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家蚕(Bombyx mori)耐氟性研究和细胞色素P450基因cyp6u1及cyp6α8的分子克隆与表达分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
第一章 文献综述第15-23页
   ·氟与氟污染第15页
   ·氟中毒第15-19页
     ·动物氟中毒第15-17页
     ·人氟中毒第17-19页
       ·人类氟中毒机制研究第17-18页
       ·人类耐氟基因相关研究第18-19页
   ·家蚕耐氟性研究第19-21页
     ·耐氟生理生化研究第19-20页
     ·耐氟性指标研究进展第20-21页
     ·耐氟基因研究进展第21页
   ·细胞色素P450解毒酶研究第21-23页
第二章 引言第23-27页
   ·研究目的和意义第23-24页
   ·主要研究内容第24-25页
   ·研究路线第25-27页
第三章 氟离子含量检测方法研究第27-37页
   ·氟离子的检测方法第27-28页
     ·标准曲线法第27页
     ·标准加入法第27-28页
   ·氟离子选择电极法的原理第28页
   ·材料与方法第28-32页
     ·材料第28-29页
       ·桑叶第28页
       ·仪器和设备第28页
       ·主要试剂及配置第28-29页
     ·实验方法第29-32页
       ·总离子强度缓冲液配置第29页
       ·绘制标准曲线第29-31页
       ·加入不同量盐酸检测氟离子第31页
       ·不同的晾干时间处理桑叶第31页
       ·不同的浸泡时间处理桑叶第31-32页
       ·不同的浸提方式处理桑叶第32页
   ·结果分析第32-35页
     ·总离子强度缓冲液第32-33页
     ·绘制标准曲线第33页
     ·不同盐酸量对氟离子检测的影响第33-34页
     ·不同晾干时间第34页
     ·不同浸泡时间第34-35页
     ·不同浸提方式第35页
   ·讨论第35-37页
第四章 氟化物对家蚕生长发育影响研究第37-57页
   ·氟化物对家蚕体重增长影响第37-41页
     ·材料和方法第37-38页
       ·实验材料第37-38页
       ·实验方法第38页
     ·结果与分析第38-41页
       ·四龄期体重增长变化分析结果第38-39页
       ·五龄期体重变化分析结果第39-41页
     ·讨论第41页
       ·氟影响家蚕的体重增长第41页
       ·不同品系耐受性不同第41页
       ·龄期不同,氟伤害存在差异第41页
   ·氟化物对家蚕健康性影响研究第41-45页
     ·材料和方法第41-42页
       ·实验材料第41页
       ·实验方法第41-42页
     ·结果与分析第42-44页
       ·家蚕死亡体表特征第42页
       ·四龄氟中毒死亡率分析第42-43页
       ·五龄氟中毒死亡率分析第43-44页
     ·讨论第44-45页
       ·氟中毒生理特征第44页
       ·氟中毒伤害程度与品种耐氟性相关第44页
       ·氟中毒家蚕个体的自身调节第44-45页
   ·氟化物对家蚕食桑量影响研究第45-48页
     ·材料与方法第45页
       ·实验材料第45页
       ·实验方法第45页
     ·实验结果第45-47页
       ·氟化物对四龄家蚕食桑量的影响第45-46页
       ·氟化物对五龄家蚕食桑量的影响第46-47页
     ·讨论第47-48页
       ·氟化物影响家蚕食桑量第47页
       ·氟化物影响家蚕食桑量因品种而异第47-48页
       ·氟化物对家蚕食桑量的影响因龄期而异第48页
   ·氟化物对家蚕蚕沙量影响第48-51页
     ·材料与方法第48-49页
       ·材料第48-49页
       ·实验方法第49页
     ·结果与分析第49-51页
       ·氟化物对4龄家蚕蚕沙量的影响第49-50页
       ·氟化物对5龄家蚕蚕沙量的影响第50-51页
     ·讨论第51页
   ·家蚕耐氟与敏感品种乙酰胆碱酯酶的比较研究第51-57页
     ·材料与方法第51-53页
       ·材料第51-52页
       ·测定方法第52-53页
     ·结果与分析第53-55页
       ·蛋白质标准曲线第53页
       ·家蚕乙酰胆碱酯酶酶原蛋白的测定第53-54页
