| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第13-19页 |
| 1.1 拟穴青蟹养殖概况及病害 | 第13页 |
| 1.2 拟穴青蟹部分免疫相关因子简介 | 第13-18页 |
| 1.2.1 C-型凝集素基因 | 第14页 |
| 1.2.2 巨噬细胞移动抑制因子 | 第14-15页 |
| 1.2.3 γ-干扰素诱导的巯基还原酶 | 第15-16页 |
| 1.2.4 脂肪酸结合蛋白 | 第16-17页 |
| 1.2.5 金属硫蛋白 | 第17-18页 |
| 1.3 本研究的技术路线、目的及意义 | 第18-19页 |
| 1.3.1 本研究的技术路线 | 第18页 |
| 1.3.2 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第2章 拟穴青蟹C-型凝集素基因的克隆和功能特征 | 第19-42页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 实验生物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第20页 |
| 2.1.4 引物 | 第20-21页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-29页 |
| 2.2.1 细菌人工感染和样品采集 | 第22页 |
| 2.2.2 总RNA的提取和检测 | 第22-23页 |
| 2.2.3 cDNA第一链合成 | 第23-24页 |
| 2.2.4 凝集素基因cDNA序列的克隆 | 第24-25页 |
| 2.2.5 目的片段回收 | 第25页 |
| 2.2.6 PCR产物与载体连接 | 第25-26页 |
| 2.2.7 感受态细胞的制备 | 第26页 |
| 2.2.8 转化 | 第26页 |
| 2.2.9 阳性克隆鉴定及测序 | 第26页 |
| 2.2.10 基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.11 凝集素基因组片段的扩增 | 第27页 |
| 2.2.12 质粒提取 | 第27-28页 |
| 2.2.13 定量PCR | 第28页 |
| 2.2.14 序列分析和数据统计分析 | 第28-29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-40页 |
| 2.3.1 总RNA的提取质量 | 第29页 |
| 2.3.2 凝集素cDNA序列分析 | 第29-32页 |
| 2.3.3 凝集素氨基酸序列的多重比对及系统进化分析 | 第32-35页 |
| 2.3.4 凝集素基因组DNA结构 | 第35-36页 |
| 2.3.5 凝集素的转录表达谱 | 第36-38页 |
| 2.3.6 病原菌刺激对凝集素表达的影响 | 第38-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-42页 |
| 2.4.1 Sp-lectin3和Sp-lectin4是青蟹C-型凝集素家族的两个新成员 | 第40页 |
| 2.4.2 Sp-lectin3和Sp-lectin4在胚胎及幼体发育过程中作用 | 第40-41页 |
| 2.4.3 Sp-lectin3和Sp-lectin4在不同部位发挥抗弧菌的免疫应答 | 第41-42页 |
| 第3章 拟穴青蟹巨噬细胞移动抑制因子的克隆和功能特征 | 第42-61页 |
| 3.1 试验材料 | 第42-44页 |
| 3.1.1 引物 | 第42-43页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第43-44页 |
| 3.2 试验方法 | 第44-45页 |
| 3.2.1 巨噬细胞移动抑制因子cDNA序列克隆 | 第44页 |
| 3.2.2 巨噬细胞移动抑制因子基因组片段的扩增 | 第44-45页 |
| 3.2.3 质粒提取 | 第45页 |
| 3.2.4 定量PCR | 第45页 |
| 3.2.5 序列分析和数据统计分析 | 第45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-59页 |
| 3.3.1 巨噬细胞移动抑制因子cDNA序列分析 | 第45-48页 |
| 3.3.2 巨噬细胞移动抑制因子氨基酸序列的多重比对及进化分析 | 第48-52页 |
| 3.3.3 巨噬细胞移动抑制因子的基因组结构 | 第52-53页 |
| 3.3.4 巨噬细胞移动抑制因子的转录表达谱 | 第53-56页 |
| 3.3.5 病原菌刺激对巨噬细胞移动抑制因子表达的影响 | 第56-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-61页 |
| 第4章 γ-干扰素诱导巯基还原酶基因的克隆和功能特征 | 第61-83页 |
| 4.1 试验材料 | 第61-63页 |
| 4.1.1 引物 | 第61-63页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第63页 |
| 4.2 试验方法 | 第63-65页 |
| 4.2.1 γ-干扰素诱导巯基还原酶cDNA序列的克隆 | 第63-64页 |
| 4.2.2 γ-干扰素诱导巯基还原酶基因组片段的扩增 | 第64页 |
| 4.2.3 质粒提取 | 第64页 |
| 4.2.4 定量PCR | 第64页 |
| 4.2.5 序列分析和数据处理 | 第64-65页 |
| 4.3 实验结果 | 第65-80页 |
| 4.3.1 γ-干扰素诱导巯基还原酶cDNA序列分析 | 第65-70页 |
| 4.3.2 γ-干扰素诱导巯基还原酶氨基酸序列的多重比对及进化分析 | 第70-72页 |
| 4.3.3 γ-干扰素诱导巯基还原酶的基因组结构 | 第72-75页 |
| 4.3.4 γ-干扰素诱导巯基还原酶的转录表达谱 | 第75-77页 |
| 4.3.5 病原菌刺激对γ-干扰素诱导巯基还原酶表达的影响 | 第77-80页 |
| 4.4 讨论 | 第80-83页 |
| 第5章 拟穴青蟹脂肪酸结合蛋白基因的克隆和功能特征 | 第83-96页 |
| 5.1 试验材料 | 第83-84页 |
| 5.1.1 实验生物材料 | 第83页 |
| 5.1.2 引物 | 第83-84页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第84页 |
| 5.2 试验方法 | 第84-86页 |
| 5.2.1 人工感染和样品采集 | 第84页 |
| 5.2.2 脂肪酸结合蛋白基因cDNA序列的克隆 | 第84-85页 |
| 5.2.3 脂肪酸结合蛋白基因组片段的扩增 | 第85页 |
| 5.2.4 质粒样品的提取 | 第85页 |
| 5.2.5 定量PCR | 第85-86页 |
| 5.2.6 序列分析和数据统计分析 | 第86页 |
| 5.3 实验结果 | 第86-94页 |
| 5.3.1 脂肪酸结合蛋白cDNA序列分析 | 第86-87页 |
| 5.3.2 脂肪酸结合蛋白氨基酸序列的多重比对及系统进化分析 | 第87-91页 |
| 5.3.3 脂肪酸结合蛋白的基因组结构 | 第91-92页 |
| 5.3.4 脂肪酸结合蛋白的转录表达谱 | 第92-93页 |
| 5.3.5 受到病原菌刺激对脂肪酸结合蛋白表达的影响模式 | 第93-94页 |
| 5.4 讨论 | 第94-96页 |
| 第6章 拟穴青蟹金属硫蛋白基因的克隆和功能特征 | 第96-111页 |
| 6.1 试验材料 | 第96-97页 |
| 6.1.1 引物 | 第96-97页 |
| 6.1.2 实验仪器 | 第97页 |
| 6.2 试验方法 | 第97-99页 |
| 6.2.1 金属硫蛋白基因cDNA序列的克隆 | 第97-98页 |
| 6.2.2 金属硫蛋白基因基因组片段的扩增 | 第98页 |
| 6.2.3 质粒提取 | 第98页 |
| 6.2.4 定量PCR | 第98-99页 |
| 6.2.5 序列分析和数据处理 | 第99页 |
| 6.3 实验结果 | 第99-109页 |
| 6.3.1 金属硫蛋白基因cDNA序列分析 | 第99-101页 |
| 6.3.2 金属硫蛋白基因氨基酸序列的多重比对及进化分析 | 第101-103页 |
| 6.3.3 金属硫蛋白基因的基因组结构 | 第103-104页 |
| 6.3.4 金属硫蛋白基因的转录表达谱 | 第104-106页 |
| 6.3.5 病原菌刺激对金属硫蛋白基因表达的影响 | 第106-109页 |
| 6.4 讨论 | 第109-111页 |
| 第7章 小结 | 第111-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-123页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第123页 |
