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重组鸡白细胞介素2对禽流感灭活苗的免疫增强作用

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-22页
   ·鸡白细胞介素2 概述第11-17页
     ·鸡 IL-2 的诱生及纯化第11-12页
     ·鸡IL-2 基因的克隆及其基因结构第12-13页
     ·鸡 IL-2 的表达第13-14页
     ·鸡 IL-2 的生物学活性第14-15页
     ·鸡 IL-2 的生物学活性检测第15-16页
     ·鸡 IL-2 的受体的研究第16-17页
   ·IL-2 作为免疫佐剂的研究进展第17-21页
     ·哺乳动物IL-2 作为免疫佐剂的研究进展第17-20页
     ·鸡IL-2 作为免疫佐剂的研究进展第20-21页
   ·研究的目的与意义第21-22页
2 材料与方法第22-32页
   ·试验材料第22-23页
     ·病毒株和疫苗第22页
     ·试验动物第22页
     ·菌株、载体及质粒第22页
     ·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒第22页
     ·主要生化试剂第22-23页
     ·主要实验仪器设备第23页
   ·试验方法第23-31页
     ·鸡 IL-2 基因的克隆与序列分析及其原核表达载体的构建第23-26页
     ·ChIL-2 基因表达载体的构建第26页
     ·ChIL-2 基因的表达及蛋白纯化第26-27页
     ·ChIL-2 融合蛋白的 Western-blot 鉴定第27页
     ·ChIL-2 融合蛋白多克隆抗血清的制备和鉴定第27-28页
     ·ChIL-2 融合蛋白的生物学活性检测(MTT 法)第28页
     ·ChIL-2 重组蛋白对禽流感灭活苗的免疫增强作用第28-31页
   ·数据处理第31-32页
3 试验结果第32-50页
   ·ChIL-2 基因的克隆与序列分析第32-35页
     ·细胞培养及总 RNA 的提取第32页
     ·RT-PCR第32-33页
     ·重组质粒 pMD-18-T-IL-2 的鉴定第33-34页
     ·重组质粒 pMD-18-T-IL-2 的测序结果第34-35页
   ·ChIL-2 基因表达载体的构建第35-36页
     ·重组表达质粒的 PCR 鉴定第35页
     ·重组表达质粒的双酶切鉴定第35-36页
   ·ChIL-2 基因的表达和蛋白纯化第36-37页
     ·重组蛋白的表达第36页
     ·重组蛋白的纯化第36-37页
   ·Western blot 方法检测诱导的蛋白第37页
   ·多克隆抗体的制备第37-38页
   ·Western blot 方法检测多克隆抗体第38-39页
   ·MTT 法测定鸡 IL-2 重组蛋白的生物活性第39页
   ·雏鸡免疫器官及血液T、B 淋巴细胞增殖功能动态变化第39-43页
     ·雏鸡胸腺T 淋巴细胞增殖功能动态变化第39-40页
     ·雏鸡脾脏T 淋巴细胞增殖功能动态变化第40-41页
     ·雏鸡血液T 淋巴细胞增殖功能动态变化第41页
     ·雏鸡脾脏B 淋巴细胞增殖功能动态变化第41-42页
     ·雏鸡血液B 淋巴细胞增殖功能动态变化第42-43页
   ·雏鸡免疫器官及血液不同亚型T 淋巴细胞动态变化第43-46页
     ·雏鸡免疫器官及血液CD4+ T 淋巴细胞动态变化第43-44页
     ·雏鸡免疫器官及血液CD8+ T 淋巴细胞动态变化第44-46页
   ·雏鸡免疫器官指数的动态变化第46-48页
   ·免疫雏鸡 HI 抗体效价的动态变化第48-49页
   ·攻毒后保护率的比较第49-50页
4 讨论第50-56页
   ·ChIL-2 基因的克隆第50页
   ·ChIL-2 的表达、纯化及多抗血清的制备第50-52页
   ·ChIL-2 的生物学活性检测第52页
   ·ChIL-2 对禽流感灭活苗的免疫增强作用第52-56页
     ·雏鸡免疫后T 淋巴细胞增殖功能变化第53页
     ·雏鸡免疫后B 淋巴细胞增殖功能变化第53-54页
     ·雏鸡免疫后不同亚型T 细胞动态变化第54-55页
     ·雏鸡免疫器官指数的动态变化第55页
     ·免疫雏鸡 HI 抗体的动态变化及免疫保护率的比较第55-56页
5 结论第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-64页
附录:主要溶液的配制第64-66页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第66页

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