       ·家蚕乙酰胆碱酯酶活性检测第54-55页
     ·讨论第55-57页
第五章 氟离子在家蚕体内代谢研究第57-67页
   ·材料与方法第57-59页
     ·实验材料第57页
       ·实验材料第57页
       ·仪器和设备第57页
       ·主要试剂及配置第57页
     ·实验方法第57-59页
       ·养蚕第57页
       ·样品处理第57-58页
       ·氟含量检测第58-59页
       ·计算排氟量第59页
       ·计算体内氟含量第59页
   ·结果与分析第59-64页
     ·蚕沙氟浓度的检测第59-62页
       ·蚕沙氟浓度数据对比第59-60页
       ·4龄排氟量计算第60-61页
       ·5龄排氟量计算第61页
       ·家蚕体内氟积累量的比较第61-62页
     ·每天添氟蚕体氟浓度检测第62页
     ·一次性添氟蚕体氟浓度检测第62页
     ·每天添氟蚕体组织氟浓度检测第62-63页
     ·每天添氟T6蚕卵氟浓度检测第63-64页
     ·每天添氟T6蚕蛾氟含量检测第64页
   ·讨论第64-67页
     ·蚕沙氟浓度的比较第64页
     ·家蚕体内氟累积的差异第64页
     ·每天添氟蚕体组织氟浓度第64-65页
     ·一次性添氟蚕体氟浓度第65-67页
第六章 家蚕细胞色素P450基因Bmcyp6ul的克隆及序列分析第67-85页
   ·材料与方法第67-73页
     ·实验材料第67-69页
       ·家蚕品种第67页
       ·试剂配制第67-68页
       ·仪器第68-69页
     ·方法第69-73页
       ·RNA的抽提第69页
       ·RNA的检测第69页
       ·cDNA第一链的合成第69-70页
       ·引物设计和PCR反应第70-71页
       ·胶回收第71-72页
       ·连接第72页
       ·转化第72页
       ·转化大肠杆菌第72页
       ·筛选克隆产物第72-73页
       ·摇菌测序第73页
       ·克隆基因的序列分析第73页
       ·家蚕cyp6uI基因及其横向同源基因芯片表达谱分析第73页
   ·结果与分析第73-82页
     ·家蚕cyp6ul基因片段的获得第73-76页
       ·家蚕精巢组织RNA提取后反转录,A3 PCR验证第73-74页
       ·家蚕cyp6ul基因片段的获得第74-75页
       ·家蚕cyp6ul基因片段的转化第75-76页
     ·家蚕cyp6ul序列信息学分析第76-82页
       ·家蚕cyp6ul基因的核苷酸序列及蛋白质序列分析第76-79页
       ·家蚕cyp6ul核苷酸序列的同源性比对分析第79页
       ·家蚕cyp6ul基因功能分析第79-81页
       ·家蚕cyp6ul基因及其横向同源基因芯片表达谱分析第81-82页
   ·讨论第82-85页
第七章 家蚕基因Bmcyp6a8的克隆及序列与表达分析第85-97页
   ·材料与方法第85-91页
     ·I 材料与主要试剂第85-87页
       ·实验材料第85页
       ·试剂与药品第85-86页
       ·仪器第86-87页
     ·方法第87-91页
       ·RNA的抽提第87页
       ·RNA的检测第87页
       ·cDNA第一链的合成第87-88页
       ·引物设计和PCR反应第88-89页
       ·胶回收第89-90页
       ·连接第90页
       ·转化第90页
       ·转化大肠杆菌第90-91页
       ·筛选克隆产物第91页
       ·家蚕cyp6a8基因序列分析第91页
       ·家蚕cyp6a8基因及其横向同源基因芯片表达谱分析第91页
   ·结果与分析第91-96页
     ·家蚕cyp6a8基因的克隆第91页
     ·家蚕cyp6a8基因的序列分析第91-92页
     ·家蚕cyp6a8基因的同源性分析第92-95页
     ·家蚕cyp6a8基因及其横向同源基因芯片表达谱分析第95-96页
   ·讨论第96-97页
第八章 综合和结论第97-99页
论文的创新第99-101页
参考文献第101-119页
博士在读期间发表文章及参加课题情况第119-121页
致谢第121-123页
附录第123页

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