| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 缩写表 | 第10-14页 |
| 第一章 肿瘤转移抑制蛋白的研究进展及RNAI技术的研究进展 | 第14-28页 |
| ·MTSS1的结构与功能 | 第14-16页 |
| ·MTSS1的研究现状 | 第16-20页 |
| ·Mtss1在肿瘤转移中消失 | 第16-17页 |
| ·Mtss1与肌动蛋白细胞骨架相关 | 第17-19页 |
| ·Mtss1与发育相关 | 第19-20页 |
| ·RNAI | 第20-26页 |
| ·RNAi的发现 | 第20-21页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第21-23页 |
| ·RNAi表达载体 | 第23-24页 |
| ·RNA干扰的特点 | 第24-25页 |
| ·RNA干扰技术的应用 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
| 第二章 MTSS1 shRNA pSUPER-RETRO干扰载体的构建与鉴定 | 第28-40页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第28-32页 |
| ·材料与试剂 | 第28页 |
| ·主要溶液 | 第28-31页 |
| ·仪器 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-38页 |
| ·大肠杆菌感受态制备 | 第32页 |
| ·质粒转化 | 第32-33页 |
| ·质粒大量抽提 | 第33页 |
| ·质粒小量抽提 | 第33-34页 |
| ·小鼠Mtss1基因的shRNA序列的设计与合成 | 第34-35页 |
| ·pSUPER-retro-shRNA干扰载体的构建和鉴定 | 第35-36页 |
| ·细胞培养和转染 | 第36-37页 |
| ·细胞传代和细胞冻存 | 第37页 |
| ·Western blot分析 | 第37-38页 |
| ·实验结果 | 第38-40页 |
| ·pSUPER-Mtss1-shRNA载体的鉴定 | 第38-39页 |
| ·pSUPER-Mtss1-shRNA干扰载体的干扰效率的测定 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40页 |
| 第三章 MTSS1慢病毒干扰载体的构建及初步功能的鉴定 | 第40-51页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第41-42页 |
| ·材料与试剂 | 第41页 |
| ·主要溶液 | 第41-42页 |
| ·仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-46页 |
| ·Mtss1 pLVTHM慢病毒重组质粒构建和鉴定 | 第42-43页 |
| ·慢病毒的制备和纯化 | 第43-44页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第44页 |
| ·慢病毒感染效率及慢病毒介导的RNAi效率测定 | 第44-45页 |
| ·浦肯野细胞神经元纯化与原代培养 | 第45-46页 |
| ·实验结果 | 第46-50页 |
| ·pLVTHM-Mtss1-shRNA慢病毒载体的鉴定 | 第46-48页 |
| ·Mtss1 shRNA慢病毒抑制Mtss1表达的鉴定 | 第48-49页 |
| ·pLVTHM-Mtss1-shRNA慢病毒感染效率的检验 | 第49页 |
| ·浦肯野神经元原代培养 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 结语 | 第51-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
