| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·杆状病毒简介及其分类地位 | 第12-13页 |
| ·杆状病毒的发育循环 | 第13-14页 |
| ·两种表型BV和ODV | 第14页 |
| ·包涵体的形成与简介 | 第14页 |
| ·杆状病毒基因组序列与结构 | 第14-20页 |
| ·杆状病毒的基因组基因分析 | 第15页 |
| ·功能性基因简介 | 第15-20页 |
| ·杆状病毒表达载体系统 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20-21页 |
| ·技术路线图 | 第21-22页 |
| 第二章 常规的材料与方法 | 第22-29页 |
| ·材料 | 第22-25页 |
| ·菌种和载体 | 第22页 |
| ·昆虫、病毒、细胞系和细胞培养基 | 第22页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第22页 |
| ·其它试剂 | 第22页 |
| ·试剂的配制 | 第22-25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·氯化钙法制备感受态细胞 | 第25-26页 |
| ·质粒DNA转化 | 第26页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第26页 |
| ·PCR反应 | 第26页 |
| ·连接反应 | 第26-27页 |
| ·SDS-PAGE | 第27页 |
| ·Western印迹 | 第27页 |
| ·Lipofection转染昆虫细胞 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-29页 |
| 第三章 BmNPV Bm94基因序列分析 | 第29-35页 |
| ·材料与方法 | 第29-30页 |
| ·数据来源 | 第29页 |
| ·计算机分析 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-33页 |
| ·Bm94的序列特征 | 第30-31页 |
| ·氨基酸序列的同源性比较 | 第31-33页 |
| ·Bm94的进化分析 | 第33页 |
| ·讨论与总结 | 第33-35页 |
| 第四章 BmNPV Bm94基因在大肠杆菌中的表达及抗体的制备 | 第35-42页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·供试病毒 | 第35页 |
| ·工具酶及试剂 | 第35页 |
| ·引物设计及PCR反应 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·BmNPV基因组DNA的抽提 | 第36页 |
| ·PCR和连接反应 | 第36页 |
| ·原核表达表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·Bm94基因在大肠杆菌中的表达 | 第37页 |
| ·Western blotting分析 | 第37页 |
| ·目的蛋白的回收 | 第37-38页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·BmNPV Bm94基因的克隆 | 第38-39页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第40页 |
| ·Western blotting分析 | 第40页 |
| ·目的蛋白的回收及多克隆抗体的制备 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第五章 Bm94基因在BmN细胞中的转录时相与表达时相 | 第42-50页 |
| ·材料与方法 | 第42-46页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·结果和讨论 | 第46-49页 |
| ·Bm94的转录时相 | 第46-47页 |
| ·Bm94的表达时相 | 第47页 |
| ·BM94蛋白在病毒结构中的定位 | 第47-48页 |
| ·BM94的亚细胞定位 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第六章 家蚕核型多角体病毒Bm94基因的缺失 | 第50-57页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·质粒和菌株 | 第50页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第50页 |
| ·SOC培养基 | 第50-51页 |
| ·PCR引物合成 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-54页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第51页 |
| ·2 大肠杆菌菌株BW25113-Bac的制备 | 第51-52页 |
| ·PCR引物的设计和线性化片段的构建 | 第52-53页 |
| ·电转化 | 第53页 |
| ·Bacmid DNA的提取 | 第53页 |
| ·Bm94基因缺失bacmid的PCR鉴定 | 第53-54页 |
| ·结果和讨论 | 第54-56页 |
| ·Bm94基因打靶载体构建的鉴定 | 第54-55页 |
| ·大肠杆菌菌株BW25113-Bac的获得和缺失重组子的构建 | 第55页 |
| ·Bm94缺失重组子的验证 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第七章 结论与展望 | 第57-58页 |
| 一、主要结论 | 第57页 |
| 二、研究展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 在学期间发表的论文 | 第64页 |
| 参加课题 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
