| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 1 绪言 | 第11-29页 |
| ·黑麦草概述 | 第11-12页 |
| ·特性 | 第11页 |
| ·栽培技术 | 第11-12页 |
| ·经济价值 | 第12页 |
| ·抗冻基因研究进展 | 第12-22页 |
| ·植物抗冻相关蛋白 | 第12-13页 |
| ·植物抗冻蛋白的活性及其作用机理 | 第13-17页 |
| ·冰核蛋白的活性及其作用机理 | 第17-19页 |
| ·植物抗冻蛋白与冰核蛋白的协作机制 | 第19-22页 |
| ·RNA沉默研究进展 | 第22-25页 |
| ·RNA沉默研究历史 | 第22-23页 |
| ·RNA沉默机制研究进展 | 第23-25页 |
| ·RNA沉默的生物学意义 | 第25页 |
| ·本研究的意义、主要内容和技术路线 | 第25-29页 |
| 2 黑麦草重结晶抑制蛋白基因家族的克隆 | 第29-49页 |
| ·材料与方法 | 第29-39页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·实验方法 | 第31-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-47页 |
| ·黑麦草总DNA的提取 | 第39-40页 |
| ·黑麦草冷诱导后叶片总RNA提取 | 第40页 |
| ·黑麦草IRIP基因家族成员的基因组DNA克隆 | 第40-41页 |
| ·黑麦草IRIP基因家族成员的cDNA克隆 | 第41-42页 |
| ·重组子的菌液PCR鉴定 | 第42页 |
| ·重组子的测序及序列分析 | 第42-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 3 黑麦草IRIP基因家族的原核表达研究 | 第49-61页 |
| ·材料与方法 | 第49-56页 |
| ·实验材料 | 第49-52页 |
| ·实验方法 | 第52-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-59页 |
| ·构建原核表达载体 | 第56-57页 |
| ·重组子的酶切鉴定 | 第57-58页 |
| ·IRIP基因家族在pET-30a中的诱导表达 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 4 黑麦草IRIP基因家族的RNAi沉默载体构建及组培体系建立 | 第61-75页 |
| ·材料与方法 | 第61-68页 |
| ·实验材料 | 第61-63页 |
| ·实验方法 | 第63-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-72页 |
| ·RNAi中间载体的酶切鉴定 | 第68页 |
| ·制备RNAi载体构建元件 | 第68-70页 |
| ·RNAi沉默片段装载酶切鉴定 | 第70页 |
| ·植物双元沉默载体酶切检测 | 第70-71页 |
| ·黑麦草愈伤组织诱导 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72-75页 |
| 5 结论与创新点 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 附录A:英文缩略词及中英文对照 | 第87-88页 |
| 附录B 攻读学位期间的主要学术成果 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |