋白分子量第42-43页
     ·Western Blotting 检测蛋白样品第43-44页
     ·真核细胞转染荧光定位LLP第44页
   ·结果与讨论第44-54页
     ·LLP1-2 区域的生物信息学分析第44-47页
     ·纯化的LLP 蛋白第47-49页
     ·LLP的多抗的制备第49页
     ·LLP系列蛋白的构象变化第49-50页
     ·LLP 系列蛋白多聚形式的变化第50-52页
     ·LLP 系列蛋白贴膜能力的变化第52-53页
     ·LLP 对于细胞膜融合的影响第53-54页
   ·本章小结第54-56页
第3章 新型抗 HIV 的抑制剂 P20 的筛选和鉴定第56-77页
   ·本章引言第56页
   ·材料和方法第56-60页
     ·材料第56-57页
     ·酵母双杂系统第57页
     ·重组蛋白的表达纯化第57页
     ·ELISA 鉴定多种结合第57-58页
     ·表面基元共振SPR 分析蛋白结合第58页
     ·FN-PAGE 检测P20 对六螺旋的作用第58-59页
     ·抑制合胞体形成实验第59页
     ·流式细胞仪检测蛋白与融合细胞的结合第59-60页
     ·抑制病毒感染第60页
     ·细胞毒性实验第60页
   ·结果与讨论第60-75页
     ·筛选并鉴定P20 多肽第60-62页
     ·P20 结合六螺旋第62-64页
     ·P20 不能抑制六螺旋的形成第64-65页
     ·P20 抑制gp41 介导的细胞融合第65-67页
     ·P20 能够广泛抑制HIV-1 毒株第67-69页
     ·P20 的核心功能区位于C 末端附近第69-75页
   ·本章小结第75-77页
第4章 gp41 与NK 细胞受体的相互作用研究第77-94页
   ·本章引言第77页
   ·材料和方法第77-81页
     ·材料第77-78页
     ·N63蛋白的制备和提纯第78页
     ·N63 对噬菌体肽库的筛选第78-80页
     ·阳性噬菌体的鉴定第80页
     ·淋巴细胞分离和标记第80-81页
   ·结果与讨论第81-92页
     ·N63细胞的表达与纯化第81-82页
     ·N63 性质的鉴定第82-83页
     ·N63 结合蛋白的筛选和鉴定第83-86页
     ·N63 与KP1 结合的动力学分析第86-88页
     ·N63 与人体NK 细胞相结合的初步鉴定第88-89页
     ·N63 与KIR3DL2 的相互作用第89-91页
     ·病毒粒子与KIR3DL2 的相互作用第91-92页
   ·本章小结第92-94页
第5章 结论第94-97页
   ·研究工作总结第94-95页
   ·下一步工作的展望第95-97页
参考文献第97-113页
致谢第113-115页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第115页

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